西工大发表论文分类
公开发表的论文分为六个级别（类）：第一级－T类：特种刊物论文，指在《SCIENCE》和《NATURE》两本期刊上发表的论文。第二级－A类：权威核心刊物论文，指被国际通用的SCIE、EI、ISTP、SSCI以及A&HCI检索系统所收录的论文（以中国科技信息研究所检索为准），或同一学科在国内具有权威影响的中文核心刊物上发表的论文，论文不含报道性综述、摘要、消息等。第三级－B类：重要核心刊物论文，指在国外核心期刊上刊登的论文（见《国外科技核心期刊手册》）或在国内同一学科的中文核心期刊中具有重要影响的刊物上发表的论文。第四级－C类：一般核心刊物论文，指《全国中文核心期刊要目总览?北大图书馆2004版》刊物上发表的论文。第五级－D类：一般公开刊物论文，指在国内公开发行的刊物上（有期刊号“CN”“ISSN” ，有邮发代号）发表的论文。第六级－E类：受限公开刊物论文，指在国内公开发行的但受发行限制的刊物上（仅有期刊号、无邮发代号）发表的论文。（3）内部刊物发表的论文分为三个级别（类）：内部刊物必须为教育部门主办，以主办单位级别分为：第七级－国家级内刊（中国教育学会及其专委会、教育部等自办刊物），第八级－省级内刊，第九级－区级内刊。（4）学术会议论文的分类：①参加国际性学术组织举办的国际学术会议，且论文作者之一做会议发言，收入正式出版的论文集（有书刊号）的论文，确定为第四级（C类）。未发言的确定为第五级（D类）。②参加全国性学术组织举办的全国学术会议，且论文作者之一做会议发言，收入正式出版的论文集（有书刊号）的论文，确定为第五级（D类）。未发言的确定为第六级（E类）。③参加省级学术会议，且论文作者之一做会议发言，收入正式出版的论文集（有书刊号）的论文，确定为E类。未发言的确定为区级内刊。（5）凡收录于教育出版社、书号为“ISBN”类论文专集（或其它刊物）的与教育教学相关论文，凭发表原件按区级内刊折半计分。（6）非正常周期出版的刊物的认定各级期刊的“增刊、特刊、专刊、综合版、专辑”等上发表的论文，有期刊号的，包括列入北大核心期刊目录的刊物，以期刊主办单位确定为相应级别内部刊物折半计分。（7）下列情况一般不作为学术论文对待：①与所从事专业技术工作非密切相关的文章，如评论、文摘、短篇报道、科普文章、文艺、新闻等作品，以及会议简报、动态、讲座等资料性质的材料；②刊号中含有H、HK等由香港出版发行且未被认定准许或不能确定是否准许在大陆公开发行的刊物；
论文发表第一级别：T类此类型级别一般是指特种期刊论文，主要是在《SCIENCE》和《NATURE》两本期刊上发表的论文。其发表难度是最大的，大多数作者都无法达到这一级别。论文发表第二级别：A类此类型级别一般是指权威的核心刊期刊论文，主要是在国际通用的SCIE、EI、ISTP、SSCI以及A&HCI等检索系统上所收录的论文，或在国内具有权威影响的中文核心期刊上发表的论文。发表难度仅次于T类，并且对英文有很高的要求。论文发表第三级别：B类此类型级别是指重要核心期刊论文，主要是在国外核心期刊上刊登的论文或在国内中文核心期刊中等有重要影响的期刊上发表的论文。论文发表第四级别：C类此类型级别是指一般核心期刊论文，主要指《全国中文核心期刊北大图书馆2017版》期刊上发表的的论文。论文发表第五级别：D类此类型级别是指一般公开期刊论文，主要是在国内公开发行的刊物上(有期刊号CN、ISSN，有邮发代号)发表的论文。论文发表第六级别：E类此类型级别一般是指受限公开期刊论文，主要是在国内公开发行的但受发行现在的刊物上(仅有期刊号、无邮发代号)发表的论文。
研究生发表论文的级别具体分为A类论文、B类论文、C类论文：
一、A类论文包括：
1、SCIE检索的期刊论文：科学引文索引（网络版）（Science Citation Index Expanded）。
2、EI（核心版）检索的期刊论文：工程索引（核心版）（Engineering Index Compendex）。
3、SSCI检索的论文：社会科学引文索引（网络版）（Social Science Citation Index）。
4、A&HCI检索的论文: 艺术与人文科学引文索引 (Arts & Humanities Citation Index)。
5、《新华文摘》和《中国社会科学文摘》转载论文，《人大复印资料》收录的论文。
6、校定A类中文期刊上发表的论文。
二、B类论文包括：
1、EI（网络版）（Ei Compendex Web）中非EI（核心版）检索的期刊论文，SCIE检索的会议论文，EI检索的会议论文。
2、ISSHP检索的论文：人文社会科学国际会议论文集索引（Index to Social Sciences & Humanities Proceedings）。
3、在中国社会科学引文索引CSSCI（China Social Science Citation Index）中的期刊上发表的论文。
三、C类论文包括：
1、除了A类、B类以外，在北京大学《中文核心期刊要目总览》中发表的论文。
2、在国外英文期刊上发表的学术论文。
3、公开出版发行的国际会议论文。
4、公开出版发行的全国一级学会会议论文。
5、在中国科学院的科技论文数据库CSCD（Chinese Science Citation Database）中的期刊上发表的论文。
6、在中国管理科学研究院科学引文数据库SCD（Science Citation Database）中的期刊上发表的论文。
7、ISTP检索的论文：科学与技术国际会议论文集索引（Index to Scientific Technical Proceedings）。
扩展资料：
1、CSCD来源期刊目录以中国科学文献服务系统公布的目录为准。
2、CSSCI来源期刊目录以中国社会科学研究评价中心公布的目录为准。
3、国内全国一级学会以中国科学技术协会公布的理科、工科、农科、医科、交叉学科的全国学会目录为准。
4、北京大学《中文核心期刊要目总览》以最新版为准。
5、发表外国语言研究方面的学术论文不限于英文期刊。
6、“公开出版发行的国际会议论文”包括有出版号的国际会议论文集。
7、“公开出版发行的全国一级学会会议论文” 包括有出版号的全国一级学会会议论文集、北京大学《中文核心期刊要目总览》期刊增刊收录的会议论文。
参考资料来源：上海出版印刷高等专科学校-关于下发学校校定国内外期刊源及论文分类的通知
浙江理工大学论文发表分类
论文发表第一级别：T类
此类型级别一般是指特种期刊论文，主要是在《SCIENCE》和《NATURE》两本期刊上发表的论文。其发表难度是最大的，大多数作者都无法达到这一级别。
论文发表第二级别：A类
此类型级别一般是指权威的核心刊期刊论文，主要是在国际通用的SCIE、EI、ISTP、SSCI以及A&HCI等检索系统上所收录的论文，或在国内具有权威影响的中文核心期刊上发表的论文。发表难度仅次于T类，并且对英文有很高的要求。
论文发表第三级别：B类
此类型级别是指重要核心期刊论文，主要是在国外核心期刊上刊登的论文或在国内中文核心期刊中等有重要影响的期刊上发表的论文。
论文发表第四级别：C类
此类型级别是指一般核心期刊论文，主要指《全国中文核心期刊北大图书馆2017版》期刊上发表的的论文。
论文发表第五级别：D类
此类型级别是指一般公开期刊论文，主要是在国内公开发行的刊物上(有期刊号CN、ISSN，有邮发代号)发表的论文。
论文发表第六级别：E类
此类型级别一般是指受限公开期刊论文，主要是在国内公开发行的但受发行现在的刊物上(仅有期刊号、无邮发代号)发表的论文。
SCI源刊>EI源刊>国内中文核心>CSCD>EI会议>SCCSI(南大核心)>科技核心和一般行业核心>普刊(本文出自：普刊学术)SCI源刊无疑是最权威的，这里要说明的是，已经没有SCI会议论文这个说法了，因为SCI数据库已经不再接受会议论文。只接受期刊论文。EI源刊也是属于比较权威的文章，但是EI源刊是允许有中文稿件存在的，如果你是投过内的EI源刊，那么其录用难度与国外一般的SCI难度其实相当了。当然EI源刊中也有水刊，EI公司以前是每年更新一次EI目录，现在是每个月更新一次，所以现在如果投比较水的EI源刊，有一定风险。中文核心算是比较权威的国内期刊论文，现在是每3年更新一次。但是中文核心中，有些期刊可能既是中文核心，又是EI源刊，这种期刊一般录用难度都很大。(本文出自：普刊学术)CSCD，被称为中国的SCI，不过这种叫法有失科学性，总体上讲这种文章还是比较权威的EI会议，这个争议比较大，但是一般来说，只要你文章进EI数据库被EI检索，其论文级别还是比较高的CSSCI，又叫南大核心，它只是名字中出现了SCI，它与SCI没有任何关系。主要面向社会科学类的论文一般核心：这种论文相对来说比较好录用1 、什么是核心期刊 ? 简单地说，核心期刊是学术界通过一整套科学的方法，对于期刊质量进行跟踪评价，并以情报学理论为基础，将期刊进行分类定级，把最为重要的一级称之为核心期刊。2、什么是中文核心期刊? 对中国(不含港、澳、台)出版的期刊中核心期刊的认定，目前国内比较权威的有两种版本。一是中国科技信息研究所(简称中信所)每年出一次的《中国科技期刊引证报告》(以下简称《引证报告》);另一种是北京大学图书馆与北京高校图书馆期刊工作研究会联合编辑出版的《中文核心期刊要目总览》(以下简称《要目总览》)。《要目总览》不定期出版， 1996 年出版了第二版， 2000 版，2004年版。2008年版暂未出版。《要目总览》收编包括社会科学和自然科学等各种学科类别的中文期刊。其中对核心期刊的认定通过五项指标综合评估。《引证报告》统计源期刊的选取原则和《要目总览》核心期刊的认定各依据了不同的方法体系，所以二者界定的核心期刊(指科技类)不完全一致。3、什么是国家级期刊? 一般说来，“国家级” 期刊 ，即由党中央、国务院及所属各部门，或中国科学院、中国社会科学院、各民主党派和全国性人民团体主办的期刊及国家一级专业学会主办的会刊。另外，刊物上明确标有“全国性期刊”，“核心期刊”字样的刊物也可视为国家级刊物。4.什么是“省级”期刊? 即由各省、自治区、直辖市及其所属部、委办、厅、局主办的期刊以及由各本、专科院校主办的学报(刊)。5、什么是学术期刊? 学术期刊刊发的文献以学术论文为主，而非学术期刊刊发的文献则以文件、报道、讲话、体会、知识等只能作为学术研究的资料而不是论文的文章为主。由于《总览》选刊的依据是载文量多、收录量大和被引次数多 ，并不强调学术期刊与非学术期刊的界线，对此自然也就没有进行严格区分。 具体说来，《总览》学术与非学术不分，主要表现在两个方面，一是期刊的定性，二是期刊的宗旨。本内容转载于、什么是CN类刊物 ? 所谓CN 类刊物是指在我国境内注册、国内公开发行的刊物。该类刊物的刊号均标注有CN字母，人们习惯称之为CN类刊物。7、什么是ISSN类刊 ? 现在许多杂志则同时具有CN和ISSN两种刊号。所谓ISSN 类刊物是指在我国境地外注册，国内、外公开发行的刊物。该类刊物的刊号前标注有ISSN字母。8.什么是CSCD期刊 ?中国科学引文数据库(Chinese Science Citation Database)来源期刊简称为CSCD期刊。中国科学引文数据库分为核心库和扩展库。核心库的来源期刊经过严格的评选,是各学科领域中具有权威性和代表性的核心期刊。扩展库的来源期刊也经过大范围的遴选，是我国各学科领域较优秀的期刊。核心库期刊:669种(以*号为标记); 扩展库期刊:378种(动态)。9.什么是科技论文统计源期刊 科技论文统计源期刊又称为中国科技核心期刊，是由中国科学技术信息研究所经过严格的定量和定性分析选取的各个学科的重要科技期刊。2005年中国科技论文统计源期刊共1608种。10.什么是SCI期刊 SCI(《科学引文索引》，英文全称是Science Citation Index)是美国科学情报研究所出版的一部世界著名的期刊文献检索工具。它收录全世界出版的数、理、化、农、林、医、生命科学、天文、地理、环境、材料、工程技术等自然科学各学科的核心期刊3700多种。通过其严格的选刊标准和评估程序来挑选刊源，使得SCI收录的文献能够全面覆盖全世界最重要和最有影响力的研究成果。SCI从来源期刊数量划分为SCI和SCI-E。SCI指来源刊为3500多种的SCI印刷版和SCI光盘版(SCI Compact Disc Edition, 简称SCI CDE)，SCI-E(SCI Expanded)是SCI的扩展库，收录了5600多种来源期刊，可通过国际联机或因特网进行检索。SCI涵盖学科超过100个，主要涉及农业、生物及环境科学;工程技术及应用科学;医学与生命科学;物理及化学;行为科学
论文发表的等级主要取决与期刊，期刊级别高，自然也随之增高，发表在什么级别的期刊上面，所产生的效果肯定是不同的，给你搜集整理了一些相关的资料，采纳我吧。SCI源刊>EI源刊>国内中文核心>CSCD>EI会议>SCCSI(南大核心)>科技核心和一般行业核心>普刊(本文出自：普刊学术)SCI源刊无疑是最权威的，这里要说明的是，已经没有SCI会议论文这个说法了，因为SCI数据库已经不再接受会议论文。只接受期刊论文。EI源刊也是属于比较权威的文章，但是EI源刊是允许有中文稿件存在的，如果你是投过内的EI源刊，那么其录用难度与国外一般的SCI难度其实相当了。当然EI源刊中也有水刊，EI公司以前是每年更新一次EI目录，现在是每个月更新一次，所以现在如果投比较水的EI源刊，有一定风险。中文核心算是比较权威的国内期刊论文，现在是每3年更新一次。但是中文核心中，有些期刊可能既是中文核心，又是EI源刊，这种期刊一般录用难度都很大。(本文出自：普刊学术)CSCD，被称为中国的SCI，不过这种叫法有失科学性，总体上讲这种文章还是比较权威的EI会议，这个争议比较大，但是一般来说，只要你文章进EI数据库被EI检索，其论文级别还是比较高的CSSCI，又叫南大核心，它只是名字中出现了SCI，它与SCI没有任何关系。主要面向社会科学类的论文一般核心：这种论文相对来说比较好录用1 、什么是核心期刊 ? 简单地说，核心期刊是学术界通过一整套科学的方法，对于期刊质量进行跟踪评价，并以情报学理论为基础，将期刊进行分类定级，把最为重要的一级称之为核心期刊。2、什么是中文核心期刊? 对中国(不含港、澳、台)出版的期刊中核心期刊的认定，目前国内比较权威的有两种版本。一是中国科技信息研究所(简称中信所)每年出一次的《中国科技期刊引证报告》(以下简称《引证报告》);另一种是北京大学图书馆与北京高校图书馆期刊工作研究会联合编辑出版的《中文核心期刊要目总览》(以下简称《要目总览》)。《要目总览》不定期出版， 1996 年出版了第二版， 2000 版，2004年版。2008年版暂未出版。《要目总览》收编包括社会科学和自然科学等各种学科类别的中文期刊。其中对核心期刊的认定通过五项指标综合评估。《引证报告》统计源期刊的选取原则和《要目总览》核心期刊的认定各依据了不同的方法体系，所以二者界定的核心期刊(指科技类)不完全一致。3、什么是国家级期刊? 一般说来，“国家级” 期刊 ，即由党中央、国务院及所属各部门，或中国科学院、中国社会科学院、各民主党派和全国性人民团体主办的期刊及国家一级专业学会主办的会刊。另外，刊物上明确标有“全国性期刊”，“核心期刊”字样的刊物也可视为国家级刊物。4.什么是“省级”期刊? 即由各省、自治区、直辖市及其所属部、委办、厅、局主办的期刊以及由各本、专科院校主办的学报(刊)。5、什么是学术期刊? 学术期刊刊发的文献以学术论文为主，而非学术期刊刊发的文献则以文件、报道、讲话、体会、知识等只能作为学术研究的资料而不是论文的文章为主。由于《总览》选刊的依据是载文量多、收录量大和被引次数多 ，并不强调学术期刊与非学术期刊的界线，对此自然也就没有进行严格区分。 具体说来，《总览》学术与非学术不分，主要表现在两个方面，一是期刊的定性，二是期刊的宗旨。本内容转载于、什么是CN类刊物 ? 所谓CN 类刊物是指在我国境内注册、国内公开发行的刊物。该类刊物的刊号均标注有CN字母，人们习惯称之为CN类刊物。7、什么是ISSN类刊 ? 现在许多杂志则同时具有CN和ISSN两种刊号。所谓ISSN 类刊物是指在我国境地外注册，国内、外公开发行的刊物。该类刊物的刊号前标注有ISSN字母。8.什么是CSCD期刊 ?中国科学引文数据库(Chinese Science Citation Database)来源期刊简称为CSCD期刊。中国科学引文数据库分为核心库和扩展库。核心库的来源期刊经过严格的评选,是各学科领域中具有权威性和代表性的核心期刊。扩展库的来源期刊也经过大范围的遴选，是我国各学科领域较优秀的期刊。核心库期刊:669种(以*号为标记); 扩展库期刊:378种(动态)。9.什么是科技论文统计源期刊 科技论文统计源期刊又称为中国科技核心期刊，是由中国科学技术信息研究所经过严格的定量和定性分析选取的各个学科的重要科技期刊。2005年中国科技论文统计源期刊共1608种。10.什么是SCI期刊 SCI(《科学引文索引》，英文全称是Science Citation Index)是美国科学情报研究所出版的一部世界著名的期刊文献检索工具。它收录全世界出版的数、理、化、农、林、医、生命科学、天文、地理、环境、材料、工程技术等自然科学各学科的核心期刊3700多种。通过其严格的选刊标准和评估程序来挑选刊源，使得SCI收录的文献能够全面覆盖全世界最重要和最有影响力的研究成果。SCI从来源期刊数量划分为SCI和SCI-E。SCI指来源刊为3500多种的SCI印刷版和SCI光盘版(SCI Compact Disc Edition, 简称SCI CDE)，SCI-E(SCI Expanded)是SCI的扩展库，收录了5600多种来源期刊，可通过国际联机或因特网进行检索。SCI涵盖学科超过100个，主要涉及农业、生物及环境科学;工程技术及应用科学;医学与生命科学;物理及化学;行为科学
首先必须明确，国家没有任何一个政府部门为期刊划分级别，所谓不同级别的期刊只是对期刊行业杂志的认知划分，以下内容仅供参考。一般来说，国内期刊分为“普通期刊和核心期刊”，其中普通期刊级别较低，适合一般事业单位发表评职称采用，核心期刊级别较高，可作为院校等学术单位科研成果体现使用。一、普通期刊（普刊）1、省级期刊省级期刊指由各省、自治区、直辖市所属事业单位主办的期刊以及由各本、专科院校主办的学报（刊）。如《陕西教育》主办单位为：陕西省教育厅2、论文期刊等级有哪些?论文期刊等级划分：国家级期刊国家级期刊指由国家部委事业单位、全国性团体、组织、机关、学术机构主办的刊物。 如《现代商业》主办单位： 中华全国商业信息中心二、核心期刊（核心）国内目前一般承认的主要有4大核心期刊（来源）遴选体系，凡是这些来源期刊目录里有的刊物均可认为核心期刊。1、北核：北京大学图书馆“中文核心期刊”；2、南核：南京大学“中文社会科学引文索引（CSSCI）来源期刊”；3、CSCD：中国科学院文献情报中心“中国科学引文数据库（CSCD）来源期刊”；4、统计源：中国科学技术信息研究所“中国科技论文统计源期刊”（又称“中国科技核心期刊”）；值得注意的是：一般学术单位要求北核或南核，其中南核期刊目前算是国内最高级别。当然还有一些其他划分方式，比如：浙江一级、二级，四川A级、B级等。期刊发表中有任何不懂的，都可以问我哈
西工大发表论文
研究生教育综合管理系统。根据西北工业大学官网显示，西北工业大学盲审论文往研究生教育综合管理系统发送。西北工业大学坐落于陕西西安，是一所以发展航空、航天、航海等领域人才培养和科学研究为特色的多科性、研究型、开放式大学。
需要上传的。30分钟-60分钟，学生将论文上传至知网查重系统后，查重系统会在30分钟-60分钟左右检测出查重结果，并且最后会提供用户一份知网查重报告单。知网查重中不同系统的检测时间都会有所差别，如果论文总字数很多，那么知查重的时间会对应加长，全文2000+字，阅读需要2-5分钟，就要看你论文有多少字了，无论用什么网站进行论文查重都是很快的，几万字一般也就也就三四分钟而已，有时甚至一两分钟就出查重报告了。毕竟是机器计算嘛，相当快的。通常4到6月份属于我们的毕业季高峰期，也是同学们进行论文查重最多的时候，所以在这个时间段里去查重的话，那么论文查重结果出来的时间自然也就会慢一些。通常一篇一万字的本科论文在旺季时需要10-60分钟左右，如果字数很多的话可能还需要多花一点时间。如果不是查重的旺季提交检测的话那么一般5-30分钟左右就会出结果了
不是必须的。但博士毕业的条件是论文录用通知，就可以申请博士预答辩和答辩了，等论文见刊了，再来领毕业证和学位证。 博士生毕业论文见刊是基本要求，不仅仅需要见刊，刊物的级别也是有很高要求的。博士生是高学历人才了，在论文发表中，只有发表高学术价值的论文才能体现出博士生的能力水平。
西工大论文发表
研究生教育综合管理系统。根据西北工业大学官网显示，西北工业大学盲审论文往研究生教育综合管理系统发送。西北工业大学坐落于陕西西安，是一所以发展航空、航天、航海等领域人才培养和科学研究为特色的多科性、研究型、开放式大学。
需要上传的。30分钟-60分钟，学生将论文上传至知网查重系统后，查重系统会在30分钟-60分钟左右检测出查重结果，并且最后会提供用户一份知网查重报告单。知网查重中不同系统的检测时间都会有所差别，如果论文总字数很多，那么知查重的时间会对应加长，全文2000+字，阅读需要2-5分钟，就要看你论文有多少字了，无论用什么网站进行论文查重都是很快的，几万字一般也就也就三四分钟而已，有时甚至一两分钟就出查重报告了。毕竟是机器计算嘛，相当快的。通常4到6月份属于我们的毕业季高峰期，也是同学们进行论文查重最多的时候，所以在这个时间段里去查重的话，那么论文查重结果出来的时间自然也就会慢一些。通常一篇一万字的本科论文在旺季时需要10-60分钟左右，如果字数很多的话可能还需要多花一点时间。如果不是查重的旺季提交检测的话那么一般5-30分钟左右就会出结果了
不是必须的。但博士毕业的条件是论文录用通知，就可以申请博士预答辩和答辩了，等论文见刊了，再来领毕业证和学位证。 博士生毕业论文见刊是基本要求，不仅仅需要见刊，刊物的级别也是有很高要求的。博士生是高学历人才了，在论文发表中，只有发表高学术价值的论文才能体现出博士生的能力水平。
西工大发表cns论文
2014年12月29日，艾瑞深中国校友会网最新发布《2015中国大学评价研究报告》，报告中公布了中国大学2015年的排行榜。报告公布的2015中国大学排行榜中，全国共有北京大学、清华大学、中国科学院大学、复旦大学、武汉大学、中国人民大学、浙江大学、上海交通大学、南京大学、中国科学技术大学、国防科学技术大学、吉林大学、北京师范大学、南开大学、中山大学、四川大学、华中科技大学、西安交通大学、同济大学、中南大学、哈尔滨工业大学、山东大学、厦门大学、东南大学、天津大学、重庆大学、北京航空航天大学、华东师范大学、东北大学、北京理工大学、华中师范大学、大连理工大学、西北工业大学、华南理工大学、湖南大学、兰州大学等36所大学入选2015年中国研究型大学名单。 就排名看西交大第17名，中国一流大学；兰大第36名，中国高水平大学。西北工业大学也在兰大之前。 报告显示，1998-2014年全国共有68所大学以第一作者单位在《Cell》、《Nature》和《Science》杂志上发表323篇论文。其中清华大学发表CNS论文全国最多，共60篇，雄居艾瑞深中国校友会网2015中国大学CNS论文排行榜榜首，遥遥领先于其他大学，充分体现出清华大学雄厚的基础研究实力和一流学术研究水平。北京大学31篇，名列第二；复旦大学22篇，位居第三；中国科学技术大学17篇，位列第四；中国农业大学15篇，列第五；浙江大学和南京大学各11篇，并列第六，西北大学10篇，名列第八；上海交通大学7篇，位居第九；大学、云南大学、北京林业大学各6篇，并列第十。 就论文数量看西北大学是西北王，排名第8。
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CRISPR/Cas系统是细菌和古菌特有的一种天然防御系统，用于抵抗病毒或外源性质粒的侵害。当外源基因入侵时，该防御系统的 CRISPR 序列会表达与入侵基因组序列相识别的 RNA，然后 CRISPR 相关酶(Cas)在序列识别处切割外源基因组DNA，从而达到防御目的。
根据Cas蛋白的特点，可将CRISPR/Cas系统分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型。Ⅰ型和Ⅲ型系统需要借助复杂的蛋白复合体发挥作用，Ⅱ型系统仅借助 Cas9蛋白和sgRNA即可对靶目标进行编辑，结构简单，操作容易，因此目前主要使用Ⅱ型CRISPR/Cas9 系统。
CRISPR/Cas自诞生以来，迅速发展，已经成为生命科学领域最耀眼、最有前景的技术。尤其是近两年，在全世界科学家的共同努力下，CRISPR/Cas相关新进展新突破不断涌现。
一、基因编辑技术的发展史
基因编辑可以分为三代，第一代：ZFN；第二代：TELEN；第三代：CRISPR/Cas。这三个基因编辑技术都利用了DNA修复机制，所以我们先来了解一下DNA修复机制（ 图1 ）。[图片上传失败...(image-8dab49-1625385468208)]
图1-NHEJ修复（左），HDR修复（右）
NHEJ（Non-homologous end joining）
非同源性末端接合
NHEJ修复机制不需要任何模版，修复蛋白直接将双股裂断的DNA末端彼此拉近，在DNA连接酶的帮助下重新接合（ 图1 ）。
HDR（Homology directed repair）
同源重组修复
当细胞核内存在与损伤DNA同源的DNA片段时，HDR才能发生。
NHEJ的机制简单又不依靠模版，因而NHEJ的活性相对于HDR高出许多。但NHEJ修复出错的概率较高，容易造成移码突变等，基因编辑正是利用了这一点（ 图1 ）。
1.ZFN的识别切割机制
融合锌指模块和FokI切割结构域形成ZFN ；以二聚体的形式靶向切割每个锌指结构；特异识别3个碱基 ；组装多个锌指结构(识别12-18bp)形成的ZFN对可特异切割基因组靶点 （ 图2 ）。
[图片上传失败...(image-3f1d8d-1625385468209)]
图2-ZFN基因编辑原理图
2.TALEN的识别切割机制
两个TALE靶向识别靶点两侧的序列；每个TALE融合一个FokI内切酶结构域；FokI通过TALE靶向形成二聚体切割靶点；设计灵活识别特异性强（ 图3 ）。
[图片上传失败...(image-6dcfc-1625385468209)]
图3-TELEN基因编辑原理图
3.CRISPR/Cas9的识别切割机制
crRNA通过碱基配对与 tracrRNA结合形成 tracrRNA/crRNA 复合物，此复合物引导核酸酶 Cas9 蛋白在与 crRNA 配对的序列靶位点剪切双链 DNA（ 图4 ）。
[图片上传失败...(image-c85235-1625385468209)]
图4-CRISPR/Cas9基因编辑原理图
ZFN、TELEN、CRISPR/Cas9比较
[图片上传失败...(image-dd6344-1625385468209)]
图5-三种基因编辑的比较
二、CRISPR/Cas技术的介绍
CRISPR/Cas9 系统的发现
1987年，在大肠杆菌的基因组中首次发现了一个特殊的重复间隔序列——CRISPR序列，随后，在其他细菌和古菌中也发现了这一特殊序列。
2005年，发现这些CRISPR序列和噬菌体的基因序列匹配度很高，说明CRISPR 可能参与了微生物的免疫防御。
2011年，CRISPR/Cas系统的分子机制被揭示：当病毒首次入侵时，细菌会将外源基因的一段序列整合到自身的CRISPR的间隔区；病毒二次入侵时，CRISPR 转录生成 前体crRNA (pre-crRNA)， pre-crRNA 经过加工形成含有与外源基因匹配序列的crRNA，该crRNA与病毒基因组的同源序列识别后，介导 Cas 蛋白结合并切割，从而保护自身免受入侵。
2013年，发现CRISPR/Cas9系统可高效地编辑基因组。随后张锋等使用CRISPR系统成功的在人类细胞和小鼠细胞中实现了基因编辑。
从此开始，CRISPR/Cas9技术给生命科学领域带来了巨大冲击，CRISPR/Cas9相关研究成果频频登上CNS等顶级期刊，近两年更是成为诺贝尔奖热门候选。
CRISPR/Cas技术的原理
CRISPR/Cas9系统的工作原理是 crRNA（ CRISPR-derived RNA ）通过碱基配对与 tracrRNA（trans-activating RNA ）结合形成 tracrRNA/crRNA 复合物，此复合物引导核酸酶 Cas9 蛋白在与 crRNA 配对的序列靶位点剪切双链 DNA。而通过人工设计 crRNA 和 tracrRNA 这两种 RNA，改造成具有引导作用的sgRNA （single guide RNA ），从而引导 Cas9 对 DNA 的定点切割（图4）。
CRISPR/Cas技术的优势
设计简单，简明的碱基互补设计原则，识别不受基因组甲基化影响，能靶向几乎任意细胞任意序列，方便同时靶向多个靶点，切割效率高。
三、CRISPR/Cas的脱靶效应
PAM**** (Protospacer adjacent motif )
前间区序列邻近基序
PAM序列区是CRISPR/Cas9系统行使切割功能的基本条件。如果靶序列 3′端没有PAM序列，即使靶序列与sgRNA序列完全匹配，Cas9蛋白也不会切割该序列位点。 PAM序列主要影响CRISPR/Cas9的DNA切割效率。在细胞水平上，NGG介导的切割效率是最高的。
sgR****NA ****(Single guide RNA )
向导 RNA
sgRNA与目标基因组相结合的 20nt 序列区决定着 CRISPR/Cas 系统的靶向特异性。CRISPR/Cas9与靶位点识别的特异性其实主要依赖于sgRNA与靠近PAM区的10~12 bp的碱基配对，而其余远离PAM序列 8~10 bp 碱基的错配对靶位点识别的影响并不明显。目前研究结果均提示，可能靠近 PAM 的 8~14 bp 序列是决定特异性的关键，其他序列也均在不同程度上影响脱靶效应。
CRISPR/Cas9的脱靶效应给研究带来了一定程度上的不确定性，也是限制其发挥更大潜力的主要原因之一。
2017年5月30日， Nature 杂志子刊 Nature Methods 刊登了美国哥伦比亚大学研究人员的一篇文章，研究人员通过CRISPR/Cas9成功修复了导致小鼠失明的基因后，对小鼠进行全基因测序，发现修复后的小鼠基因组有超过1500个单核苷酸突变，以及超过100个位点发生大片段插入或缺失（ 图6 ）。文章的结论无疑引发了巨大震动，也给正在进行中的CRISPR/Cas9带来了不确定性。
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图6--动物体内实验中CRISPR/Cas9编辑后发生意想不到的突变
仔细分析后，发现该文章并不十分严谨，文章仅有两只小鼠作为实验组，一只作为对照组，数量不足以证明结论是否只是个例。而且单碱基突变是生物体内自然现象，不能全归于CRISPR/Cas9。整个实验只基于一个sgRNA数据，且该sgRNA特异性评分很低，造成脱靶效应也应该在预料之中（ 图7 ）。
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图7--针对 Nature Methods 文章的回应
经过一系列的研究和改进，目前CRISPR系统的脱靶性已经很低，当然，要想达到理想的状态，还有很长的路要走。
四、CRISPR/Cas技术的进展
2016年6月，张锋在 Science 发表文章，发现CRISPR/Cas13a能有切割细菌的特定RNA序列。
2016年9月，Jennifer Doudna在 Nature 发表文章，证实CRISPR/Cas13a可以用于RNA检测。
2017年2月22日，美国纪念斯隆.凯特林癌症中心（MSK）研究人员在 Nature 杂志发文，使用腺相关病毒（AAV）介导，将CRISPR/Cas9基因编辑技术应用于CAR-T疗法。该研究既解决了传统CAR-T疗法的随机整合可能存在的潜在危害，又大大降低了CAR-T细胞发生分化或癌化的风险，赋予了CAR-T技术全新的高效性、稳定性、安全性。
2017年8月2日，Shoukhrat Mitalipov在 Nature 发表长文，使用CRISPR/Cas9技术修正了植入子宫前的人类胚胎中一种和遗传性心脏病有关的变异。该研究证实了通过编辑人类胚胎进行治疗遗传病是安全可行的。值得一提的是，该成果受到了基因编辑领域大牛George Church等人的质疑。
2017年8月11日，杨璐菡等在 Science 发表文章，通过CRISPR/Cas9技术敲除猪基因组中的内源逆转录病毒（PERV）序列，并克隆出多只PERV失活小猪。向最终实现使用猪器官进行人体器官移植的终极目标迈进了一大步。
2017年9月，杂交水稻之父”袁隆平院士宣布使用CRISPR/Cas9技术敲除与镉吸收和积累相关基因的水稻育种成功。该研究从根本上解决了水稻镉污染的问题，将扭转我国部分农作物重金属超标的问题，进而改善部分人群重金属慢性中毒的问题。
2017年10月4日，张锋在 Nature 发表论文证实CRISPR/Cas13a能够在哺乳动物细胞中编辑特定的RNA。CRISPR/Cas13a能够达到RNAi相似的降低基因表达的效率，而且有更强的特异性，且对细胞内天然的转录后调控网络的影响更小。
2017年10月19日，Jennifer Doudna在 Nature 发表文章，设计了高精确性的Cas9变体—HypaCas9。该研究极大地降低了Cas9的脱靶效应，且不降低靶向切割效率。
2017年10月25日，张锋在 Science 发表文章介绍CRISPR新系统--REPAIR，可以高效的进行RNA的单碱基修复。因为不改变DNA序列，所以为通过基因编辑治疗遗传病而又不永久影响基因组提供了新可能。
2017年10月25日，哈佛大学Broad研究所的David Liu实验室在 Nature 发表长文，报道了新型腺嘌呤基因编辑器——ecTadA-dCas9，可以将A·T碱基对转换成G·C碱基对，该技术首次实现了不依赖DNA断裂即可进行基因编辑的技术，即单碱基基因编辑技术。该技术高于其它基因组编辑方法的效率，且几乎没有随机插入、删除或其它突变等不良副作用，因此为今后大范围治疗点突变遗传疾病提供了极大的便利。
五****、展望
近几年CRISPR/Cas基因编辑技术飞速发展，推广应用到了生物、医学、农业以及环境等多个领域，造就了一批批科研奇迹，尤其是在遗传病的治疗、疾病相关基因的筛查与检测、肿瘤治疗以及动植物的改造、病原微生物防治等领域有着巨大的潜力，也将深远地影响整个世界。
特别感谢：BioArt主编给予的帮助和意见以及吉满生物吴晨提供图1-图5的图片。
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