果胶低聚糖(POS)，又称低聚半乳糖醛酸，由2～20 个半乳糖醛酸通过α-1,4-糖苷键连接而成，是一类新型的益生元[1]，研究表明其具有抗菌[2]、促双歧杆菌生长[3-4]以及抗肿瘤[5]、抗氧化[6]、提高机体的免疫调节能力等[7]生理活性，具有较大的研究价值和应用前景.目前，POS可以通过酸水解[8]和热液处理等化学法得到，也可以通过特定原料的解聚或酶水解果胶纯品[9-11]制备得到.聚半乳糖醛酸酶(PG)是常用的果胶酶[12-13]，可作用于两个非酯化半乳糖醛酸间的糖苷键，从而使果胶达到降解的效果.

果胶低聚糖自发现以来，国外研究者着重于其对植物的生理活性研究，作为植物抗病防病的诱导剂，但对其抑菌活性关注甚少.虽然目前利用果胶酶水解获得的果胶低聚糖的抑菌活性研究为数不多，但现有研究成果表明果胶分解物对常见的食品污染细菌有明显的抑制作用[14].因此，相比化学防腐剂的毒性，果胶低聚糖无疑是一种极具开发价值的新型天然食品防腐剂.此外，我国的果胶资源丰富[15]，柑橘皮渣、苹果皮渣、向日葵盘和甜菜渣等含有大量的天然果胶，均可以用于制备价格低廉、功效独特的果胶低聚糖产品.

1 材料与方法

1.1 菌 种

食品常见细菌：大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus eureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subltillus).以上菌种均由浙江工业大学微生物实验室提供.

1.2 实验材料

聚半乳糖醛酸酶(PG)购于广州利华有限公司；普通果胶(DE 65.8%)由衢州果胶有限公司提供；乳酸链球菌素(QB2394-98)购于浙江银象生物工程有限公司；山梨酸钾、苯甲酸钠均为市场食品防腐剂，购于上海阿拉丁生化科技有限公司；D-半乳糖醛酸、七聚半乳糖醛酸(纯度均为98%)和低聚木糖(食品级市售低聚糖，聚合度2～9)购于上海百灵威化工有限公司；麦芽糖、半乳糖和D-木糖和鼠李糖等药品购于中国医药上海化学试剂有限公司，纯度均为95%.

武汉理工大学是首批列入国家“211工程”重点建设的教育部直属全国重点大学、首批列入国家“双一流计划”建设的高校，是教育部和交通运输部、国家国防科技工业局共建高校。学校位于武汉市，现有马房山校区、余家头校区和南湖校区，共有教职工5508人。

错在背离了全社会坚决打假的主流共识。对于假冒伪劣这块“牛皮癣”，有关部门每年都开展监管专项行动；一些电商企业专门成立打假部门，坚决阻击假货；消费者维权意识日益增强，踊跃检举、揭发、投诉制假售假者蔚然成风。可以说，在打假方面，全社会已形成越来越广泛的共识。但有的电商平台与经营商家搬出各种借口来“申辩”，毫无说服力。

1.3 培养基

细菌培养基(牛肉膏蛋白胨培养基)：牛肉膏3 g/L，蛋白胨10 g/L，氯化钠5 g/L，琼脂15～20 g/L，pH 7.0～7.2.

2.5 TCI开始至达到ECe、气管插管、血压下降时间 结果(表3)表明：各组TCI开始至达到ECe、气管插管、血压下降的时间差异均无统计学意义。

真菌培养基(马玲薯培养基，PDA)：马玲薯200 g/L，蔗糖20 g/L，琼脂15～20 g/L，pH自然.

1.4 酶活力的测定

聚半乳糖醛酸酶(PG)活力的测定：3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法测定还原糖[16].酶活单位(U)：每分钟产生1 μg半乳糖醛酸所需的酶量为1 个单位聚半乳糖醛酸酶(PG)酶活.

1.5 饱和果胶低聚糖的制备

取2 g酯化度为65.8%的果胶溶于100 mL的pH为4.2的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液，加入0.4 g果胶PG酶(178.03 U/mL)，45 ℃下酶解4 h.每隔0.5 h取一次样，离心处理，保存备用.

纯化处理：果胶低聚糖初样中接入2%活化好的酵母，于30 ℃发酵12～48 h，得到除去单糖的果胶低聚糖酵母发酵液.离心除去酵母菌体后的上清液用孔径为5 000 Da滤膜超滤，获得果胶低聚糖超滤液.

1.6 果胶低聚糖水解度、聚合度和分子量的测定

1.6.1 果胶低聚糖的水解度测定

利用DNS测糖法[16]测定果胶水解度.

1.6.2 高效液相色谱法测定低聚糖聚合度

解决企业内部管控人才的问题，首先要增强企业内部管控人才的质量。加强对相关管控工作人员的上岗培训工作，增加对企业内部核心控制的成本投入，最大程度地满足企业正常运行的需求。企业以及集团方面要进一步加强对控制体系管理建设的重视，现阶段，仍有大部分人认为只有传统意义上的“管控工作”才是“好工作”，这种对于工作选择的偏见导致企业内部管控人才匮乏，得不到群众的普遍认可，工作就难以进一步发展。社会宣传的不到位、相关部门的不重视、工作人员的忽视等，这些因素从多个角度不同程度地影响着企业内部管控体系建设工作的人才队伍，不利于我国相关行业的长足进步，也不利于相关产业链的持续发展。

色谱条件：Waters 1525泵、Waters 2414示差检测器和Waters 2487紫外检测器.Adsorbsphere NH2色谱柱，进样量10 μL，流动相：V(乙腈)∶V(水)=85∶15，流动相流速1.0 mL/min，柱温40 ℃，检测波长245 nm.

对照品：1%的鼠李糖溶液，0.5%的半乳糖溶液(纯度98%)，0.5%的D-木糖，0.5%的半乳糖醛酸溶液，0.5%的麦芽糖溶液，0.1%的七聚半乳糖醛酸溶液(纯度98%)，0.5%的聚合度为2～9的木糖低聚糖溶液.鼠李糖的保留时间为5.415 min，半乳糖保留时间8.082 min，D-木糖保留时间为6.465 min.半乳糖醛酸保留时间为9.382 min.麦芽糖的保留时间为15.698 min.七聚半乳糖醛酸的保留时间为24.132 min.

1.7 果胶低聚糖与食品防腐剂的抑菌活性比较

[3] SUZUKI Y, TANAKA K, AMANO T, et al. Utilization by intestinal bacteria and digestibility of arabino-oligosaccharides in vitro[J].Journal of the Japanese society for horticultural science, 2004, 73(6), 574-579.

最低抑菌浓度(MIC)[18]：将待测抑菌试剂进行倍数稀释，各取1.0 mL加入到含2.0 mL培养基的无菌试管中，接入1.0 mL菌悬液，充分振荡均匀，使各管中含菌量约为107～108 cfu/mL，培养1～2 d.培养完成后观察试管内溶液是否清亮，分别取500 μL涂布于平板培养基上，培养1～2 d，观察有无菌落生长.以无菌生长的试剂最低浓度为MIC.另设含等体积不添加试剂的缓冲液作阴性对照，以及添加无菌水和药物的培养基为空白对照，每种处理设3 个平行.

鲁西集团作为一个拥有40年化肥生产历史的国有企业，他们敢于担当，勇于创新。投巨资先后上马了10万吨尿素硝酸铵溶液、10万吨液体肥、10万吨硝酸铵钙、六大类菌剂产品。

2.4.1 抑菌圈的比较

2 结果与讨论

2.1 不同酶解时间制备的果胶低聚糖对抑菌活性的影响

聚半乳糖醛酸酶降解果胶的过程中，先降解成多聚寡糖，再解聚为低聚寡糖和单糖.因此，水解液中还原糖含量的高低可以表征果胶的水解度.由图1可知：当水解时间达到180 min时，果胶水解液的吸光值达到最大，之后随时间的延长，基本维持不变，表明果胶在180 min已基本水解完成.

2.4.2 最低抑菌浓度(MIC)比较

不同水解时间获得的果胶低聚糖的抑菌活性不同.将间隔30 min获得的果胶低聚糖超滤离心后，高压灭菌10 min，利用杯碟法检测果胶低聚糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的抑菌效果.图2表明：只有水解到一定程度的果胶低聚糖才能表现出很好的抑菌活性，且不同菌种对不同聚合度低聚糖的敏感程度不同.当水解时间大于90 min，果胶低聚糖对金黄色葡萄球菌显示很好的抑菌活性，其抑菌圈直径大于2 cm.而对于芽孢杆菌，当水解时间大于180 min，其抑菌活性明显上升，表明只有聚合度低的糖类物质才对其有较强的抑菌作用.相对于上述两种菌，大肠杆菌对果胶低聚糖的敏感度较低，随水解时间的延长，抑菌直径无显著增大.

图1 不同酶解时间制备的果胶低聚糖 Fig.1 The absorbency of pectic oligosaccharides along with different enzymatic hydrolysis time

图2 不同酶解时间制备的果胶低聚糖对抑菌活性的影响 Fig.2 The effect on bacteriostatic activity of the pectic oligosaccharides along with different enzymatic hydrolysis time

2.2 不同初始pH下酶解制备的果胶低聚糖对抑菌活性的影响

试验所用钼精矿100 g，温度200 ℃，氧气分压1.20 MPa，固液比1∶10，保温保压时间为300 min，考察不同搅拌速度对制备样品元素含量及钼赋存状态的影响。

图3 不同初始pH下酶解制备的果胶低聚糖对抑菌活性的影响 Fig.3 The effect on bacteriostatic activity of pectic oligosaccharides along with different original pH value of enzymatic hydrolysis

2.3 饱和果胶低聚糖的检测分析

利用聚半乳糖醛酸酶可以获得一系列聚合度的果胶低聚糖：已知在相同液相条件下七聚糖的保留时间为24.132 min，对照图4中各峰的保留时间可知果胶低聚糖液中已含有一定量的聚合度小于7的低聚糖，而聚合度7以上的果胶低聚糖占80%以上.

图4 果胶低聚糖液的高效液相色谱分析 Fig.4 HPLC analysis of pectic oligosaccharides

2.4 果胶低聚糖与食品防腐剂的抑菌活性比较

防腐实验：供试桔子若干，用榨汁机鲜榨果汁，适当稀释处理.取若干试管，每管注入10 mL桔子汁，经巴氏灭菌后，注入一定浓度的防腐试剂1 mL，取两支试管，将未经防腐药物处理的供试样品直接装入试管中，分别注入1 mL pH为4.2的缓冲液作为对照.37 ℃下培养，观察防腐效果.

[6] TUOPING L I, SUHONG L I, LIJUAN D U, et al. Effects of haw pectic oligosaccharide on lipid metabolism and oxidative stress in experimental hyperlipidemia mice induced by high-fat diet[J].Food chemistry, 2010, 121(4):1010-1013.

表1 果胶低聚糖与食品防腐剂的抑菌活性比较

Table 1 The comparison of antibacterial activity between pectin oligosaccharides and food preservatives

防腐试剂质量浓度/(g·L-1)抑菌圈直径D/cm大肠杆菌金黄色葡萄球菌枯草芽孢杆菌果胶低聚糖0．841．461．431．251．681．631．801．652．522．102．211．92苯甲酸钠0．101．601．351．500．251．751．701．750．502．082．152．10山梨酸钾0．101．320．911．430．251．671．511．600．502．201．721．91乳酸链球菌素0．101．100．881．150．251．221．271．250．501．502．101．54

文明起源于水。人类文明的第一缕曙光，几乎都是被水浸亮的。于是，无论我们走到哪里，生命中都磨灭不了关于一条河，或一条江的印记。淘洗我灵与骨的那条滔滔大河叫——饮马河。

由表2可知：果胶低聚糖的最低抑菌浓度范围为0.11～0.21 g/L，不同菌种对浓度的敏感度有高低，结果表明果胶低聚糖对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为0.12，0.16，0.18 g/L.

测得市售食品防腐剂的最低抑菌浓度，并与果胶低聚糖比较，结果如表2所示.虽然化学防腐剂中苯甲酸钠和山梨酸钾的抑菌效果相对较好，但其高毒性严重影响其在食品行业的应用.比较果胶低聚糖与生物防腐剂乳酸链球菌素(Nisin)发现，果胶低聚糖对三种菌株的最低抑菌浓度基本都低于Nisin.此外，观察抑菌圈直径发现Nisin对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌性能相对较低，而果胶低聚糖则有较好的抑制作用.因此，果胶低聚糖是食品行业中潜在的新兴的天然食品防腐剂，市场应用前景广阔.

表2 食品防腐剂最低抑菌浓度(pH 4.2)

Table 2 MIC of food antiseptic towards three test microbes

防腐试剂最低抑菌浓度/(g·L-1)大肠杆菌金黄色葡萄球菌枯草芽孢杆菌果胶低聚糖0．160．120．18苯甲酸钠0．010．010．01山梨酸钾0．050．030．05乳酸链球菌素1．500．850．50

2.4.3 对桔汁的防腐效果比较

选用不同质量浓度的果胶低聚糖和市售食品防腐剂对鲜榨桔子汁进行防腐实验.每隔24 h观察一次，共观察5 d.肉眼观察桔子汁的清亮度，结果如表3所示.果胶低聚糖对桔子汁的防腐效果良好，颜色基本清亮.加入低质量浓度的果胶低聚糖的2 个桔子汁样品直到第5天，才稍显混浊；化学防腐剂苯甲酸钠和山梨酸钾在质量浓度为2 g/L时才能维持抑菌功效；而乳酸链球菌素由于抗菌谱较窄的缺点，对桔子汁的防腐效果相对较差.结果证明：果胶低聚糖可以有效地抑制食品中污染细菌的生长，具有良好的食品防腐效果.

表3 桔子汁的清亮度变化1)

Table 3 Change of the orange juice brightness

防腐试剂质量浓度/(g·L-1)不同时间桔子汁清亮度24h48h72h96h120h果胶低聚糖0．21----+-0．84----+-1．68-----苯甲酸钠0．02--++++++0．20---+-+2．00-----山梨酸钾0．02--++++++0．20---+-++2．00----+-乳酸链球菌素0．05-+-+++++++++0．50--++++++1．00--++++++5．00----+对照(pH4．2缓冲液)+-+++++++++++

注：1) “-”表示清亮透明；“+-”表示略微混浊；“+”表示混浊，且“+”越多，表示杂菌越多，试样越混浊.

3 结 论

45 ℃下水解果胶(质量浓度20 g/L)，PG加酶量为4 g/L (178.03 U/mL)，pH 4.2，水解180 min左右能够获得较好抑菌效果的饱和果胶低聚糖，高效液相分析其聚合度大于7.制备的果胶低聚糖对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌具有良好的抑制活性.根据对桔子汁澄清度的观察，发现果胶低聚糖的防腐效果比市售防腐剂显著.因此，果胶低聚糖能够作为新型防腐剂应用于食品行业，市场前景广阔.

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紫红百香果，产自广西壮族自治区玉林市；香精调配所用香原料，如己酸乙酯、丁酸乙酯、乙酸乙酯、3-羟基己酸乙酯、硫代薄荷酮、乙基麦芽酚、橙油、玫瑰花精油等均为食品级，购自奇华顿香精香料有限公司。

采用杯碟法[17]测定果胶低聚糖与食品防腐剂对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑菌直径.

[4] 丁长河,鲁慧芳,张建华,等.双歧因子果胶低聚糖的研究进展[J].现代食品科技,2005,21(4):80-82.

比如说，在《社戏》的教学后，由于这篇课文本身就充满着较强的生活气息，其主要表达的是作者对童年的美好回忆，其中充满着童真童趣也能够带动起学生们对刚刚逝去童年的回忆。这就为学生抒发自身情感打下了基础。教师再留下作文练习，学生就会“笔下生花”。再比如说《本命年的回想》，是一篇有关作者小时候过年的情景。教师可以借此向学生讲解将生活融入写作中的关键点，同时也可以有效的让学生以生活的角度去寻找写作的素材，继而丰富其创作灵感。

[5] JACKSON C L, DREADEN T M, THEOBALD L K, et al. Pectin induces apoptosis in human prostate cancer cells:correlation of apoptotic function with pectin structure[J].Glycobiology, 2007, 17(8):805-819.

由表1可知：同一质量浓度的果胶低聚糖对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最佳，其次为大肠杆菌和枯草芽孢杆菌.当果胶低聚糖质量浓度为0.84 g/L时，其对金黄色葡萄球菌的抑制效果比苯甲酸钠、山梨酸钾和乳酸链球菌素好；当果胶低聚糖质量浓度为1.68 g/L时，其对三种菌的抑菌作用可以与各个食品防腐剂媲美；而当果胶低聚糖质量浓度为2.52 g/L时，其抑菌效果已经超过了几种食品防腐剂.果胶低聚糖作为一种天然的具有生物活性的低聚糖有着其他食品防腐剂不可比拟的优势，因此有望成为一种新型的防腐添加剂应用于食品和化妆品行业.

基于RFID的物联网技术系统大致可分为“感知”、“网络”、“应用”3部分。其中，“感知”部分主要是由各类传感器及相关的传感器网关构成，如湿度传感器、温度传感器、摄像头、RFID标签与读写器等终端。在物联网系统中，“感知”部分就像人的眼睛、耳朵、鼻子、皮肤等，发挥识别物体与采集信息来源的作用；“网络”部分则是由各种有线或无线通信网路、互联网、私有网络、云平台等组成，该部分如同人的大脑与神经中枢，传递与处理由感知系统收集的信息；“应用”部分指的是物联网与用户的应用接口，通过与行业需求结合起来，实现物联网的智能化应用[2]。

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选取敏感度高的金黄色葡萄球菌为参考菌，分别比较pH 3.0，4.2，5.4，6.8条件下酶解制备的果胶低聚糖的抑菌效果，结果如图3所示.由图3可知：在pH 4.2条件下，聚半乳糖醛酸酶水解果胶低聚糖效果最佳，此时不仅水解物中还原糖半乳糖醛酸末端含量最高，水解率达到最大，而且该水解条件下制得的饱和低聚糖的抑菌活性最高.

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（3）多人信任。多人信任是指大部分认定的即为正确。这种信任借用了在生活中的信任，例如：只需要一定数目的商家支持比特币支付，那么比特币就可以流通。在PoW共识中，多算力认定的数据即为正确。多人信任不仅局限于人，同时也可能为算力、权益等。目前存在的“一中央处理器（CPU）一票”思想也是基于此种信任，选举类共识机制是基于此种信任的典型代表。

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人文关怀与心理疏导的实施让患者主动配合医护人员的工作，其可以全心全意的为患者治疗，提高了护理质量。医院对护理人员进行人文关怀与心理疏导，提高护理人员自身的道德素养、人文修养，一定程度上减少医院暴力事件的发生，维持医院的正常医疗秩序，保护医护人员的生命财产安全，加强医院的人文素养的培养，更好的推动了整体护理。

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发展中国太赫兹高速通信技术与应用的思考………………………………………陈智，张雅鑫，李少谦 24-3-43

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