红细胞血型在临床输血医学、器官移植和法医鉴定等领域中具有重要意义。目前国际输血协会（The International Society of Blood Transfusion，ISBT）已确认了36个红细胞血型系统、300多个血型抗原[1]。临床输血医学领域中最重要的为ABO、Rh、Diego、Duffy、Hh、Kidd和MN等血型系统。目前临床输血只进行ABO血型和RhD血型的同型输注，反复输血的临床患者容易产生ABO和RhD以外的同种抗体，造成配血不合。有些抗体单纯采用谱细胞很难鉴定，需要采用多种方法相结合，鉴定才更准确和更可靠。

材料与方法

1 材料

芜湖卤干子，实乃一绝，咬一口，汁液淋漓，泡泡软软，吸饱了汤汁，筷子夹起颤巍巍的——世间怎么会有如此可口的食物？普通的一块块白干子，改成花刀，入油锅炸至金黄，捞起，放入调好的汤汁中焖煮，越煮越入味。要一碗牛肉面，两块卤干，一顿早餐，铁饱。铁饱这个词，属芜湖方言，大约是胃饱胀得太坚硬了，再也不能吃别的了。夜深，当我们经过新芜路，忽然想起“老凌鸽子汤”，也不知，可还在了。

1.1 病例简介：患者，女，83岁，贫血，多次输血，输注红细胞悬液8U和输注机采血小板总计40 U。

1.2 试剂：DNA提取试剂盒（北京天为时代）；Kidd血型基因分型引物合成（TaKaRa公司）；GoTaq®Green Master Mix（Promega公司）；抗-A、抗-B血型定型试剂，抗-A1、抗-A+B、抗-H血型定型试剂、抗球蛋白和人ABO血型反定型红细胞（上海市血液中心生物医药有限责任公司）；凝聚胺试剂（珠海贝索生物技术有限公司）；卡式配血试剂（BIORAD）。

3 交叉配血试验 与10例O型RhD阳性献血者血液进行主、次测交叉配合实验，10例在盐水介质中主次侧均相合，9例在凝聚胺、抗人球蛋白和凝胶卡主侧配血不相合，1例在凝聚胺、抗人球蛋白和凝胶卡主、次侧配血无溶血、无凝集，配血相合。

2.2 DNA提取及浓度和纯度检测：采用北京天为时代试剂盒提取，严格按照说明书操作，应用SMA4000微量分光光度计进行浓度和纯度测定

1 血清学检测结果 该患者ABO血型为O型，RhD阳性，直接抗球蛋白实验阴性，抗体筛选阳性。

2 方法

2.3 K i d d血型基因分型：引物参照文献[3]。扩增片段3 0 1 b p，特异扩增人生长激素基因429 bp的引物作为内对照，HGH-s：5'-GCCTT C C C A A C C A T T C C C T T A-3'，H G H-a：5'-TCACGGATTTCTGTTGTGTTT -3'。PCR反应总体积10 μl，包括GoTaq® Green Master Mix 5 μl，特异性引物终浓度0.5 μmol/L和样本DNA50 ng。PCR扩增反应程序：95℃预变性5 min；95℃变性30 s，60℃退火60 s，72℃延伸30 s，35个循环；72℃延伸10 min。产物通过2.5%琼脂糖凝胺电泳，以150 V电泳15 min，凝胶紫外成像。

蜂窝汽封与其他各种形式的“硬齿”汽封相比，它的汽封齿最薄，硬度也最低，因此碰磨时不会象其他“硬齿”汽封一样在转子表面留下显著的磨痕。同时，蜂窝汽封与其他“硬齿”汽封不同，在与转子碰磨时象不会产生“刀片”切割现象，这是它不会磨伤转子的主要原因。梳齿类汽封的每一根汽封齿，在与转子碰磨时犹如车刀，很容易在转轴或覆环表面割出沟槽。此外，蜂窝汽封由于它曲折的网状结构使其表面面积大大增加，又极大地提高了它的耐磨性，因此蜂窝汽封既耐磨又不易磨伤转子是它突出的一个特点。

经世教育SMAR睿智职业规划体系自2016年实践至今，收到较好的成效，同时也出现了问题，校企合作是目前很多高校和企业期望采取的一种合作模式，因为这种模式能够帮助企业和高校初步解决各自的相关问题，如能帮助企业解决企业用工荒、培育人才或定向培养的需求，提前在大学生中找到适合自己企业的人才，能帮助高校解决人才就业率提高、提升高校的整体转型质量，解决生源质量等相关问题。

结 果

2.1 血清学试验：ABO血型鉴定、红细胞血型抗体鉴定及交叉配血按照全国临床检验操作规程[2]进行。

2 红细胞血型抗体鉴定 患者血清与1～10号谱细胞反应，盐水介质中无凝集，抗人球蛋白介质中1、4、5、6、7、8、9和10号凝集，2和3号不凝集。自身细胞不凝集。根据红细胞抗体鉴定原则，可能含有抗-Jkb抗体。在抗球蛋白介质中，患者血清与含有Jk（b+）抗原的红细胞反应，与缺乏Jk（b+）抗原的红细胞不反应。结果见表1。采用间接抗人球蛋白方法检测该抗体效价为4。

南通作为江苏省唯一的江海门户，位于“一带一路”、“长江经济带”、“江苏沿海开发”多重战略叠加区。这给南通带来巨大的发展机遇和潜力。为此，南通市政府亦集思广益，提出了很多有实际意义的发展方案。这同样将给南通物流业，尤其是集装箱运输带来巨大的压力。目前国内外对集装箱多式联运研究很多，大多数集中对某个方面和环节进行研究，缺乏统一的规划。论文从系统论角度对南通发展集装箱多式联运的构成要素节点、集疏运条件、经济腹地三个角度进行调查，探讨集装箱多式联运发展对策。

1.3 仪器：SMA4000微量分光光度计（Merinton）、PE-9700扩增仪（美国ABI公司），DYY-6B型稳压电泳仪（北京六一仪器厂），UVPGDS-8000凝胶成像系统（美国UVP公司）和KUBOTA细胞洗涤离心机（日本）。

民生银行成立后，“民生”成为了泛海系的一个大IP，泛海系正式踏上金融之旅。2002年，泛海收购了河南省内的证券公司黄河证券，更名为民生证券，2014年民生证券注入泛海控股上市公司主体内。

 

表1 患者血清与10个O型谱细胞反应结果

  

序号Rh-hrKiddMNSsDuffyDiegoKellLewisP试验结果DCEceJkaJkbMNSsMur FyaFybDiaDibKkLeaLebP1盐水AHG 1++00+0+++++/+0//0/0+003+2+0++0+00+0+0+00+0+0++00 3++++++00+0+0+++/0/+/+00 4+++++0++00+/+0//0/+++03+5+0+++0+++0+0+00+0+0++03+6+00++0+0+0+0+00+0+0+003+7000++++++0+++00+0++0+02+8+++0+0+++0+/+0//0/0+003+9000++++0+0+0+00+0+0002+10+0++0+++00+/+0//0/0+002+自身00

4 Kidd血型检测 该患者血清中怀疑含有抗-Jkb抗体，需要检测其是否含有Jkb抗原。由于Kidd血型的抗血清较昂贵，平常实验室不常使用，而血清长时间不用效价会降低。采用基因分型技术检测该患者和配血相合献血者的Kidd血型。结果见图1。该患者和配血相合献血者Kidd血型都是Jk（a+b-）型。

  

图1 患者Kidd血型的基因分型

 

注：M：1 000bp分子量标准，1～2为Jk（a+b+）型对照，3～4为Jk（a+b-）型对照，5～6为Jk（a-b+）型对照，7～8为患者Jk（a+b-）型

讨 论

临床输血实践中红细胞血型检测常规使用的血型血清学定型技术，一般是先采用单克隆或多克隆抗体与红细胞凝集试验测定，疑难者再附加吸收放散试验、唾液定型等项目。经典的红细胞血清学血型鉴定技术，无法对红细胞血型进行准确定型，而基因分型技术解决了常规技术无法解决的疑难血型鉴定等问题。从基因水平进行分型，克服了血清学方法易受抗原活性竞争、抗体的特异性及微生物污染等因素影响的缺点，使分型结果更加准确可靠，个体识别能力进一步提高[4]。

有些红细胞抗原检测抗血清昂贵、稀少且不易保存，基因分型是非常必要的。本文采用基因分型技术鉴定患者Kidd血型，进一步确定该患者含有的抗体类型，找出相合献血者输血给这些患者。有时没有合适抗血清可供研究时，就需要对疑似抗体的患者也做基因分型。采用分子生物学实验方法检测基因型准确、成本低，且不易受标本保存期限的影响。

Kidd系统抗体通常为IgG性质，在抗球蛋白介质中反应最佳。有明显的剂量效应[5]。用于筛查患者血清中抗体的谱细胞应选用Jk（a+b-）或Jk（a-b+）细胞，避免剂量效应。Kidd抗体很难被检测到，在检测较弱的抗体时必要时要用酶处理的细胞。通常用抗球蛋白试验来检测Kidd抗体，同时Kidd抗体与大多数血型抗体不同，在人体产生后消失极快，数周或数月后便很难检出，有时还有补体存在。所以要重视检测弱Kidd抗体的重要性[6]。输血前要认真查看患者抗体检查记录、输血史、妊娠史等，避免误输相应抗原阳性细胞而发生溶血性输血反应。

参 考 文 献

1 Patnaik S K，Helmberg W，Blumenfeld O O. NCBI dbRBC database of allelic variations of genes encoding antigens of blood group systems[J]. Nucleic Acids Res，2012，40（1）：1023-1029.

2 叶应妩，王毓三，申子瑜，主编.全国临床检验操作规程[M]. 南京：东南大学出版社，2006：257-264.

3 傅启华，何吉，洪小珍，等.浙江汉族Kidd血型基因分型[J].中国输血杂志，2001，14（4）：240-241.

4 郑小凡，译. 红细胞多态性的基因分型[J]. 国际输血及血液学杂志，2010，33（5）：473-478.

5 李继明，郭一鸣，李蓓，等.抗-Jkb引起新生儿溶血病1例[J].中国输血杂志，2003，16（2）：120-121.

6 李世祥，章旭，李剑平. 抗-Jkb引起交叉配血不合1例[J].中国输血杂志，2014，27（2）：199-200.