免疫分子检测论文

一、基因疫苗的诞生自1796年英国医生琴娜(Jener)首次采用牛痘苗以来,疫苗已在世界范围内被广泛应用,200多年来各种疫苗已经帮助人类战胜了包括天花在内的多种传染病.然而,现有的疫苗主要有两种：第一种疫苗是传统疫苗，即弱毒活苗和灭活苗，如鸡新城疫弱毒苗，猪瘟灭活苗，它是直接将无毒或减毒的病原体作为疫苗接种到人或动物体内，刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答，从而预防疾病的发生；第二种疫苗是基因工程苗，它是通过基因工程，先分离得到具有强烈免疫原性但无毒性的抗原蛋白的编码基因，然后导入表达载体中，再在宿主细胞表达出重组抗原蛋白，经分离纯化后的重组抗原蛋白作为疫苗接种如重组乙肝疫苗。但它存在一些不可忽视的缺陷如:灭活疫苗难以诱发细胞免疫,需多次免疫注射;亚单位疫苗免疫原性差;减毒活疫茵存在毒性回升的危险等问题.因此,现在对一些传染病仍缺乏相应的安全有效的疫苗. 第三代疫苗基因疫苗的问世,为解决这些难题带来了希望.基因疫苗（genetic vaccine）又称核酸疫苗(nucleic acid vaccine)或DNA疫苗，是在基因治疗（genetic therapy）技术的基础上发展而来的。基因治疗是从20世纪80年代发展起来用于预防和治疗疾病的最具革命性的生物医学医疗技术，其原理是将人或动物的正常基因或有治疗作用的基因通过一定方式导入人体靶细胞以纠正基因的缺陷或发挥治疗作用，从而达到治疗疾病目的。1990年Wolff JA等在进行基因治疗试验时，以裸DNA注射作对照，结果意外发现裸DNA可被骨骼肌细胞吸收并表达出外源性蛋白。1992年Tang 、 DC等首次证明经基因免疫产生的外源性蛋白质——人生长激素可刺激小鼠免疫系统产生特异性抗体，而且加强免疫后抗体效价增加，从而宣告基因疫苗的诞生。（注：1）概括起来，基因疫苗就是指将编码外源性抗原的基因插入到含真核表达系统的载体上，然后直接导入人或动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，该抗原蛋白可直接诱导机体产生免疫应答。抗原基因在一定时限内的持续表达，不断刺激机体免疫系统产生应答反应，从而达到预防疾病的目的。二、核酸免疫的作用机理目前对核酸免疫作用机理的认识主要还仅限于理论推测，且多数资料来自基因治疗试验，二者在作用机理上很相似。在基因免疫中，含病原体抗原基因的核酸疫苗被导入宿主细胞，被周围的组织细胞、APC细胞或其它炎性细胞摄取，并在细胞内表达。表达产物作为抗原可能的呈递途径是：肌细胞直接摄入或经T小管和细胞样内陷摄取进入，在外源基因启动子作用下使外源基因表达，使产物在胞内水解酶的作用下分解成长短不一的多肽，其中的一部分被hsp70运到内质网，经网膜上的TAP分子转入膜内与主要组织相容性复合物（MHC）I类结合，最终在细胞膜表面被CDS十细胞识别；另一部分短肽进入溶酶体，与（MHC）Ⅱ分子结合，运到细胞表面被 CD4＋细胞识别。这些多肽含有不同的抗原表位，它们将诱导细胞毒性T淋巴前体、B细胞和特异性辅助T细胞，产生细胞免疫和体液免疫。同时，基因表达可以通过细胞分泌和分裂的方式进入组织细胞间隙，以天然折叠方式被B淋巴细胞识别。核酸免疫后，还可以使肌细胞和抗原递呈细胞被感染，从而使CD4＋和CD8＋细胞亚群活化，产生特异的免疫应答。 CorrM等（1996）的研究表明，从转染DNA得肌肉组织释放出的抗原被APC摄入，运送到管状淋巴结中，在B淋巴细胞和T淋巴细胞表达， I类MHC限制的CTL应答可能主要以这种方式产生。以前曾认为该过程需要内源抗原的表达，但现在的研究表明，只要有外源抗原的存在，也能有效地引起I类MHC限制的CTL应答。三、基因疫苗质粒载体的构建获得准确的抗原编码基因并将它插入到合适的载体DNA上，是发展基因疫苗的主要工作。1、编码抗原蛋白基因的分离制备DNA疫苗首先要获得编码抗原的基因，一般选择编码病原体表面糖蛋白的基因。抗原蛋白产生后可在宿主体内正确糖基化，从而诱导对病原体的免疫应答反应；对于易变异的病原体，最好选择各种变型都具有的核心蛋白保守的DNA序列，这样可对各种变异的病原体产生免疫应答反应，避免因病原体变异产生的免疫逃避问题。2 目的基因质粒的载体构建基因疫苗大多采用质粒作载体。一般说来，基因疫苗质粒载体至少包括5个主要的部件：（1）细菌复制子，以便质粒DNA在细菌体内复制扩增，得到大量的拷贝，但不能在宿主细胞（真核细胞）中复制；（2）原核生物选择性标记基因，如抗生素抗性基因，以筛选含有质粒DNA的阳性细菌克隆（菌株）；（3）真核生物的启动子、增强子、终止子、内含子等转录调控元件；（4）编码抗原蛋白的目的基因序列；（5）多聚核苷酸信号序列，以保证mRNA翻译时适时终止。另外，基因疫苗质粒载体通常含有一段未甲基化的CpG序列，其具有刺激Th1细胞的免疫活性。四、严重创伤后全身性炎症反应综合征及免疫调节治疗严重创伤后机体免疫功能表现为双向性改变。一方面表现为以吞噬功能和白细胞介素-2（IL- 2）等产生降低为代表的免疫受抑状态；另一方面表现出以全身性炎症反应综合征为特征的过度炎症反应。正是这二方面共同作用构成了创伤后机体免疫功能紊乱，诱发多器官功能不全综合症（Multiple Organ Dysfunction Syndrome,MODS）。下面就全身性炎症反应综合征和免疫调节治疗作一综述。

5月29日是世界肠道健康日，肠道是人体吸收营养、排出废物的重要器官，作为人体最大的免疫器官之一，肠道含有大量肠道相关淋巴组织，近年发现多种细胞和细胞产物参与肠道免疫应答，就像守门员一样，防止外来致病因素的入侵；同时它也是人体内最大的储菌库，细菌种类达400种以上，正常情况下，肠道微生态处于平衡状态。据《生命时报》调查，在中国每年有超过10亿人次出现腹泻或便秘症状，每10个中国人中就有1人受便秘影响，70%的国人存在不同程度的胃肠不适，新增大肠癌患者达40万，且在我国所有肿瘤的发病率中排名第五，平均发病年龄为58岁，比欧美国家提前12-18年。这些数字让人感到非常的触目惊心！那么哪些人群最容易被肠道疾病登门拜访呢？中老年中老年人牙齿多松动脱落，或由于疾病原因，常常喜欢吃精细软烂的食物，纤维量摄取不足。这种饮食习惯使肠道内益生菌减少，容易出现肠道菌群紊乱，导致便秘或腹泻。婴幼儿小宝宝的肠壁薄，黏膜弱，肠液中的各种酶含量较成人低。肠系膜长而薄，发生肠套叠、肠扭转的机会比成人高。同时婴幼儿神经系统功能发育不完善，发热、感冒、肺炎等均可影响消化功能，造成食欲不振、呕吐和腹泻。美食爱好者有些人似乎天生长着一副好肠胃，各种美食来者不拒大快朵颐。实则这样的你也要注意哦，常言道：病从口入，大部分病菌都是从嘴里吃进去的。若只管满足口腹之欲，不注重食品卫生，平时胡吃海塞不在意自己的肠胃，小心会吃坏你的消化系统，让腹痛腹泻消化不良等症状找上门。久坐加班族生活节奏快，工作压力大，加班熬夜，饮食不规律，已经是办公室“码农表妹们”的日常写照。不健康的生活方式会打破肠道规律，导致肠道功能紊乱。而久坐导致的胃肠蠕动缓慢，使身体不能及时将毒素排出，引发便秘等问题。所以办公室白领要时不时地站起来活动一下，让你的肠道动起来。旅游发烧友对于大多数旅游爱好者来说，贝爷的荒野求生好像还只能是神一般的存在，通常大家还是会选择相对安全成熟的旅游路线。可即便如此，“水土不服”也经常成为我们忠实的旅伴。 “出师未捷身先死”，旅游中水土不服，伴有发生腹泻、腹痛、呕吐，严重者会导致脱水。所以经常旅行或出差的人肠胃多脆弱，需要更多的呵护。好啦，经过一番对号入座，心中的警铃是否已经拉响了呢？下面我们就来看看如何养护你的肠道吧。保持好心情肠道是一个很聪明的器官，肠壁内的神经细胞超过1亿个，就好像我们个人思维的体内传感器。古人也常常用带“肠”字的词语来表达一个人的性格或心情，例如“肝肠寸断”，“荡气回肠”，“古道热肠”，“菩萨心肠”，“小肚鸡肠”等等。可见心情不好，肠胃功能是首当其冲的。压力大、精神紧张，抑郁都会导致消化系统功能紊乱，肠道动力减弱。所以学会调控和驾驭自己的情绪，对维护肠道内环境稳定大有裨益。注意饮食搭配最重要的是要保持膳食平衡，增加粗纤维果蔬的食用，控制高脂肪高蛋白食品的摄入量。膳食纤维可以维护肠道正常功能，提高免疫力，降低慢性疾病发生的风险。如果饮食结构中缺乏粗纤维食物，会使粪便通过肠道的速度减慢，使其中的致癌废物与肠黏膜接触时间延长，增大癌变风险。增加体育锻炼保持适度的运动，对于防止肠道老化有非常好的作用。运动能够加强胃肠道蠕动，促进消化液的分泌，加强胃肠的消化和吸收功能。运动还可以增加呼吸的深度与频率，促使膈肌上下移动和腹肌较大幅度地活动，对胃肠道起到较好的按摩作用，改善胃肠道的血液循环，加强胃肠道黏膜的防御机制，尤其对于促进消化性溃疡的愈合有积极的作用。治疗肠道疾病合理用药肠道是很娇嫩的器官，对于肠道疾病的治疗，对症下药是很重要的，谨慎使用抗生素。首先，为了防止脱水，我们应进行间断、少量、多次的口服补液(ORT)治疗。其次，在治疗症状的基础上，我们还要注重对肠道的保护，保证肠道内的菌群比例，恢复肠道原动力，让肠道恢复自然健康的运行状态。以日常中经常碰到的腹泻为例，在止泻治疗方面，肠黏膜保护剂如“蒙脱石散”就是一种安全有效的治疗方式，它不进入血液循环系统，并会在肠内吸附、清除病毒、细菌及其毒素，随消化道自身蠕动排出体外，同时覆盖受损黏膜，不仅可以止泻，同时还可以起到保护肠黏膜的作用。最后，饮食治疗也很重要，腹泻发生后及时补充清淡、合理的饮食可以帮助我们尽快恢复。肠道健康关乎营养吸收、消化食物、情绪控制和免疫等诸多功能，大量的免疫细胞都配置在肠道内，所以肠道是保护我们身体健康的前沿阵地。在发现肠道问题时，一定要及时调理、就医，保护好这个阵地。正因为肠道健康对于我们的幸福生活如此的重要，近年来，科学家们投入了大量的精力来对机体肠道进行研究，发现肠道中的微生物菌群与人体各种疾病存在着极其密切的关系，在此我们整理了近期的相关研究进展，分享给各位！ Nature：肠道微生物与脑血管疾病存在关联根据一项新的研究，肠道微生物组中的细菌促进颅内海绵状血管瘤（CCM）的形成。相关研究结果于2017年5月10日在线发表在Nature期刊上，论文标题为“Endothelial TLR4 and the microbiome drive cerebral cavernous malformations”。在这项研究中，Kahn团队发现CCM形成的分子通路是由TLR4激活的。TLR4是细菌分子脂多糖的一种受体。细菌分子脂多糖激活大脑血管内皮细胞表面上的TLR4会极大地加快CCM形成。相反地，如果通过基因手段将TLR4从血管内皮细胞中移除，或者如果小鼠接受阻断TLR4功能的药物的处理，那么就可阻止CCM形成。这项研究提示着改变CCM病人的肠道微生物组可能是一种有效地治疗这种脑血管疾病的方法。此外，研究结果鉴定出肠道微生物组与一种常见的脑血管疾病存在着一种出人意料之外的直接关联性。论文通信作者宾夕法尼亚大学的心血管医学教授Mark Kahn博士说，“这提示着旨在阻断TLR4信号或改变肠道微生物组的疗法可能被用来治疗这种疾病。”Microbiome：肠道微生物与慢性疲劳症存在关联最近一项研究结果表明，患有慢性疲劳症（CFS）的患者肠道微生物的水平出现异常。相关研究结果发表在《Microbiome》杂志上，论文标题为“Fecal metagenomic profiles in subgroups of patients with myalgic encephalomyelitis/chronic fatigue syndrome”。在这项研究中，研究者们对50名欢患有ME/CFS的患者以及50名健康人的肠道微生物进行了检测，并且对血液中的免疫分子进行了检测。他们发现有7类微生物种群与ME/CFS的疾病发生之间存在明显的相关性。患有ME/CFS的患者肠道的微生物构成发生了变化。而且基于症状严重性的不同，肠道微生物的变化特征也有差异。这一证据表明CFS并不仅仅是患者的大脑出现了问题。此前已经有文章表明80%的患者可能通过肠道微生物进行准确诊断，而这一发现又提供了新的证据。当然，这一研究的样本量较小，还需要进一步的研究进行佐证，尽管如此，这是首次基于肠道微生物对ME/CFS进行诊断以及治疗。Science子刊：肠道细菌影响IBS患者肠道和行为根据一项新的研究，肠道中的细菌或许能够影响肠道易激综合征（IBS）患者机体肠道和行为的症状。相关研究结果近期刊登在国际杂志Science Translational Medicine上。在这项研究中，麦克马斯特大学的研究人员将IBS患者（焦虑或者非焦虑患者）机体的微生物群落转移到了无菌小鼠机体中，随后研究人员发现，相比接受健康个体微生物的小鼠而言，接受IBS患者机体中微生物的小鼠慢慢会表现出肠道功能和行为的改变。通过粪便移植所影响的小鼠的疾病情况包括胃肠道症状、肠屏障功能障碍低度炎症以及焦虑样行为等。相关研究或为研究人员开发微生物定向疗法提供了新的思路和见解。更有意思的是，研究者还发现，肠道中的微生物或许还能够影响大脑的功能，这就表明，肠道微生物或许在多种脑部障碍的发生过程中扮演着重要角色，比如焦虑、自闭症、帕金森疾病以及多发性硬化症等疾病。同时，该项研究也为研究人员开发靶向作用肠道微生物的新型疗法，以及寻找诊断IBS的生物标志物提供了新的线索。文章第一作者Giada De Palma说道，这是一项标志性研究，因为其超越了一种简单的关联性研究，而且本文研究发现了肠道微生物的改变会同时影响IBS患者机体肠道和行为的反应。他总结道：本文研究或许提出了一种可能性，即包括益生菌疗法等微生物定向疗法或许能够有效治疗患者的肠道症状，同时也能够有效缓解IBS患者的疾病表现。Microbiome：肠道微生物潜在塑造大脑结构根据最近一项研究，大脑产生的信号能够影响肠道微生物组的构成，而肠道微生物分泌的化学物质又能够反过来塑造大脑的结构。相关结果发表在近期的《Microbiome》杂志上。论文标题为“Differences in gut microbial composition correlate with regional brain volumes in irritable bowel syndrome”。在这项研究中，加州大学洛杉矶分校的研究人员收集了29名患有肠道应激综合征（IBS）的患者以及23名健康人的行为学以及临床检测相关数据，还有他们的粪便样本进行分析。通过DNA测序以及多种数学手段对微生物的的多样性以及丰度进行定量计算。之后，研究者们将这一结果与大脑的结构特征进行了一一比对。此外，研究者们还对儿童外伤，大脑的发育以及肠道微生物组结构之间的联系进行了深入的探究。这项研究第一次揭示患有IBS的患者肠道微生物组与大脑参与处理感受信号的区域之间的关系。早期的创伤史与大脑的结构、功能的改变之间存在明显的相关性，而且会影响肠道微生物的组成。因此，有可能肠道微生物感知到这些信号，进而导致其微生物的组成发生永久性的改变。这些改变将可能对大脑的感受区域产生反馈，改变对肠道信号刺激的敏感度。对肠道微生物进行分析渐渐成为临床长筛查IBS的主要手段。而在不远的将来，控制饮食以及摄入特定的微生物也将成为个体化治疗的主要方式。同时，对于患有IBS且大脑与肠道特征具有明显特异性的人群来说，他们对于大脑降压式的疗法、认知行为疗法以及靶向药物治疗的反应效果也将有明显的差异。Cell Host & Microbe：肠道微生物诱发机体老化相关的炎症根据一项新的研究，肠道微生物或许是机体老化相关炎症和过早死亡的罪魁祸首之一，老年小鼠机体中肠道微生物的失衡或许会促进肠道组织易于泄漏，从而释放细菌产物来诱发炎症，并且损伤机体的免疫功能。相关研究结果发表在国际杂志Cell Host & Microbe上，论文标题为“Age-Associated Microbial Dysbiosis Promotes Intestinal Permeability, Systemic Inflammation, and Macrophage Dysfunction”。在这项研究中，来自麦克马斯特大学等机构的研究人员在无菌的环境中培育小鼠，并且将这种小鼠同常规环境中培养的小鼠进行对比研究。然后他们发现，相比常规环境培育的小鼠而言，无菌小鼠并不会表现出老化相关的肠道通透性增加、细菌产物水平的增加，以及血液中促炎性细胞因子水平的增加；此外，很大一部分比例的无菌小鼠都能够存活到600天，而且来自老年无菌小鼠机体中的巨噬细胞还能够继续维持其机体的抗菌活性。未来研究中，研究者Bowdish及同事将会通过更为深入的研究来鉴别出能够随着机体老化维持肠道健康及完整性的优良细菌，而且研究人员还希望通过研究理解机体微生物群落发生改变的时间以便可以及时采取策略来改变机体的免疫功能。本文研究结果或能帮助研究人员开发出新型疗法来通过操控机体微生物组改善肠道健康，并且降低老化相关的炎症表现。Scientific Reports：肠道微生物潜在预防2型糖尿病根据一项新的研究，血清中高浓度的吲哚丙酸可以预防2型糖尿病。相关研究结果发表于Scientific Reports。论文标题为“Indolepropionic acid and novel lipid metabolites are associated with a lower risk of type 2 diabetes in the Finnish Diabetes Prevention Study”。在这项研究中，研究人员比较了两组参加芬兰糖尿病预防研究所的参与者的相关数据。在研究开始时，所有参与者都超重，葡萄糖耐受功能受损。有的参与者在第一个五年中发展为2型糖尿病，有的在15年的随访中，未发展成2型糖尿病。这项发现为肠道细菌在饮食、代谢与健康之间的相互关系提供了新观点。肠道细菌的直接识别是一个复杂的过程，然而通过其代谢物来分析肠道细菌对于发病机制的作用似乎是可行的，通过此次研究，科学人员得出结论，通过控制生活方式，2型糖尿病是可以预防的。其中最主要的就是减肥，多运动，饮食调整，包括多吃全麦食品和高纤维食品。Neurology：帕金森症有可能源于肠道科学家们最近发现了新的证据表明帕金森症有可能是起源于肠道，进而扩散到了大脑：经历了迷走干神经切断术的患者帕金森症的发病率得到了明显的减轻。相关结果发表在《Neurology》杂志上，论文标题为“Vagotomy and Parkinson disease: A Swedish register-based matched-cohort study”。在这项研究中，研究者们对瑞典国内40年来的数据进行了分析，比较了9430名进行了迷走神经切除术的患者以及377200名对照人群的信息。这项经历5年的研究结果表明，接受这一手术的患者帕金森症的发病率相比对照组下降了40%。这一结果更加能够证明帕金森症有可能是来自于我们的肠道。研究者们相信，这一发现能够进一步证明帕金森症与肠道异常之间的关系，并且有助于开发针对性的预防与治疗的方法。如果我们对这一现象背后的机制能够有清楚的理解，那么将会有助于防止此类疾病的发生。AJCN：益生菌组合疗法治疗过敏症日前，一项刊登在国际杂志The American Journal of Clinical Nutrition上的研究报告中，来自佛罗里达大学的研究人员通过研究发现，一种益生菌组合或许能够帮助减轻花粉症的症状。在这项研究中，研究人员招募了173名健康成年人进行研究，研究对象都表示经历过季节性过敏，研究人员在春季过敏高峰时进行了相关实验，相比安慰机组研究对象而言，摄入益生菌治疗的研究对象表示其生活质量得到了改善，比如益生菌组个体遭受的花粉症相关的鼻腔症状明显减轻了。研究者Jennifer Dennis表示，并不是所有益生菌都能够帮助抵御过敏症，如今我们知道，一种由乳酸杆菌和双歧杆菌组成的益生菌组合能够帮助维持机体消化系统和部分免疫系统的健康。后期研究人员希望通过更为深入的研究来开发新型有效的疗法治疗个体的季节性过敏症。Nat Immunol：肠道益生菌逆转炎性肠病根据美国北卡罗莱纳大学的一项最新研究，有益细菌或许是帮助逆转炎症性肠病中肠道炎症的关键。研究人员在这篇发表在国际学术期刊Natue Immunology上的新文章中介绍了缺少一种叫做NLRP12的炎症抑制因子如何导致炎症失控（DOI: ）。这种蛋白在保持肠道菌群稳定防止炎症方面有重要作用。文章作者Liang Chen表示，NLRP12是免疫系统的一个检查点，能够检查炎症水平，如果缺少了这种蛋白，就会出现严重的肠道炎症，促进炎症性肠病。这不仅是NLRP12本身的作用还包括其与肠道细菌之间的相互作用。研究人员发现添加有益细菌或靶向炎症信号可以逆转不良循环。他们认为他们的研究发现或有助于开发治疗方法，治疗因NLRP12表达下降导致的炎症性肠病。BJN：鼠李糖乳杆菌HN001降低孕期糖尿病风险根据一项新的研究，一种叫做鼠李糖乳杆菌HN001的益生菌或许能够降低女性妊娠糖尿病的风险，同时还会降低个体的空腹血糖水平，相关研究刊登于国际杂志British Journal of Nutrition上（DOI:）。在这项研究中，研究人员让194名孕早期的女性摄入含有HN001的胶囊，同时让另外200名孕早期女性摄入安慰剂，随后在女性怀孕24-30周时评估个体的妊娠糖尿病水平。然后研究人员发现益生菌治疗组与安慰剂治疗组的女性相比，患上妊娠糖尿病的比例下降了68%。此外，摄入益生菌HN001后也能够明显降低研究组女性机体中的空腹血糖水平。研究结果表明，益生菌HN001或许能同以某种方式同正常的肠道细菌发生相互作用从而降低孕期女性机体的葡萄糖水平；此前研究人员也通过研究发现，相同的益生菌对机体免疫系统也会产生相应的保护效应，同时还会降低个体婴儿期50%患湿疹的风险。研究者Crane教授说道，下一步他们将会深入研究调查益生菌是否会降低普通人群患糖尿病的风险；研究者们希望后期能够通过更多研究来利用这种益生菌结合益生元来观察是否其能够有效抑制成年人前驱糖尿病的进展。

免疫功能检测论文

免疫荧光技术是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。下面我给大家分享一些免疫荧光技术论文，大家快来跟我一起欣赏吧。

免疫荧光技术在临床检验中的应用

【中图分类号】R46【文献标识码】A【文章编号】1672-3783(2012)11-0347-01

【摘要】：目的是了解免疫荧光技术在临床检验中的应用及其发展方向。免疫荧光技术又被叫做荧光素技术，顾名思义，是用荧光素标记技术对抗体或抗原进行标记，然后用于免疫学测定，免疫荧光技术是利用物质吸收光能会发光的特性来研究的。我国的荧光抗体技术，多用于病原微生物的诊断，60年代随着荧光抗体极大的进步，显著地提高了荧光抗体的敏感性和特异性，这一技术在自身免疫病和抗原免疫组化定位等方面都得到了广泛的应用。在本文，以免疫荧光技术的临床表现为案例，分析其特点，方法主要有荧光抗体技术、荧光抗体染色法、荧光间接染色法。结果是：通过对免疫荧光抗体技术的研究，分析出其各种优缺点，在以后的医学运用中能够着重利用。

【关键词】：免疫荧光技术荧光抗体基本运用基本类型

一目的

目的是通过研究免疫荧光技术的方法了解其在临床中的应用及其发展的方向，通过荧光抗体技术、间接荧光抗体染色方法、免疫荧光法等几种方法的介绍，了解荧光技术的发展，并且了解其优缺点，并且对免疫荧光技术的具体在临床中的应用也作出了列举，使能够在以后的临床运用中避免和其缺点的碰撞而利用其优点的地方。

二资料

本分析共有20例患者，年龄分布在25-37岁，平均年龄为32岁，其中9例为甲型链球菌患者，5位是寄生虫感染的患者，6位肿瘤病毒患者，在近期的一个月内没有使用过激素的病人，在此类人中，无精神病患者和心脏功能衰弱患者，选择病例严格控制，我们确保被研究者都符合条件，确保本次对免疫荧光技术的实验结果的准确无误。

方法：荧光抗体技术、间接荧光抗体染色方法、免疫荧光法来分别比较其优缺点和其检测效果的运用。

三结果

荧光抗体技术在临床试验中已经用于对细菌和病毒等的诊断上，针对通过的方法鉴定主要通过这几方面说一下其结果。对于细菌的检验，其材料可以是培养物或者感染组织，这种方法叫其他来说能够看到普通光学显微镜看不到的病毒。在对寄生虫诊断上，间接荧光体技术运用广泛。对于自身免疫疾病的实验诊断中，对免疫荧光技术的运用较为广泛。对于荧光抗体技术的运用主要是分析流式细胞分析，能够检测出所测细胞的大小、拆散率等。

四讨论

免疫荧光技术现在已经被广泛应用到了医学和生物的许多方面，那么在本文中，研究免疫荧光技术在临床中的具体运用表现有哪些呢?大致从以下几种角度考虑：

1在细菌诊断中免疫荧光技术在这里主要是用于对细菌和抗原结构的研究，例如甲型链球菌，能够利用这项技术做出快速的分析和判断。

2在寄生虫学中利用免疫荧光技术，在这方面的主要表现是对于疟原虫、钩虫、蠕虫等的研究，主要是针对这些寄生虫感染的免疫学的机理方面的研究。

3在病毒学中免疫荧光技术在临床中应用最广的领域主要是对病毒学诊断，这主要研究与器官细胞的定位，此外还有对感染、肿瘤病毒的研究，一般研究表现是通过对血清中抗病毒的抗体研究来检测对脊髓灰白质炎或者狂犬病等。

4在免疫病理中在临床中对免疫病理的运用主要是通过跟踪法检查对于球蛋白在沉淀中的开展情况，比如说对于天胞疮，一般会隐藏在真皮的基底膜中，对于一些隐性的病症也会要通过补体荧光的鉴定来测定其位置。

免疫荧光技术的运用还表现在对血液中B和T细胞的鉴定，在具体运用中对于器官移植的鉴定也有所涉及，此外还有对于组织中免疫球蛋白及补体组分的检测等等。

在研究免疫荧光技术的临床表现的同时，进一步需要的研究就是对于免疫荧光技术的基本类型，针对这点的研究，可分为以下几种类型：

1直接法这主要是利用荧光标记的特点，并且将其和与之相应的抗体结合，从而来鉴定相对未知的抗原，这种操作方法简易灵活，但缺点是针对范围比较局限。

2间接法这是利用免疫荧光抗体能够标记抗免疫球蛋白的作用来鉴定的，在具体操作中首先，用已知的抗体和抗原反应，然后增加免疫球蛋白抗体，可以看出形成的复合体能够就其发光部位来判断，这种方法的优点是敏感性高，但缺点也存在抗体纯度不高，容易受非特异性荧光的干扰影响效果。

3、补体法这是针对荧光标记抗不抗体，能够来对照抗原或抗体的原理反应，在具体操作中，首先已知抗体或未知抗原的反应，然后将其补充正常人体中新鲜血清，准备就绪后加入荧光标记抗体，可以看到在这里利用荧光抗体和其溶解的结合。这种方法只需将荧光抗体就能够得知系统中的其他抗原，但其缺点存在不稳定性，需要固定的抗体才能与之结合，不然会导致实验的失败。

4、双标记染色法这种方法主要是针对免疫荧光技术能够将两种不同抗原在同一标本内分别染色的特点对其研究，在具体运用中，一般是将呈黄绿色荧光和成色荧光标记在不同的两种抗体中，在抗体中的不同颜色能够清晰的判断出两种抗体的含量和分布。

5、反差染色法为了减少非特异性染色的运用，加强特异性免疫荧光的对比强度，对于某些组织的标本常见的方法是反差染色法，一般会以牛蛋白的白作为陈染，故名思议，反衬标记物的静电荷强，能够有效抑制非特异性染色，当伊文思蓝进入到染色体中时，会发出橙色的光，也就衬托出特异抗体的黄绿色荧光。

结论

总之，免疫荧光技术是标记免疫技术中最早的一种技术，把荧光免疫法按照不同的体系和测量方法如果进行进一步划分，还可以继续细分到若干种，在具体的临床试验中，由于一般的荧光技术在测定中的成本比较高，所以对其的判定也有一定的难度，但其与其他免疫方面相比，譬如和放射免疫技术相比，其在应用中有更大的发展空间，本文主要通过几种研究方法对免疫荧光技术进行了分析探索，并且透视出免疫荧光技术的具体应用和前景，并且也希望免疫荧光技术这种古老又先进的技术能够得到更好的发展。老而年轻的技术将会具有荧光技术这种

参考文献

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检疫性植物病原分子检测方法论文

为了防止国外危险性有害生物传入,促进国外优质花卉种苗的引进,有必要对目前我国商业性引种的现状和特点进行分析,提出管理措施,以确保贸易规范运作和产品质量安全。1商业性引种的特点商业性引种是指用于生产、销售、观赏绿化等商业活动从国外引进植物种子、苗木、花卉、种球等活体材料。随着对外贸易发展和国内生产的需要,近年来商业性引种日益频繁,并呈现品种多、批次多、数量大、来源广、进境口岸集中、流向远、种植地分散和植物疫情复杂等特点。据统计, 2007年我国进口来自十余个国家的鲜切花(含切叶、切枝)数十个品种约4300批次、1. 5 亿枝;进口花卉种苗(含盆花、试管组培苗) 5611批次、1. 3亿株和花卉种球340批次、1. 5亿头(球) 。这些种子、苗木、花卉和种球被分散种植在全国各地,大部分用于市场销售、园艺博览、园林绿化等,少部分经生产栽培后又返销日本、美国、欧洲、韩国、东南亚、中东等国际市场,如种子外繁,种球进口、切花出口等。在进境花卉种苗中共检出植物疫情1150 批次、190种,其中截获的检疫性有害生物有:荷兰肖竹芋上的香蕉穿孔线虫(Radoph lus sim iles) 、法国大花金鸡菊和荷兰白鹤种球上的南芥菜花叶病毒(A rabis m osaic virus) 、荷兰葫芦考花苗上的鳞球茎茎线虫(D itylenchus dipsaci) 、缅甸芭蕉苗上的非洲大蜗牛(Achatina fulica) 、日本洋桔梗上的三叶斑潜蝇(L iriom yza trifolii) 、日本百日菊上的拉美斑潜蝇(L. hu idobrensis) 、日本满天星上的番茄斑潜蝇()和法国百燕花上的草莓滑刃线虫(Aphe2lenchoides fragariae) ;此外,检出的有害生物还有百合无症病毒、郁金香碎色病毒、短体线虫属、根结线虫属、穿刺根腐线虫、拟毛刺线虫属等。2引进种苗检验检疫中存在的问题 2. 1检疫审批多头管理由于现行体制的原因,商业性引种的审批部门涉及三个政府主管部门。禁止进境植物和介质土的特许审批由国家质检总局负责,一般审批由国家农业部或林业局负责,因而造成审批标准和尺度不统一、审批管理与口岸检疫不协调、审批内容与疫情传递不畅通、源头监管与后续隔离不到位等问题,从而存在疫情传入的潜在隐患。 2. 2缺乏商业性引种管理办法和查验标准国家质检总局现有的进境植物繁殖材料检验检疫管理办法难以满足商业性引种的检验检疫管理需要。目前进境口岸通常开展现场检疫和实验室检验工作,而隔离试种、后续监管和疫情处理等由种植地检验检疫部门来协助完成。由于口岸与种植地所在检疫部门之间缺乏信息互通和后续查验的协同机制,进境货物很难进入到指定监管场所隔离试种,多数在运输途中就分销扩散,造成后续隔离监管失控。 2. 3检验检疫标准和技术手段不完善、口岸检测时限较长目前我国商业性引种主要依据《进出境动植物检疫法》实施有害生物检疫工作。由于缺乏全国统一的检验检疫标准,存在现场检疫、实验室检验、有害生物鉴定、除害处理方法等尺度不统一。由于对细菌或病毒检疫缺乏快速灵敏的检测试剂,很难实现每批货物经实验室检测后再调离口岸。此外,近年来品质纠纷也不断发生,如运输过程中的冻伤损害、种球发芽率偏低、质量不符合合同标准等。 2. 4缺乏有效可行的除害处理方法试验研究表明溴甲烷、磷化铝、氧硫化炭、敌敌畏等药剂熏蒸,对花卉种苗中携带的各类线虫没有熏杀作用,对种球(种苗)的发芽、种苗的生长还产生不同程度的药害。热水或杀虫剂浸泡种苗虽能有效杀灭线虫和螨类,但对品质影响较大。辐照、微波、蒸热等方法对鲜活商品也存在诸如成本过高或品种变异等问题。在实际工作中,对种苗携带的线虫和病毒病害,除整批销毁外尚无其它有效和实用的除害处理方法,如对进境百合种球携带的无症病毒或斑驳病毒等,只能在大田发病后,逐株拔出集中销毁。 2. 5隔离试种和后续监管难以到位按照法律规定,进境种子苗木等繁殖材料必须实行隔离试种和后续监管,隔离设施须经口岸检验检疫机构考核认可。但实际上由于商业性引种数量大、品种多,缺乏有效的隔离场所,同时商业性引种的时效性等原因,很难实施有效的隔离检疫和监管。答案补充 3检验检疫对策探索 3. 1明确商业性和科研性引种的定义和范围科研性引种应是对国外优良品质资源的引进和驯化,是对国内品种结构的完善和补充,对产业发展有重大的现实意义,引种部门通常是政府或科研单位,种类主要有粮食作物、经济作物、园林植物和野生植物等,且数量较小。商业性引种应是生产和市场需要引进的各类花卉、种苗等繁殖材料,由内外贸易供求关系所决定,使用部门是公司或消费者,如绿化树木、观赏花卉、百合种球、生长介质等。3. 2确定和发布商业性引种的指导性名单和来源国家通过汇总和分析近年来我国引种的品种、数量和产地,由国家质检总局会同农业部或国家林业局逐年发布商业性引种的指导性名单和来源国。从审批环节将商业性和科研性引种分开管理,根据各自特点制定检疫审批管理办法和检验检疫操作规程。

1 RT-PCR技术

RT-PCR是英文Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction的简写，中文称之为反转录聚合酶链式扩增反应。在反转录酶M-MLV或AMV的作用下，以RNA为模板、以20个左右的核苷酸为引物，反转录合成cDNA。再以cDNA为模板，两个3和5端互补寡核苷酸引物，由Taq聚合酶从5→3进行一系列DNA聚合反应，扩增出所需要的目的DNA，可将极微量的靶DNA特异性地扩增上百万倍，从而大大提高了对DNA分子的分析和检测能力。

利用PCR技术，可以检测到单分子核酸或对每10万个细胞中仅含1个靶核酸分子的样品。因此，该技术创立至今十年来，迅速地形成为常规的标准程序，为生物科学提供了从微量微生物材料中快速得到大量特定的遗传物质的实验手段。PCR在植物病毒的检测、鉴定和植物病毒的检疫工作中也将具有重要意义。如果病毒核酸是DNA类型，不需要反转录（RT），直接可以进行聚合酶链式扩增（PCR）。而大多数植物病毒的核酸类型为RNA，因此，需要先进行反转录（RT），再进聚合酶链式（PCR）扩增。用1%琼脂糖和5%聚丙烯酰胺进行电泳，即可检出扩增片段。

这里以香石竹斑驳病毒为例，介绍RT-PCR检测香石竹斑驳病毒的实验技术。

用已知病毒核酸保守序列设计引物，分别提取病、健植物总RNA为模板，进行RT-PCR反应，琼脂糖或PAGE电泳检测扩增结果。感病材料会出现特异扩增带。如香石竹斑驳病毒（Carnation mottle virus，CarMV）。根据该病毒的RNA序列设计引物，P1引物（5′端引物，与CarMV RNA的2516～2538同源）：5′-〔TTA，GTT，TGC，CCC，CGT，TGG，TAA，CC〕-3′。P2引物（3′端互补引物，与CarMV RNA的3100～3124对应）：5′-〔AAG，CGT，CAT，CGT，TGA，ATC，CCA，GAG〕-3′。目标片段大小为608nt。对病健材料进行了RT-PCR，从感病材料中可以扩增出了大约600bp的特异片段，而健康植物无此扩增带。用此方法可以快速、准确地检测香石竹斑驳病毒。操作如下：

（1）RNA提取

分别取感病及健康叶片～，加液氮研成粉末，按1g∶2ml的比例悬浮于RNA抽提缓冲液（20mmol/L Tris-HC1 ，1mmol/L EDTA，1%SDS，巯基乙醇）。按1∶1比例加入水饱和苯酸—氯仿—异戊醇（25∶24∶1）混合液，抽提数次，乙醇沉淀总RNA。溶入20～50μl TE缓冲液中，-70℃冰箱保存备用。

（2）cDNA合成反应体系组分为

待检测材料总RNA或健康材料总RNA各μg，20pmol/L引物P21μl，5×MMLV缓冲液4μl，ddH2O7μl，该混合液于88℃处理10min后冰上迅速冷却，然后加入10mmol/L dNTPs 1μl，40U/μl Rnasin μl，100mmol/L DTT 2μl，200U/μl MMLV逆转录酶1μl，混合后经42℃处理lh，合成cDNA。

（3）PCR扩增

取上述的cDNA各μg，分别加入10×PCR缓冲液5μl，20pmol/L引物P1和引物P2各1μl，10mmol/LdNTPs 1μl，88℃10min之内加2U/μl Taq DNA聚合酶1μl，加ddH2O至50/μl。然后在液面上加三滴石蜡油，进行如下PCR热循环：94℃3min，60℃1min，72℃1min，1次循环；94℃40s、60℃1min，72℃1min，35次循环，最后72℃延伸10min。PCR产物用1%琼脂糖凝胶电泳检查。携带CarMV的样品会出现600bp的特性扩增带。如图1。

图1 CarMV PCR产物的琼脂糖凝胶电泳结果

1.提纯病毒材料PCR扩增 2.感病组织PCR产物 3.健康组织PCR产物 4.分子量标准

RT-PCR技术是检测植物病毒中灵敏度最高的方法之一。其灵敏度比ELISA高100～1000倍。比核酸分子杂交高10～100倍。目前已有PVY、CMV、CarMV、TAV、CVB、ToRSV、TRSV、PNRSV等花卉病毒的特异引物和成熟的RT-PCR技术。

2 核酸分子杂交

核酸分子杂交是基于植物病毒的RNA或DNA链之间的碱基配对的基本原理。当双链DNA分子加热时，链间的氢键被破坏，两条链分开，变性分开的单链冷却时，碱基的氢键重新形成，双链复原。在变性分开的RNA或DNA单链上加上同位素或非同位素标记，做成探针，和待检测样品的RNA或DNA进行碱基特异性配对而形成稳定双链分子，通过检测同位素的放射性和非同位素的显色或荧光来检测样品的RNA或DNA是否与探针发生杂交反应。根据已知病毒核酸序列设计引物，用标准阳性材料，即已分离、鉴定的某种病毒材料，提取总RNA，用反转录酶反转录形成cDNA，用同位素或非同位素标记此cDNA，制备成探针，与待测样品进行分子杂交。如果能杂交，出现阳性，说明待测样品含有已鉴定的该病毒。该方法能快速、高效地检测植物携带病毒的情况。

用于检测的杂交有斑点杂交和核酸吸印转移杂交。斑点杂交是将待测样品的DNA或RNA和汁液点于硝酸纤维素膜上，经干燥后，与同位素或非同位素标记的探针发生杂交反应，以检测样品中是否存在待测病毒。斑点杂交是一种快速、简便、经济的快速检测和鉴定病毒的方法。核酸吸印转移杂交需要先将待测样品的DNA或RNA经限制性内切酶切为大小不等的片段，电泳后，从凝胶中转移到硝酸纤维素膜上，经干燥后，再与同位素或非同位素标记的探针发生杂交反应，以检测样品中是否存在待测病毒。

核酸分子杂交灵敏度不如RT-PCR高，但此技术不受病毒不同株系的影响，无株系专化性。

不同实验方法测定植物病毒具有不同灵敏度（表1），可以根据需要选用。

表1 不同实验方法测定植物病毒的灵敏度比较

植物是生命的主要形态之一，包含了如树木、灌木、藤类、青草、蕨类、及绿藻、地衣等熟悉的生物。下面是由我整理的关于植物的科学论文，谢谢你的阅读。

关于植物检疫问题的思考

摘要：植物检疫是防止检疫性有害生物传播蔓延、保护农业生产安全的主要措施，也是保护农产品贸易顺利进行的前提。本文分析了植物检疫及其积极意义，并针对存在的问题提出了对策建议。

关键词：植物检疫;林业;可持续发展

为了保护一个国家或地区林业的生产、生态系统的安全以及其可持续发展，极有必要对植物及其产品采取的一系列旨在防止危险性有害生物传播和定殖的综合性管理措施，植物检疫就是其中的重要一环。

一、植物检疫的定义与内涵

***一***植物检疫的定义

植物检疫是指为了保护一个国家或地区林业生产和生态系统的安全，由法定的专门机构，依据有关的法规，对植物及其产品在流通前、流通中和到达新的种植或使用地点后所采取的一系列旨在防止危险性有害生物传播和定殖的综合性管理措施。

***二***植物检疫的内涵

植物检疫的目的是要防止危险性有害生物通过人为活动***贸易或非贸易的***进行远距离传播，保护一个国家或一个地区林业生产和生态系统的安全。植物检疫工作所针对的有害生物是指那些危害严重，防治困难，主要通过人为活动进行远距离传播、国内尚未发生或虽有发生但分布不广的有害生物。

二、植物检疫的积极意义

***一***开展植物检疫是保障植物和生态建设可持续发展的需要

植物的可持续发展，在一定程度上受到病虫害的制约。病虫害贯穿于植物生产的全过程，随时都可遭到病虫的危害，轻者影响林木开花、结实、材积增长，重者整株、大片枯死。植物检疫是一项防患于未然的工作，它可以把检疫性有害生物阻截在国门之外，消灭在产地之内，减轻防治工作的压力和经费的开支，也提高了种苗的质量和造林的成活率;它不仅是一项长期的预防措施，也是一种从根本上治理病虫害的方法。

***二***开展植物检疫能有效防止***有害生物的传入

众所周知，在自然界中，生物的分布是有地域性的，一种有害生物要从原发生地传播到另外一个新的地区，由于自然屏障的阻隔，单靠自身的能力往往是办不到的，必须依靠外力的帮助。另一种是人为活动***贸易或非贸易性***。这两种传播途径，以人为传播最为重要，因为许多有害生物可潜伏在植物及其产品的内部，或依附在其外表，或混杂在其间，借助植物及其产品的调运、邮寄，把它们携带到自身所难以到达的地方。有害生物一旦进入一个新的生态系统，如果有其寄主植物存在，而又避开了原产地天敌的制约，则很容易在那里定殖下来，迅速繁衍下去，氾滥成灾。要解决这一问题，最好的办法就是积极地开展植物检疫。森检工作就是要***品质优良的林木、花卉新品种引进来，同时又要防其有害生物传入。

三、植物检疫工作中存在的问题

随着农业产业化结构的不断调整，城市化程序的发展，特色蔬菜、中药材、花卉苗木、草皮等种植面积迅速扩大，种子、苗木等繁殖材料，农产品及花卉苗木等植物和植物产品调运频繁，调运量不断增大，农业植物检疫工作不但任务繁重，而且面临的形势严峻。

***一***植物检疫的品种范围较窄客观地说，目前只有水稻种子、蔬菜种子进行了规范化的产地、调运检疫。其他如水果类、蔬菜类、商品粮等大量农产品的产地、调运检疫很少开展。

***二***调运带证率较低从事农产品及花卉苗木等植物生产经营单位对植物检疫法规及工作内容了解甚少，部分经营者认为检疫就是收费。极少数经营者很不配合，严重影响了检疫工作的顺利开展。市场销售的农产品及花卉苗木普遍存在无证调运现象，以汽车运输的尤为严重。大部分经营者认为，只要取得农产品《产地检疫合格证》或植物检疫证明编号，运输时就不需要办理调运《植物检疫证书》。据调查，在持证运输的农产品及花卉苗木中，省内调种带证率明显低于省间。

***三***植物检疫技术水平较低植物检疫是一项技术性很强的工作，肩负著保护国家植物生产安全的重任。植物检疫员需要由工作作风正、法制观念强、业务能力精的人员担任。而目前从事植物检疫工作的人员有相当一部分人不懂业务，有的虽然懂业务，但法律知识少，不能胜任植物检疫工作。在检疫过程中，由于没有相关仪器装置，目前检疫物件只能靠产地检疫及产地检疫证书加以判断，很多调运的植物及产品产地检疫又很不规范，在调运过程中凭直觉来判断有无检疫容易产生很大误差。

***四***植物检疫实施难

虽然有相当完善的植物检疫法规但实际操作难。农业部《植物检疫条例实施细则***农业部分***》、《山东省植物检疫办法》等对应施检疫的植物及植物产品的规范化检疫有明确规定，但实际上大多数应施检疫的植物及产品的产地调运没有检疫。虽有健全的检疫队伍但发挥职能作用难。由于缺乏经费，加上植物检疫功能弱化，各地疫情调查、疫情分布、调运检疫等经常性检疫工作淡化或难开展，多数检疫员没有发挥职能作用。检疫把关口但把关难。交通、铁路、邮电等运输企业或个人应凭“植物检疫证书”正本承运、收寄应施检疫的植物和植物产品，配合植物检疫部门做好植物检疫工作。交通、铁路部门已经严守把关，但邮政部门对大量应施检疫的植物和植物产品如商品粮、水果、蔬菜等把关不严，工作上与检疫部门脱节。

四、开展植物检疫的措施

***一***根据植物及其产品的流通环节采取相应的检疫措施

植物检疫的任务就是要防止检疫性有害生物通过人为活动进行远距离传播，既要防其传出，又要防其传入，两者必须兼顾。要防止检疫性有害生物的人为传播，就必须在植物及其产品未进入流通领域之前、流通途中和到达新的种植或使用地之后采取检疫措施，打断有害生物人为传播的环链，即可终止有害生物的传播。在不同的环节应采取不同的检疫措施，如在植物及其产品培育期间，可用划定“疫区”和“保护区”，分别实行封锁、消灭和保护措施;开展产地检疫，把好产地检疫关;从国外引种，严格履行检疫审批手续等。在流通途中，可用设卡检疫***包括进出境检疫、旅客携带物检疫、邮包检疫、过境检疫及国内调运检疫***等措施。到达新的种植或使用地点后，可用隔离试种检疫、集中种植、疫情监测、铲除措施等。

***二***正确处理好“把关”与“服务”之间的关系

在我国，植物检疫有两个职能:一是防止检疫性有害生物通过人为活动进行远距离传播，既要防止其传出，又要防止其传入。二是为植物及其产品的种植者、经营者服务，为林业生产的健康发展保驾护航，维护国家的外贸信誉。在森检工作中，“把关”与“服务”是一对矛盾的统一体，“把关”是前提，“服务”是目的，“把关”是为了“服务”，“服务”又必须“把关”，一定要把“把关”与“服务”有机地结合起来。在改革开放方针的指导下，我国的外检工作提出了这样的口号:“做好检疫工作，发挥把关作用，服务对外开放，方便进出往来”。在具体做法上，他们派员到港澳等***地区进行疫情调查，初步检查、监督包装和消毒处理，从而缩短了入境检验时间，加快了检放速度，促进了转口贸易的发展。国内检疫也把重点放在了产地，狠抓疫情源头，严把产地检疫关，把检疫性有害生物消灭在种苗生长期间，不仅提高了种苗、花卉的质量，也防止了检疫性有害生物的传播蔓延。

***三***把法制手段与技术措施有机地结合起来

植物检疫是一件法制性很强的工作，森检工作人员的任务就是贯彻执行国家和地方颁布的植检和森检法规。他们不仅要对流通过程中的植物及其产品进行管理，还要对植物及其产品拥有者的生产经营活动加以规范。如何对人们的生产经营活动进行规范呢?主要是通过宣传、教育。让生产经营者自觉地按照植检、森检法规的规定去办理检疫手续，如调出植物及其产品应及时向当地森检机构办理申报，从国外引进种苗应主动向省级森检机构办理引种审批，发现疫情应及时报告等。植物检疫不仅是一项法制性很强的工作，而且对技术的要求也很高。在实际工作中，植物及其产品携带检疫性有害生物的事还是很多的，但如何在有限的时间内把它们检查出来，又如何把它们除掉，让健康的种苗正常流通，都不是一件容易的事。没有一套行之有效的检疫检验方法和除害处理办法是不行的。因此，要想把森检工作搞好，必须把法律手段和技术措施有机地结合起来。

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细胞分子免疫学杂志

一般一个半月。《细胞与分子免疫学杂志》由中国免疫学会、陕西省免疫学会和第四军医大学共同主办, 是国内外公开发行的国家级免疫学科技期刊。《细胞与分子免疫学杂志》读者对象：以医学界中、高级临床、科研、教学工作者为主要读者对象,面向广大生命科学、基础和临床科研工作者征稿。《细胞与分子免疫学杂志》主要栏目：抗体工程、基础研究、临床研究、技术与方法、综述、消息与动态等栏目。另根据需要开设专家论坛等栏目。

医学学术期刊的种类有数千种之多，主要包括三个等级，中文核心期刊，科技核心期刊，和普通期刊，很多省份会划分自己的一类，二类期刊标准，核心期刊大概就有1000多种，其中中文核心200多个，科技核心900多个，学术期刊又根据医学的分类细分为很多类别，比如护理的有中华现代护理杂志，泌尿外科有中华泌尿外科杂志。。。。。其它专业亦是如此，发表一篇跟专业相关的医学论文，可以适当提高职称晋升几率，具体的也可以跟专业机构咨询，希望能为您提供到帮助

The American Journal of Medicine《美国医学杂志》美国ISSN:0002-9343，1910年创刊，全年18期，Elsevier Science出版社，SCI收录期刊，SCI 2005年影响因子。刊载临床研究原始论文和初见病例报告、评论。兼及临床病理学高级学术会议探讨医学、科学与社会问题的文章和编辑部短评。American Journal of Preventive Medicine《美国预防医学杂志》美国ISSN:0749-3797，1984年创刊，全年8期，Elsevier Science出版社，SCI收录期刊，SCI 2005年影响因子。刊载预防医学基础和应用研究论文。涉及的学科包括流行病学、遗传学、营养学、毒理学和社会科学；应用的领域包括卫生管理、传染病防治、职业医学、环境卫生、航空航天医学、老年病、母婴保健、计划生育等。The American Journal of Surgery《美国外科学杂志》美国ISSN:0002-9610，1890年创刊，全年12期，Elsevier Science出版社，SCI收录期刊，SCI 2005年影响因子。历史悠久的著名外科权威专业性学术期刊，由美国六家主要外科医学会合办，专载普通外科临床与实验研究论文，介绍手术技术、外科手术、步骤、设备和器械。主要栏目有论著、方法探讨、外科教育、简短报告、评论等Archives of Gerontology and Geriatrics《老年医学与老年病学集刊》爱尔兰ISSN:0167-4943，1982年创刊，全年6期，Elsevier Science出版社，SCI收录期刊，SCI 2005年影响因子。刊载实验老年医学和临床老年病学以及老年社会研究等方面的论述。Archives of Medical Research《医学研究档案》墨西哥浙江工业大学图书馆信息咨询部编 Elsevier Science 出版社期刊投稿指南 14ISSN:0188-4409，1970年创刊，全年6期，Elsevier Science出版社，SCI收录期刊，SCI 2005年影响因子。2004年起由Instituto Mexicano del Seguro Social, Oficina de Bibliotecas y Divulgacion,MEXICO 出版，发表生物医学研究方面的原始论文和报道。Biomedicine & Pharmacotherapy《生物医学与药物疗法》法国ISSN:0753-3322，1947年创刊，全年10期，Elsevier Science出版社，SCI收录期刊，SCI 2005浙江工业大学图书馆信息咨询部编 Elsevier Science 出版社期刊投稿指南 21年影响因子。刊载生物医学和药物疗法，包括与之相关的生化、内科、药学、外科、生物物理、免疫、血液、神经与内分泌等方面的研究论文、评论和札记。Clinica Chimica Acta《临床化学学报》荷兰ISSN: 0009-8981, 1956年创刊，全年24期，Elsevier Science出版社，SCI收录期刊，SCI 2005年影响因子。刊载临床化学和医学生物化学，包括化学、生物化学、免疫化学技术临床应用方面的研究论文、简报、技术札记，以及学术动态报道。European Journal of Radiology《欧洲放射学杂志》爱尔兰ISSN:0720-048X，1981年创刊，全年12期，Elsevier Science出版社，SCI、EI收录期刊，SCI 2005年影响因子，2005年EI收录245篇。刊载研究放射及医学影像技术应用与实践方面的论文、评论、病例报告，涉及X射线、CT、磁共振、超声波及其它先进影像技术和设备。Integrative Medicine《综合医学》美国ISSN:1096-2190，1998年创刊，全年4期，Elsevier Science出版社。主要刊载营养补充剂、植物药、饮食、生活方式等方面的论文ITBM-RBM News《欧洲生物医学技术杂志-新闻》法国ISSN:1297-9570，全年6期，Elsevier Science出版社，2000年前刊名RBM-News，为刊载世界生物医学界学术活动及其新闻报道。综合性医药卫生类核心期刊1、中华医学杂志2、第四军医大学学报3、第三军医大学学报4、第二军医大学学报5、第一军医大学学报（改名为：南方医科大学学报）6、解放军医学杂志7、北京大学学报.医学版8、吉林大学学报.医学版9、四川大学学报.医学版10、中国医学科学院学报11、中国现代医学杂志12、复旦学报.医学版13、华中科技大学学报.医学版14、中山大学学报.医学科学版15、中南大学学报.医学版16、西安交通大学学报.医学版17、浙江大学学报.医学版18、南京医科大学学报.自然科学版19、广东医学20、军事医学科学院院刊21、上海第二医科大学学报（改名为：上海交通大学学报.医学版）22、上海医学23、郑州大学学报.医学版24、江苏医药25、山东大学学报.医学版26、中国医科大学学报27、实用医学杂志28、山东医药29、哈尔滨医科大学学报30、重庆医学31、重庆医科大学学报32、天津医药33、安徽医科大学学报34、苏州大学学报.医学版35、武汉大学学报.医学版36、首都医科大学学报37、医学与哲学.人文社会医学版预防医学、卫生学类核心期刊1、中国公共卫生2、中华医院感染学杂志3、中华流行病学杂志4、卫生研究5、营养学报6、中华预防医学杂志7、中华劳动卫生职业病杂志8、中华医院管理杂志9、环境与健康杂志10、工业卫生与职业病11、中国卫生统计12、中国工业医学杂志13、中国职业医学14、环境与职业医学15、国外医学卫生学分册16、中国卫生经济17、毒理学杂志18、中国计划生育学杂志19、中国食品卫生杂志20、现代预防医学21、中国慢性病预防与控制22、中国妇幼保健23、中国学校卫生24、中国血吸虫病防治杂志25、中国卫生事业管理26、生殖与避孕中国医学类核心期刊1、中草药2、中国中药杂志3、中国中西医结合杂志4、中国针灸5、中成药6、北京中医药大学学报7、中药材8、中国中医基础医学杂志9、中药药理与临床10、中华中医药杂志11、针刺研究12、中药新药与临床药理13、南京中医药大学学报14、中国实验方剂学杂志15、辽宁中医杂志16、时珍国医国药17、中医杂志18、新中医19、中国中西医结合急救杂志20、中国天然药物基础医学类核心期刊1、中国病理生理杂志2、中华微生物和免疫学杂志3、生物医学工程学杂志4、解剖学报5、中国免疫学杂志6、免疫学杂志7、细胞与分子免疫学杂志8、中国临床解剖学杂志9、生理学报10、解剖学杂志11、中国心理卫生杂志12、中国生物医学工程学报13、中国人兽共患病杂志（改名为：中国人兽共患病学报）14、生理科学进展15、中华病理学杂志16、神经解剖学杂志17、现代免疫学18、病毒学报19、中国寄生虫学与寄生虫病杂志20、中国应用生理学杂志21、国外医学.免疫学分册（改名为：国际免疫学杂志）22、中华医学遗传学杂志23、中华实验和临床病毒学杂志24、国外医学.生物医学工程分册（改名为：国际生物医学工程杂志）25、基础医学与临床临床医学类核心期刊1、中国危重病急救医学2、中国医学影像技术3、中国临床康复（改名为：中国组织工程研究与临床康复）4、中华检验医学杂志5、中国超声医学杂志6、中华超声影像学杂志7、中华物理医学与康复杂志8、中华护理杂志9、临床检验杂志10、临床与实验病理学杂志11、中国康复医学杂志12、中国急救医学13、检验医学14、中华急诊医学杂志15、中国全科医学16、中国实用护理杂志17、中国医学影像学杂志18、中国输血杂志19、中国实验诊断学20、中国临床医学影像杂志21、护士进修杂志内科学类核心期刊1、中华结核和呼吸杂志2、中华内科杂志3、中华心血管病杂志4、中华内分泌代谢杂志5、中华血液学杂志6、中华肝脏病杂志7、中华消化杂志8、中国地方病学杂志9、中华肾脏病杂志10、中华老年医学杂志11、中华糖尿病杂志（改名为：中国糖尿病杂志）12、世界华人消化杂志13、中华传染病杂志14、中华风湿病学杂志15、中国实用内科杂志16、中国动脉硬化杂志17、中国循环杂志18、高血压杂志（改名为：中华高血压杂志）19、中国老年病杂志20、临床心血管病杂志21、中国内镜杂志22、肠外与肠内营养23、中国心脏起搏与心电生理杂志24、中华消化内镜杂志

应该是科技核心，中文核心，双核心。听说它还是少有的medline收录的期刊。

细胞与分子免疫学杂志

医学类学术期刊有：

一、中华医学杂志

《中华医学杂志》是1915年创办的双语学术期刊，周刊，中国科学技术协会主管，中华医学会主办。期刊主要反映中国医学最新的科研成果，积极推广医药卫生领域的新技术、新成果，及时交流防病治病的新经验。

期刊主要反映中国医学最新的科研成果，积极推广医药卫生领域的新技术、新成果，及时交流防病治病的新经验。期刊主要读者对象是广大医药卫生人员。

二、第四军医大学学报

《医学争鸣》刊载的内容主要是医学学术方面的各种看法和观点的交锋与辩论。英文刊名为《NEGATIVE》，以期经历“否定—否定之否定—肯定”的螺旋式上升，达到新的认识境界。

反映发明与创新、否定与假说、探索与发现等前沿医学思想，传播医学领域新观点、新方法和新成就，服务医学科学研究和我国卫生事业发展。。

三、第三军医大学学报

《第三军医大学学报》（Journal of Third Military Medical University）是由中国人民解放军陆军军医大学（第三军医大学）主管、主办中文版半月刊。

据2018年4月《第三军医大学学报》编辑部官网显示，《第三军医大学学报》第十届编辑委员会拥有常务委员49人，委员127人，特约编委5人，海外编委12人。据2018年4月中国知网显示，《第三军医大学学报》共出版文献18690篇，总被下载1789818次、总被引87645次。

四、第二军医大学学报

《第二军医大学学报》是经中国人民解放军总政治部、国家新闻出版署批准，由第二军医大学主管、主办的综合性医药卫生类学术刊物。1980年6月创刊。

据2018年9月《第二军医大学学报》官网显示，《第二军医大学学报》编委会拥有委员67人，客座编委13人，2017年度共有368位审稿专家。

五、南方医科大学学报

《南方医科大学学报》(原第一军医大学学报)创刊于1981年，为国内外发行的高级综合性医药卫生期刊。是中国百种杰出学术期刊。

被美国Medline/PubMed、美国化学文摘(CA)、荷兰《医学文摘》（EMBASE）、中国科学引文数据库(CSCD)源期刊、中国科技论文统计源数据库、中文核心期刊要目总览(2011年版，北京大学图书馆)等国内外重要数据库收录。

参考资料来源：

百度百科—中华医学杂志

百度百科—第四军医大学学报

百度百科—第三军医大学学报

百度百科—第二军医大学学报

百度百科—南方医科大学学报