关于膜蛋白的论文研究

如何利用脂质体研究膜蛋白与atp酶为例研究论文：该研究以特征明确的AcrB为原型，提出了一种方便的工作流程，用于对嵌入脂质体中的膜蛋白进行冷冻-EM结构分析。结合优化的蛋白脂质体分离，冷冻样品制备和有效的颗粒选择策略，以的分辨率获得了嵌入脂质体中的AcrB的三维（3D）重建。该研究方法可广泛应用于具有独特可溶域的膜蛋白的冷冻EM分析，为功能受跨膜电化学梯度或膜曲率影响的整体或外围膜蛋白的冷冻EM分析奠定了基础。生物膜包围着拓扑隔离的隔室，包括细胞和细胞器，并为各种完整的和外围的膜蛋白（MP）提供了栖息地。这些物理屏障使生命必需的电化学梯度得以生成和维持，这是由于离子和化学物质在整个不可渗透膜上的不对称分布所致。各种生理过程都取决于这些梯度，例如由质子梯度（质子动力）驱动的三磷酸腺苷（ATP）合成和依赖跨膜电场存在的动作电位。因此，许多膜蛋白，例如电压门控离子通道（VGIC）以及一级和二级活性转运蛋白，都依赖于跨膜电化学梯度来执行其生物学功能。

约30％的编码基因编码的膜蛋白（MPs）在众多生理过程中起着至关重要的作用。膜蛋白是超过FDA批准药物一半的靶标药物。需要在近乎生理条件下对功能性膜蛋白进行高分辨率的结构研究，以提供深入的机理理解并促进药物发现。随着单粒子冷冻显微镜（cryo-EM）的分辨率革命，分离的膜蛋白的结构阐明已取得了快速进展。下一个挑战是保留电化学梯度和膜曲率，以便对膜蛋白进行全面的结构阐明，而膜蛋白的生物学功能依赖于这些化学和物理特性。2020年7月17日，颜宁团队在PNAS 在线发表题为“Cryo-EM analysis of a membrane protein embedded in the liposome”的研究论文，该研究以特征明确的AcrB为原型，提出了一种方便的工作流程，用于对嵌入脂质体中的膜蛋白进行冷冻-EM结构分析。结合优化的蛋白脂质体分离，冷冻样品制备和有效的颗粒选择策略，以的分辨率获得了嵌入脂质体中的AcrB的三维（3D）重建。该研究方法可广泛应用于具有独特可溶域的膜蛋白的冷冻EM分析，为功能受跨膜电化学梯度或膜曲率影响的整体或外围膜蛋白的冷冻EM分析奠定了基础。生物膜包围着拓扑隔离的隔室，包括细胞和细胞器，并为各种完整的和外围的膜蛋白（MP）提供了栖息地。这些物理屏障使生命必需的电化学梯度得以生成和维持，这是由于离子和化学物质在整个不可渗透膜上的不对称分布所致。各种生理过程都取决于这些梯度，例如由质子梯度（质子动力）驱动的三磷酸腺苷（ATP）合成和依赖跨膜电场存在的动作电位。因此，许多膜蛋白，例如电压门控离子通道（VGIC）以及一级和二级活性转运蛋白，都依赖于跨膜电化学梯度来执行其生物学功能。除了驻留在膜的内部或表面之外，膜蛋白与膜之间的相互作用也对细胞寿命产生了深远的影响。例如，许多外周膜蛋白定义了细胞器形成的膜轮廓。FoF1 ATP合酶的二聚化在塑造线粒体cristate中起着重要作用。机械敏感通道通过部分由膜变形施加的机械力控制。当X射线晶体学是确定结构的主要方法时，解析膜蛋白的结构曾经极具挑战性。必须从破裂的膜中纯化出高度均质的膜蛋白，并用精心选择的去污剂取代以结晶。自2013年以来，冷冻电子显微镜（cryo-EM）单颗粒分析（SPA）已成为膜蛋白高分辨率结构解析的主流手段。已应用多种试剂将膜蛋白溶解为单个颗粒以进行分析。除了去污剂微团外，两亲，纳米圆盘和苯乙烯-马来酸脂质颗粒（SMALP）封闭的带有天然膜的纳米圆盘也已用于成功的膜蛋白冷冻-EM结构分析。尽管取得了这些进步，但所有上述膜蛋白分离方法都破坏了膜的拓扑结构，即使在SMALP环绕的带有天然膜片的纳米盘的情况下，也消除了任何现有的电化学梯度和膜曲率。为了保留这些重要特性，使用电子冷冻断层扫描（cryo-ET）的原位结构分析可能是最终的解决方案。然而，当前的技术障碍阻止了使用cryo-ET的高分辨率原位结构测定。另一种替代策略是研究嵌入脂质体中膜蛋白的结构，该结构已广泛用于膜蛋白的功能分析。尽管使用蛋白脂质体进行了广泛的功能表征，但仅有有限的尝试将这种系统用于膜蛋白的结构阐明。在过去的十年中，已经开发了诸如随机球形约束（RSC）之类的方法来研究具有改进SPA策略的蛋白脂质体系统。但是，要在两个报告中执行精确的角度分配或信号减法，目标蛋白脂质体必须是接近完美的球体，这是很难获得的前提条件。两种方法都还需要对原始图像进行额外的预处理步骤。为了将cryo-EM用于嵌入或附着在脂质体上的膜蛋白的结构分析，有必要为膜蛋白掺入，冷冻样品制备和cryo-EM数据处理开发高度可重复且方便的工作流程。为此，研究人员选择了来自大肠杆菌的经过充分研究的耐多药转运蛋白AcrB作为方法开发的原型。质子梯度驱动的AcrB是一种三聚体，分子量约为350 kDa。它是即使在低纯度和低浓度下也最易于结晶的膜蛋白之一。因此，AcrB的结构是在早期确定的。到目前为止，在蛋白质数据库（PDB）中使用X射线晶体学和单颗粒冷冻EM方法测定的AcrB结构超过100种，为结构验证提供了极好的参考。在这项研究中，报告了一种工作流程，该流程具有优化的脂质体分离，低温样品制备，深层二维（2D）分类，用于数据处理。使用该研究的简化方法，获得了分辨率的蛋白脂质体中AcrB的重建。该工作流程可轻松推广到蛋白脂质体中膜蛋白的结构测定中，并为使用蛋白脂质体系统在受控的电化学势或膜曲率存在下膜蛋白的结构分析奠定基础。

1. 王增, 陈尚武, 张文, 马会勤. 2009. 包涵体蛋白的分离纯化和色谱法体外复性研究进展. 中国生物工程杂志 (已接收)2. 孙卉卉; 陈尚武; 李德美; 李曙; 马会勤. 2009. 云南弥勒产区水晶葡萄醪中酵母菌多样性的研究. 云南大学学报（自然科学版）. 2009（1）：103-1083. 李建慧, 马会勤, 陈尚武(2008). 葡萄多酚抑菌效果的研究. 中国食品学报，8(2): 100-1074. 孙卉卉，马会勤，陈尚武(2007).冰冻浓缩对低糖葡萄汁及葡萄酒品质的影响.食品科学.28（5）：86-895. 冯彩平，任发政，陈尚武，于艳琴，高平(2007). 活性氧催促低盐腊肉成熟的初步研究.中国食品学报. 7（3）：116-1216. 于莹; 陈尚武; Herve Remond; 马会勤(2007). 对北京葡萄酒市场和大学生葡萄酒消费群体的调查. 酿酒科技, 154（4）: 126-1307. 郝佳，马会勤，陈尚武(2007). 利用SMART方法快速克隆异黄酮代谢途径多基因的研究.中国生物工程杂志, 27 (6) : 66～708. 郝佳，马会勤，代茹，陈尚武(2007).大豆异黄酮代谢途径在大肠杆菌中的构建及表达. 生物工程学报, 23 (6) : 1022～10289. 张江巍，陈尚武，马会勤(2007). 植物膜蛋白质组学研究技术，中国生物工程杂志, 27（5）：131-13610. 牛天敏, 马会勤, 陈尚武(2007). 大豆查尔酮合成酶(CHS)基因的克隆、表达及其在雪莲提取液中的代谢产物分析.中国生物工程杂志, (2): 58-6311. 刘爱萍, 陈尚武, 苗颖, 任发政(2007). 绿豆酸奶发酵工艺的研究, 食品科学, (2):108-11112. 郝美玲, 陈尚武, 张文, 马会勤(2006). 不同浓度SO_2处理对低度番茄酒中挥发性物质的影响.食品科学, Food Science (5): 147-15212. 车黎猛, 任发政, 陈尚武(2006). 抗后酸化保加利亚乳杆菌的紫外诱变选育[J].食品科学， 27（6）：109-11214. 宋柬, 马会勤, 陈尚武(2006). SOE法对大豆苯丙氨酸解氨酶(PAL)基因拼接的应用研究。大豆科学 (3):228-23315. 宋柬, 马会勤, 郝佳, 任发政, 陈尚武(2006).大豆苯丙氨酸解氨酶(PAL)在大肠杆菌中的重组表达及活性鉴定. 食品科学, (7): 29-3516. 郝美玲，陈尚武，张文，马会勤(2006). 不同浓度SO2处理对低度番茄酒中挥发性物质的影响. 食品科学，（27）: 147-15217. 冯彩平, 任发政, 陈尚武 2006. 降低传统腊肉中食盐含量对其贮藏稳定性影响的研究. 食品科技, Food Science and Technology.(5): 42-4418. 罗红霞, 郭慧媛, 林少华, 陈尚武, 任发政(2005). 鲁西黄牛乳铁蛋白N-末端多肽基因的表达与活性检测[J]. 中国乳品工业, 33 (12): 4-719. 郑立红,任发政, 陈尚武(2005). 猪血亚硝基血红蛋白坚牢度的研究[J].中国食品学报, 5 (4): 5-1020. 郑立红, 陈尚武, 任发政(2005). 猪血亚硝基血红蛋白在肉品中的应用研究[J].食品科学, 26 (12): 257-26021. 陈尚武，张维一，李学文(2000).预合成抗菌物质抑制甜瓜的两种潜伏侵染性病害. 植物病理学报，18922. 陈尚武，张大鹏 (1999). 脱落酸、Fluridone 调控苹果果实成熟。植物生理学报, 26 (2): 123-12923. 宋国庆，肖兴国，李绍华，陈尚武, 甘孟侯(1999). 鸡马立克氏病病毒(MDV) B抗原基因在烟草中的初步表达。生物工程技术学报，8(2): 143-146

蛋白酶的研究论文

植物保护专业本科毕业论文（设计）开题报告

紧张又充实的大学生活即将结束，大学生们马上就要开始最难熬的毕业设计阶段，而我们做毕业设计之前要先写好开题报告，快来参考开题报告是怎么写的吧！以下是我整理的植物保护专业本科毕业论文（设计）开题报告，欢迎大家借鉴与参考，希望对大家有所帮助。

毕业论文题目：

菌寄生真菌纤细齿梗孢蛋白酶基因的克隆与表达

姓名： xx 学号： xxxx

年级： xxx 专业：植物保护

指导教师：姓名 xxx 职称教授

学科植物病理

山东农业大学教务处

20XX年x月x日

一、选题依据（拟开展研究项目的研究目的、意义）

菌寄生(Mycoparasitism)是发生在菌寄生真菌与寄主真菌之间的一种寄生方式，是自然界普遍存在的一种真菌与真菌之间的相互作用。一直以来，生物间相互作用及信号传导的分子机制，是当今生命科学研究的热门。利用菌寄生真菌与寄主真菌作为研究的模式系统来揭示生物相互之间的相互作用机制有重要理论和实践意义。李多川(Li,1996)先生发现纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)和串珠镰刀菌(Fusarium moniliforme)的菌寄生关系以来，我们实验室试图通过研究纤细齿梗孢和串珠镰刀菌，来建立菌寄生真菌与寄主真菌相互作用机制研究的模式系统，从而揭示菌寄生真菌与寄主真菌之间相互作用的分子机制。纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)是串珠镰刀菌的一种重寄生真菌，该菌是一种接触性活体重寄生菌，离体试验发现其分生孢子只有在串珠镰刀菌细胞壁提取物刺激下才能萌发。这说明两者之间的重寄生关系是建立在二者识别与互作的分子机制上的(Li,2004)。在纤细齿梗孢和串珠镰刀菌相互作用过程中，几丁质酶、蛋白酶等细胞壁裂解酶可能起到重要作用。其中，蛋白酶在木霉属菌寄生真菌中的功能已经得到初步证明，而纤细齿梗孢的蛋白酶的研究还未见报道。因此，克隆纤细齿梗孢蛋白酶编码基因对于从分子水平上研究重寄生真菌和寄主识别和互作机制有着重要的意义。

二、文献综述内容(在充分收集研究主题相关资料的基础上，分析国内外研究现状，提出问题，找到研究主题的切入点，附主要参考文献)

纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)是李多川教授分离得到的一种活体营养接触型菌寄生真菌[1~3]，其寄主包括Fusarium moniliformeAlternaria alternata等。近年来，我们实验室一直在努力以其为基础研究菌寄生真菌与寄主真菌之间的相互作用的分子机制。经过多年的研究，人们渐渐认识到真菌细胞壁蛋白在细胞与外界的相互作用过程中扮演着重要的角色。细胞壁蛋白研究已经成为生物间相互识别机制研究的热点。鉴于以上原因，我们实验室成功分离纯化了纤细齿梗孢的寄主之一Alternaria alternata菌丝细胞壁上的一种特异性糖蛋白——凝集素，并初步证明其在和孢子吸附过程中起到识别因子的作用[4]。近年来，菌寄生真菌细胞壁裂解蛋白酶在菌寄生过程中的作用被人们逐渐重视起来。克隆和表达菌寄生真菌的蛋白酶编码基因变得很有意义。本研究试图以菌寄生真菌纤细齿梗孢(Olpitrichumtenellum)作为研究材料克隆了其蛋白酶基因。根据氨基酸的保守序列设计兼并引物，然后采用RT-PCR和RACE是一个较为快速、简单和高效的方法。本实验根据同源保守序列设计兼并引物，通过RT-PCR及RACE-PCR的方法，克隆了蛋白酶的编码基因的全长cDNA序列，并对该基因进行了序列分析，为后续试验打下了基础。

由于Olpitrichum tenellum在离开寄主的人工培养基中很难生长，纯化其蛋白酶变得非常困难。因此，我们需要使用外源蛋白表达系统得到蛋白，进一步研究其性质，从而搞清楚其在重寄生过程中的作用。在过去的几十年间，随着DNA重组技术的不断发展，通过构建遗传工程菌株，人们可以较容易地使各种各样的天然酶的基因在微生物系统中高效表达，从而在很大程度上摆脱对天然酶源的依赖。

基因工程的表达系统有原核表达系统和真核表达系统两大类。在原核表达系统中，大肠杆菌表达系统是目前了解最深入，实际应用最为广泛的表达系统。与其他表达系统相比，大肠杆菌表达系统具有遗传背景清楚、目标基因表达水平高、培养周期短、抗污染能力强等特点。在基因表达技术中占有重要的地位，是分子生物学研究和生物技术产业化发展进程中的重要工具[5]。

Pichia pastoris基因表达系统经过十几年发展，已基本成为较完善的外源基因表达系统，具有易于高密度发酵，表达基因在宿主基因组中稳定整合，能使产物有效分泌并适当糖基化，培养方便经济等特点。利用强效可调控启动子AOX1，已高效表达了HBsAg、TNF、EGF、破伤风毒素C片段、基因工程抗体等多种外源基因[6]，证实该系统是高效、实用、简便，能提高表达量并保持产物生物学活性的外源基因表达系统。表达系统在生物工程领域将发挥越来越重要的作用，促进更多外源基因在该系统的高效表达，提供更为广泛的基因工程产品[7]。

我们已经分离到蛋白酶的编码基因，本研究中将该基因的去掉信号肽序列的正确阅读框融合于原核表达载体pET-22b(+)和毕赤酵母表达载体pPIC9K上，分别转化 BL21及Pichia pastoris GSxx5，以期在这些菌株中有效表达该基因的编码产物，从而为以后功能研究打下基础。

1 李多川.1998.菌寄生真菌分子生物学研究进展.吉林农业大学学报,20：37~65.

2 21.李多川.1998.菌寄生真菌分子生物学研究进展.微生物学通报，25：345~347.

3 .李多川，沈崇尧.1997.菌寄生菌物与寄主菌物相互作用的研究进展.西北农业学报，6：94~98.

4 张成省，李多川，孔凡玉. alternata菌丝细胞壁凝集素的纯化与特性研究.植物病理学报，35(2)：141~147.

5 .xx.何诚，朱运松.1998.甲醇营养型酵母表达系统的研究进展.生物工程进展,18：7~xx.

6 彭毅，杨希才，康良仪.2000.影响甲醇酵母外源蛋白表达的因素.生物技术通报，4：33~36.

7 韩雪清，刘湘涛，尹双.2003.毕赤酵母表达系统.微生物学杂志，3：35~40.

三、研究方案(主要研究内容、目标，研究方法、进度)：

1、研究内容：

本课题选择纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)做为研究对象，通过RT-PCR及RACE技术分离克隆了其丝氨酸蛋白酶基因，并进行原核及真核表达，并对其的性质进行了研究，为进一步的研究工作打下基础。

2、研究的目标：

克隆了纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)的丝氨酸蛋白酶基因，进行原核及真核表达，并对其的性质进行了研究。

3、研究方法：

将纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)接种到LB培养基上，培养14个小时后，收集菌丝，然后采用总Trizol法提取RNA。再从GenBank数据库中搜索到大量的蛋白酶氨基酸序列，并根据同源性进行分类，分别设计兼并引物。再通过RT-PCR、3’-RACE、5’-RACE获得全长cDNA、DNA克隆，并将其连接到载体上，然后采用电击法将将重组质粒转入到全长cDNA、DNA克隆中，通过透析纯化蛋白酶，最后研究其特性。

四、研究进度：

20xx年5月23日~20xx年5月29日整理收集资料，并跟着研究生学习基本实验技术。

20xx年5月30日~20xx年6月18日提取RNA，设计引物、全长cDNA、DNA克隆。

20xx年6月19日~20xx年7月15日转化大肠杆菌、毕赤酵母表达，获得纯纯产物，并研究其特性。

20xx年3月~20xx年6月对实验结果不理想的实验重做，整理实验数据，完成毕业论文，并准备毕业答辩。

五、技术路线：

收集菌丝

总RNA提取

同源序列设计引物

特性研究

RT-PCR、

3’-RACE、5’-RACE

纯化表达产物

全长cDNA、DNA克隆转化大肠杆菌、毕赤酵母

四、进程计划(各研究环节的时间安排、实施进度、完成程度)

20xx年5月23日~20xx年5月29日整理收集资料，并跟着研究生学习基本实验技术。完成实验的1%。

20xx年5月30日~20xx年6月18日提取RNA，设计引物、全长cDNA、DNA克隆。完成实验的50%。

20xx年6月19日~20xx年7月15日转化大肠杆菌、毕赤酵母表达，获得纯纯产物，并研究其特性。完成实验的95%。

20xx年3月~20xx年6月对实验结果不理想的实验重做，整理实验数据，完成毕业论文，并准备毕业答辩。完成100%。

五、导师对文献综述的评语

签字：

20xx年xx月xx日

六、专业意见

专业主任签字：

20xx 年月日

七、学院意见

学院(章)：负责人签字：

20xx年xx月xx日

摘要：

针对目前浙江农林大学植物保护研究法实验教学方法、内容及手段等方面存在的一系列问题，提出了相关改革对策：优化实验课程内容，整合实验模块，学生自行设计实验方案等教学方法和手段的改革，以及课程考核方式和时间安排的调整，旨在培养学生的科研兴趣及创新能力。

关键词：

植物保护论文

目前，国内外很多农业院校的植物保护专业均开设了昆虫研究法和植病研究法课程。为优化本科培养方案，浙江农林大学通过调整教学大纲，将植病研究法、昆虫研究法和农药研究法合并成一门植物保护研究法课程。植物保护研究法是植物保护专业重要的专业限选课程之一，是植物保护研究的重要组成部分，也是培养和提高学生专业实验技能和学习兴趣的重要课程，是一门专业性、实践性很强的实验学科。通过这门课程的教学，能使学生掌握植物保护研究的基本方法及基本原理，培养植物保护研究常规操作能力，以及查阅资料、设计实验方案和实际操作能力，提高学生的逻辑思维、整理资料、总结归纳和论文撰写的能力。笔者分析了浙江农林大学植物保护研究法实验教学中存在的问题，提出教学改革内容，并总结了改革成效。

1.实验教学存在的问题

传统实验教学的弊端传统实验教学的主要特征是“灌输式”“填鸭式”，学生在2个小时的实验过程中就是简单地按照实验指导书和实验大纲中的实验方法和步骤依葫芦画瓢，实验完成后，又按照统一的模式填写实验报告。在整个实验过程中，学生无需独立思考和分析，更谈不上发挥创新能力了。因此，很难让学生对实验产生兴趣，培养学生的创造性思维就更无从谈起了。虽然这种传统实验模式简明、清晰，有利于学生对相关结论的认可、理解和记忆，也有利于教师对整个教学过程的控制，教师和学生很轻松愉快地就能完成实验教学任务。学生走上工作岗位后，传统实验教学的弊端立即显现。学生缺乏设计实验的能力，在实验过程中缺乏发现问题、分析问题和解决问题的能力，实验后缺乏正确分析实验结果的能力。因此，传统的实验教学模式急需改革。

实验教学内容系统性不强植物保护研究法是植物保护专业本科学生的一门专业课程，其涉及的内容有昆虫研究法、植病研究法和农药研究法。在以往的实验课程中，只是简单地把这3门课的实验合在一起上，并没有把内容紧密联系在一起，如昆虫实验时，指导教师一般是教授昆虫学科的教师;而在进行植病实验时，则由讲授植病学科的教师指导。这样的实验模式难以使植物病虫害系统联系起来，学生学习专业知识不够系统和深入，容易造成理解上的片面性和孤立性，不利于掌握该专业的系统知识和技能。

实验考核不科学以往实验课程成绩评定的主要依据是实验报告，而每次实验课结束后，学生递交的实验报告只是把实验大纲(包括实验口的、原理、仪器与试剂、内容及方法)原文不动地抄一遍，实验结果更是千篇一律，这样实验就变成了预演过程，学生在实验中缺乏思考，不利于培养发现问题、提出问题、分析问题和解决问题的能力，背离了实验课教学的初衷。同时，还会导致每位学生的实验成绩差异微乎其微，不具有良好的区分度。

2.教学改革内容

重视教学环节在以往的实验课程中，实验教学所需要的实验用具和材料大多数都是实验教辅人员提前准备，导致他们的工作量非常大。让学生参与实验材料的准备和管理，一方面提高了教辅人员的工作效率;另一方面可以让学生对实验过程有全面了解，获得整个科研实践过程的训练，从而养成好的实验习惯，在未来的科研工作中做到计划周密、有条不紊地安排和实施实验计划。同时，在实验教学过程中，必须教育学生认真操作、仔细观察、实事求是地记录实验结果，并对实验进行科学分析。一日_发现弄虚作假的学生，一定要严厉批评，同时帮助他们分析失败的原因，找出解决的方法，有条件的情况下，让其重新做实验，让学生充分意识到科学研究允许失败，但是不能有半l从虚假。提高学生的实践能力实践教学是培养和训练学生实践操作能力，独立分析问题、解决问题能力的重要手段，尤其对于学生创新能力的培养，具有其独特的地位和作用。该项口分别以某种农作物病虫害为主轴展开一系列的实践性实验教学，要求学生自主设计实验和执行各项实验内容，指导教师负责答疑和提供技术帮助。学生通过自己分组、调查、取样、鉴定、查阅资料、讨论制订实验方案和动手实验等一系列步骤，不仅可以很好地将课堂上所学的理论知识与实践相结合，而且还有助于提高自学能力、实践能力和团队协作能力，进一步培养科学思维和创新能力。优化实验教学内容结构将整个实验课程设置成一个综合性的大实验：分别以某个农作物上的病虫害发生规律及防治措施贯穿整个课程。将口前昆虫研究法的昆虫标本的采集与制作、昆虫人工饲养技术、昆虫生态学研究方法、昆虫生理生化研究方法、昆虫分子生物学研究方法和害虫综合治理研究方法5个实验和植病研究法的植物病害调查、植物病原菌分离与鉴定技术、植物病原菌分子生物学鉴定技术、植物病原真菌遗传转化技术和植物病害综合治理技术5个实验合并成1个综合性大实验，将植物病虫害研究以故事的形式紧密地整合在一起，让学生将课堂知识与田间实际应用有机地联系在一起，加深对理论知识的理解，提高学习兴趣。整个实验就是以具体的作物病虫害发生为时间轴，具有很强的连贯性和系统性，学生只有认真完成每一个实验，才能很好地保证后续实验的顺利进行，有助于增强学生的责任感和团队合作精神，同时也改变了学生实验报告千篇一律的`现象。改革成绩评定方式实验课成绩一方面是对学生实验完成好坏的肯定，另一方面也对学生起到了一定的督促作用。为了做到对学生的全面评价，实验成绩除实验报告和考勤成绩外，应将实验过程中学生的学习主动性、动手操作能力、实验结果记录规范性量化纳入成绩考核。在实验过程中，教师应主动观察并记录每个学生的实际动手、操作能力，量化后按一定比例记入总成绩，对那些既有独立操作能力，又有创新意识的学生，适当给予创新学分。实验过程中，学生是否遵守实验室规则、是否具有团队合作精神，实验结束后，学生是否打扫卫生、是否清洗实验器材等，这些看似小问题，但也体现着一个人的品质和素养，做得好的学生也可以适当加分。

3.改革成效

提高学生的专业技能及其对专业知识重要性的认识学生能在同一时间完成植病研究法、昆虫研究法和农药研究法3门实验课程，体现了实验课程很强的连贯性和系统性。学生在实践过程中将这3门课程的相关内容紧密、有机地联系起来，对植物病虫害防治有了更深入的认识，同时也提高了学生的专业技能及其对专业知识重要性的认识。在实验的过程中，强调把学生的动手能力放在首位，让学生更多地参与到实验中，切身体会到所学专业的意义。

培养学生发现、提出、分析和解决问题的能力植物保护研究法实验教学模式具有系统化和整体化特点，同时涉及昆虫研究法、植病研究法、农药研究法等相关学科课程。在实验过程中，学生在对病虫害的认知及其防治等问题的处理上始终处于主体地位，在独立思考、查找资料、咨询专业教师、综合分析之后，拟定出具体的处理方案，能够融会贯通地掌握植物保护学科的理论知识和基本实践技能。

提高指导教师的业务水平新的实验教学模式综合运用了3门相关课程的理论知识，加强了课程的综合实践环节，因此指导教师自身的知识面、操作技术、实践应用和协调能力都需要提升。所以，这种实验教学模式促使教师在教学过程中同学生一起不断学习，丰富专业理论知识，完善专业实践体系，提高发现、提出、分析和解决问题的能力，了解和掌握学科及相关学科的发展动态、研究的新进展、出现的新技术，从而提高了指导教师的业务水平。

4.结语

植物保护研究法在植物保护专业2013级和2014级本科生实验课程教学中进行了实践，通过问卷调查，95%的学生认为在实验过程中有较多的动手机会，激发了自己对实验的兴趣，提高了自己分析和解决问题的能力。因此，认为该教学方法可以发挥学生的主观能动性、拓展学生的科研思路、激发学生的创新创造力和提高学生的独立应用实践能力，具有良好的教学效果。

9、论味精工自动化生产艺选择这个交叉性的，比较方便，当然你要懂具体工艺，看书哈。搜索下最新的自控设计产品、方案，抄就可以了；答辩时搞发酵的老师不一定懂。

酸性蛋白酶是一种能在酸性环境下水解蛋白质的酶类，其最适作用pH值为。由于酸性蛋白酶具有较好的耐酸性，因此被广泛地应用于食品、医药、轻工、皮革工艺以及饲料加工工业中。目前用于工业化生产的酸性蛋白酶大多为霉菌酸性蛋白酶，此类酶的最适作用pH值为左右，当pH值升高时，酸性蛋白酶的酶活会明显降低，且此类酶不耐热，当温度达到50℃以上时很不稳定，从而限制了酸性蛋白酶的应用范围。因此，本研究以开发耐温偏酸性蛋白酶为目标，进行了以下几方面的研究： (1)偏酸性蛋白酶产生菌的分离筛选。 (2)偏酸性蛋白酶粗酶酶学性质的研究。 (3)偏酸性蛋白酶固体发酵条件的优化。 (4)偏酸性蛋白酶产生菌P-1007的初步鉴定。 (5)偏酸性蛋白酶在啤酒澄清中的应用。本论文主要研究结果和结论如下： (1)用常规土壤分离方法，从土壤样品中筛选到一株产偏酸性蛋白酶的菌株，命名为P-1007。 (2)通过单因素发酵条件实验和正交实验的方法得到最佳固体发酵条件为：麦麸15g，黄豆粉8％，葡萄糖3％，NaH2PO41％，％，水35ml，最佳起始，最适发酵温度为40℃。在此条件下所产酶活可达3700u/g，比原始菌株发酵酶活提高了将近2倍，且产酶稳定性较好。 (3)菌株P-1007所产的偏酸性蛋白酶的最适作用pH值为，最适作用温度为50℃。酶的pH稳定性和耐温性较好，50℃、条件下保温8h后剩余酶活可达83％以上，、50℃条件下保温2h后剩余酶活仍在70％以上。Mn2+、Cu2+对偏酸性蛋白酶有明显的激活作用，其它金属离子则对该酶有不同程度的抑制作用。与目前所得到的酸性蛋白酶相比较，偏酸性蛋白酶具有较高的作用pH值和较好的耐温性。 (3)从菌株P-1007菌落形态、显微观察以及区序列分析可以看出菌株P-1007可能属于烟曲霉。 (4)从酶学性质上可以看出，菌株P-1007所产的偏酸性蛋白酶的作用条件满足于啤酒澄清工艺的要求，因此本实验进行了偏酸性蛋白酶在啤酒澄清中的应用研究以及该酶与酿造复合酶和啤酒用中性蛋白酶作用效果的比较。研究结果表明：经偏酸性蛋白酶作用后，麦汁和发酵液中酪氨酸含量、透光率、总氮量、可凝固性氮含量都有了明显的提高。麦汁中a-氨基氮含量也增加了，说明偏酸性蛋白酶将凝固性蛋白质水解成了分子量较小的a-氨基氮，为啤酒酵母的生长繁殖提供了氮源。同时发酵液中的a-氨基氮含量却降低了，分析原因为发酵阶段中酵母利用a-氨基氮的速度比偏酸性蛋白酶降解蛋白质的速度快。麦汁和发酵液的pH值都无太大变化，因此不会影响啤酒酵母的生长和繁殖。在与酿造复合酶和啤酒用中性蛋白酶作用效果的比较中发现，三种酶的作用效果大致相同，但从最适作用条件来看，偏酸性蛋白酶比另两种蛋白酶更适合于啤酒澄清工艺。以上研究结果表明，本课题筛选到的菌株P-1007所产偏酸性蛋白酶的作用条件特别适合于啤酒澄清工艺，因此在啤酒工业中有较好的应用前景。关键字:烟曲霉,偏酸性蛋白酶,发酵条件优化,酶学性质,rDNA-ITS区序列分析,啤酒澄清

蛋白质研究论文

随着分子生物学的飞速发展，最为世人瞩目的人类基因组计划即将提前完成。人类将向了解自己的生命奥秘这一目标迈进一大步。但是，由于基因是遗传信息的携带者，而生命活动的执行者却是蛋白质，即基因的表达产物。因此，即使得到人类全部基因序列，也只是解决了遗传信息库的问题。人类揭示整个生命活动的规律，就必须研究基因的物产——蛋白质。相对于基因组而言，后者称为蛋白质组。1 蛋白质组概述及其相关研究技术和方法鉴于基因组研究的局限性，1994年澳大利亚Macquaie 大学的Wilkins和Williams等在意大利的一次科学会议上首次提出了蛋白质组（Proteome）这个概念。定义为“蛋白质组指的是一个基因组所表达的蛋白质”，即“PROTEOME”是由蛋白质的”PROTE”和基因组的“OME”字母拼接而成[1].这个新术语很快得到了国际生物学界的认可。目前对蛋白质组的分析工作大两个方面。一方面，通过二维胶电泳等技术得到正常生理条件下的机体、组织或细胞的全部蛋白质的图谱，相关数据将作为待测机体、组织或细胞的二维参考图谱和数据库。另一方面是比较分析在变化了生理条件下蛋白质组所发生的变化。目前蛋白质组研究技术常用以下手段：（1）用于蛋白质分离技术方面的如双向凝胶电泳（2-DE）、双向“高效”柱层析等。（2）用于蛋白质鉴定的技术如质谱技术、凝胶图像分析、蛋白质和多肽的N端、C端测序及氨基酸组成分析等。（3）用于蛋白质相互作用及作用方式研究的双杂交系统。（4）用于分析大量数据的生物工程信息学等[2].。2 蛋白质组在医学研究中的现状和前景自蛋白质组概念提出以来，已发表相关论文及论著数篇。并于是1997年举行了第一届国际性的“蛋白质组学”会议。同年出版式了第一部蛋白质组学的专著。目前蛋白质组在医学方面的研究重点在于对人类疾病的发病机制、早期诊断及治疗，对致病微生物的致病机理、耐药性及发现新的抗生素为主。现将这两方面的进展情况综述如下。人类疾病的蛋白质组研究直肠癌直肠癌的发生是因多个基因的突变，导致肿瘤抑制基因失能所致，但确切机制仍不清楚。为探讨其发病机制，Sanchez等对15例结肠癌和13例正常人的结肠上皮进行2-DE，每个多肽模式用Melanie I12-DE分析软件进行分析。据此建立了包括882和861个斑点的结肠癌及正常人结肠粘膜的标准胶图。结果发现在分子量为13kD和pI值为处的蛋白质仅出现在结肠癌的组织中。15例结肠癌患者中13/蛋白有13例（87%）。此外，发现13/蛋白不仅在中度、低度分化的结肠癌及有24年病史的溃疡性结肠炎过度表达，而且出现在7例分化程度不同的腺瘤的癌前病灶。但对照组则极少出现。这表明该蛋白的出现对检测早期直肠癌有很强提示。通过对该蛋白HPLC及测序等分析后，发现与钙粒蛋白B（calgranulin B）及钙卫蛋白（calprotectin）有很大关系[3]。肝癌醛糖还原酶（aldose reductase, ）是醛酮还原酶超家族中的一个成员。它催化葡萄糖还原为山梨醇，通过减少内源或外源性代谢产物而起到解毒作用。Peter R等在用N-甲基-N-亚基脲诱导（N-methly-N-nitrosourea-induced）的小鼠肝癌中，用2-DE及氨基酸微型测序可分辩出一种肝癌诱导的醛糖还原酶样的蛋白质（35Kd/）。而在小鼠的晶状体中，则发现一种醛糖还原的同工酶，该酶与已知的小鼠醛糖还原酶有98%的同源性，而与肝癌诱导的醛糖还原酶样的蛋白质截然不同。这表明两种蛋白质是由相关的两条基因编码，在小鼠不同的器官中表达不同。肝癌诱导的醛糖还原酶蛋白质优先表达在肝癌及胎肝中，它们均受到纤维细胞生长因子的刺激，但随小鼠鼠器官的生理及病理环境而表现不同的形式。经免疫组化证实，肝癌诱导的醛糖还原酶样的蛋白质在成人肝脏中不表达，但在小鼠的肝癌中又重新表达。同时发现该蛋白在癌前病变及肝癌中表达强烈，而在肝脏周围的正常组织不表达[4]。表明该蛋白可能与肝癌的发病有很大关系。扩张型心肌病扩张型心肌病是一种严重的可导致心衰的心脏病，大多数患者需行心脏移植术。目前其发病机理不明，推测可能为多种因素所致。1990年已有两组人员进行该病的蛋白质组分析。其后不久心肌的2-DE数据库建成，并进入国际互联网络。Knecht等采用2-DE取得了3300个心肌蛋白条带，通过氨基酸序列分析、Edman降解法及基质辅助的激光解吸离子化质谱（MALDI-MS）等分析了其中150条。经活检及术后病理证实，有12条为扩张性心肌病特有的蛋白。但具体资料尚在进一步分析之中[5]。Arnott D等对新福林诱导的肥大心肌细胞进行蛋白质组分析，同对照相比亦发现有8种蛋白质的表达水平发现了变化[6]。膀胱癌 IFN-γ除抗病毒外，还有一项重要的功能即抗肿瘤作用。目前其抗肿瘤作用机制不明。有资料表明，IFN-γ可能通过在相关细胞中增强或抑制有关基因而发挥抗肿瘤作用。重组IFN-γ和IL-2已开始应用于膀胱癌的治疗中。为探明其作用机制，George等将四种分级程度不同的人膀胱癌新鲜活检标本，用50U/ml IFN-γ作用20个小时后，采用2-DE、微型序列分析、等电聚集、蛋白质印迹等方法，对标本进行蛋白质组分析。结果表明有五种蛋白质（色按酸-tRNA合成酶、IFN-γ诱导的r3，超氧化物歧化酶及两种分子量为和的未知蛋白）的表达量增加了75%，而醛糖还原酶表达量则下降。为研究IFN-γ对治疗膀胱癌的作用机制提供了一种方法[7]。此外，由于缺乏对膀胱鳞状细胞癌客观可靠的组织学分级标准，因而很其进行早期诊断。为此，Morten等对150例膀胱癌进行双盲法2-DE，并结合了蛋白质印迹法、微型序列分析及质谱等技术，建立了新鲜膀胱癌标本的2-DE数据库，且发现角蛋白10、14及银屑病相关的脂肪酸结合蛋白（psoriasis-associated fatty acid-binding protein,PA-FABP）等可以作为膀胱癌不同分化程度的标记物[8]。为早期诊断提供了一种新的手段。[ 本帖最后由 snow_white 于 2007-7-20 16:32 编辑 ]查看完整版本请点击这里：蛋白质组学研究〔综述〕05我也来说两句查看全部回复最新回复snow_white (2007-7-20 16:31:50) 其它目前人的各种组织、器官、细胞乃至各种细胞器已被广泛研究。以期为疾病诊治及了解发病机制提供新的手段。在一项利用蛋白质组研究技术进行的酒精对人体毒性的研究中发现，乙醇会改变血清蛋白糖基化作用，导致许多糖蛋白的糖基缺乏，如转铁蛋白[9]。Jagathpala等对免疫所致的不孕症的男性精子蛋白质进行蛋白质组分析，发现了导致不孕症的6种自体及异体抗精子抗体[10]。在对肾癌的研究中，发现有4种蛋白质存在于正常肾组织而在肾癌细胞中缺失。其中两种分别是辅酶Q蛋白色素还原酶和线粒体乏醌氧化还原复合物I。这提示线粒体功能低下可能在肿瘤发生过程中起重要作用[11]。Ekkehard Brockstedt等利用2-DE、Edman微型序列法、MALDI-MS等对人BL60-2伯基特淋巴瘤细胞系进行了细胞凋亡机制的研究，结果发现RNA聚合酶转录因子3a（BTF3a）和/或BTF3b与抗IgM抗体介导（anti-IgM antibody-mediated）的细胞凋亡有很大关系[12]。致病微生物的蛋白质组研究近年来，WHO越来越重视感染性疾病对人类健康的影响。除结核、多重耐药链球菌感染及机会致病菌外，出现了一些新的感染因素如HIV、博氏疏螺旋体及埃博拉病毒等。因此这些致病微生物的蛋白质组分析，对于了解其毒性因子、抗原及疫苗的制备非常重要，此外对疾病的诊断、治疗和预防也同样重要。现已获得18种微生物的全部基因组序列，另有60余种的基因序列正在研究之中。这些工作的开展为蛋白质组的研究提供了有利条件。检测博氏疏螺旋体与免疫有关的蛋白质博氏疏螺旋体（Borrelia burgdorferi）是莱姆病的主要病因，表现为环形红斑及流感样症状，大约有50%的未治患者发展为神经系统及关节系统疾病。该螺旋体可分为3种类型： sensu stricto,, 。其诊断需依靠血清学检查，但存在敏感性及特异性变化的缺点。为获得更可靠的血清学检查，Peter等用2-DE从得到217个银染的蛋白斑点。从中国兔多克隆抗体鉴别出6个已知的讥原。将不同临床表现莱姆病患者的血浆用 2-DE图杂交。用抗IgM及抗IgG作为第二抗体，在10例有游走性红斑的患者血浆中，检测出60~80个抗原。同时发现在有关节炎的患者血浆中，包含有抗15种抗原的IgM抗体及抗76种不同抗原的IgG抗体。而晚期有神经系统症状的患者血浆中，则包含有抗33种抗原的IgM抗体及抗76种抗原的IgG抗体。上述3种类型患者的血浆中均包含有抗6种已知抗原的抗体，且被SDSPAGE杂交所证实。这些抗原均是潜在的具有特异性诊断的标志物。弓形体抗原的检测弓形体病是由鼠弓形体虫引起的寄生虫病。全球人口大约有30%是携带者，在欧洲是最常见的寄生虫病。如果妊娠者感染，该虫可通过胎盘引起胎儿的感染。且随着妊娠时间的增加，感染的机会也增加。大约50%母体的感染可引起新生儿先天性疾病。因此诊断及治疗越早越好。目前要依靠血清学及PCR，而单独采用血清学如用IgG，IgM,或IgA抗体对疾病活动期敏感性不够，尤其对于妊娠或有免疫抑制的患者。潜在感染常发生在有免疫抑制的患者中。对AIDS患者来说，鼠弓形体虫是最主要的致命性脑损伤的病因。因此，能否早期诊断对治疗来说尤为关键。Jungblut等将鼠弓形体虫RH株在人羊膜细胞系FL521中传代后，用2-DE得到300个银染的斑点。再将其与以下3种患者的血浆进行免疫杂交：（1）患有急性弓形体病的妊娠女性（n=11）; (2)患急性弓形体病的非妊娠者（n=6）(3)有潜在感染的患者（n=9）。结果有9个斑点对各阶段的弓形体感染均反应，这9种斑点被用来当作弓形体感染的标记。其中7种标记可用作区别疾病的不同阶段。但对区别急性期与潜在期仍需联合应用多种抗原[4]。白色念珠菌芽管结构是白色念珠菌向菌丝体转变的早期阶段，该结构能增强白色念珠菌对宿主细胞的粘附力、穿透力及破坏性。目前通过蛋白质组分析方法如2-DE、质谱等已检测出在芽管结构所表达的一组特异蛋白如DNA结合蛋白等，为致病提高了一些参考指标[13]。Monkt等发现，在conA反应后的SDS-PAGE图中，在芽管结构的膜上，分子量为80kD复合糖处，出现很淡的考马斯亮蓝染色，而在孢子时则未出现。提示膜的整合、出现未与ConA结合的80kD复合糖可能与芽管结构的发生及生长有关。粘附素（adhesin）是白色念珠菌表面的组成部分，介导其与宿主的结合，是侵入宿主所需的重要蛋白，包含多种成分如白色念珠菌胞壁上的疏水蛋白等，通过增强菌株的粘附性而在其致病机制中发挥一定作用。但由于这些蛋白有很大同源性、多种糖基化作用及与胞壁或胞浆膜上其它成分形成共价结合，故提纯及分析很难。现通过等电聚集、2-DE及洗脱电泳等方法，可使这些蛋白得到很好的纯化、分离及分析[14]。抗真菌药通过改变真菌胞壁组分的生物合成和重组胞壁相关酶的结合位置而发挥作用。抗真菌药远少于抗细菌药就在于对真菌细胞壁蛋白分析了解太少。现在临床上用于抗真菌的药物多为咪唑类（咪康唑、酮康唑）及三唑类（氟康唑、伊曲康唑），但有很多患者出现耐药现象。在白色念珠菌中，目前发现至少有8种CDR家族的基因可产生耐药株的表现型。且有55种基因分别表达ABC及MFS蛋白（菌内药物输出泵）[]。但这些基因、蛋白与耐药之间的关系仍未清楚。应用2-DE、免疫检测蛋白质等技术，对这些蛋白在菌内的表达量进行分析，发现Cdrlp及CaMdrlp蛋白在耐咪唑类菌株中过量表达。在对咪唑类每感及去除CDR1基因的白色念珠菌株CA114中，提取并检测耐氟康唑突变子（FL3）的表达。结果发现FL3对氟康唑的耐是去除CDR1的基因的白色念珠菌株CA114的500倍，是CA114的250倍。且CDR1 mRNA在FL3的量是Ca114的8倍[17]。同时，对敏感性及耐药株蛋白质的2-DE图分析发现，在耐中有25种蛋白质增加，有76种蛋白质减少。推测白色念株菌是通过改变染色体数目或染色体重组来调节基因的表达量，进而产生耐药性[18]。随着蛋白质组技术成熟完善，将对真菌壁及耐药基因分泌的各种蛋白组成分析带来重大突破，并对抗真菌的研制提供重要资料。虽然蛋白质组学还处在一个初期发展研段，但我们相信随着其不断地深入发展，蛋白质组（学）研究在提示诸如生长、发育和代谢调控等生命活动的规律上将会有所突破，对探讨重大疾病的机理、疾病诊断、疾病防治和新药开发将提供重要的理论基础。[ 本帖最后由 snow_white 于 2007-7-20 16:33 编辑 ]snow_white (2007-7-20 16:34:25)二、蛋白质组学的研究进展蛋白质组学强调的是针对蛋白质的一个整体思路。从整体的角度看，蛋白质组研究大致可分为两种类型：一种是针对细胞或组织的全部蛋白质，也就是着眼点是整个蛋白质组；而另一种是以与一个特定的生物学机制或机制相关的全部蛋白质为着眼点，在这里整体是局部性的。针对细胞蛋白质组的完整分析的工作已经比较全面地展开，不仅如大肠杆菌、酵母等低等模式生物的蛋白质组数据库在建立之中，高等生物如水稻和小鼠等的蛋白质研究也已开展，人类一些正常和病变细胞的蛋白质数据库也已在建立之中。与此同时，更多的蛋白质组研究工作则是将着眼点放在蛋白质组的变化或差异上，也就是通过对蛋白质组的比较分析。首先发现并去鉴定在不同生理条件下或不同外界条件下蛋白质组中有差异的蛋白质组分。限于篇幅，本文不对这方面的工作做进一步论述。本文接下来重点介绍近期发表的关于蛋白质组学的几个工作，从中可以看到蛋白质组学的思想方法在蛋白质整体（或局部整体）水平上是如何解决生理学的一些重要问题的。1999年11月《Nature》杂志发表了一篇用蛋白质组学方法研究蛋白质折叠的研究论文[10]。在这篇文章中，Houry等报道了在大肠杆菌胞质中的2500种新生多肽链种只有近300种以GroEL作为分子伴侣来帮助其折叠成正确构象。在以往的相关研究中，通常只是针对某个或某些特定的蛋白质，观察它（们）在折叠过程中是否需要诸如GroEL等分子伴侣的帮助。而在这个工作中，研究是从一个整体的思路出发，首先通过免疫共沉淀的方法获得所有与GroEL结合的肽链，再通过二维电泳和数据库比较等蛋白质研究的手段对这些肽链进行分析鉴定，从而实现了对大肠杆菌近2500条新生多肽链与分子伴侣GroEL的关系的全面分析。在这个工作中，研究者还通过对其中50种与GroEL作用的肽链的鉴定，进一步揭示了决定这些蛋白质能与GroEL相互作用的关键结构特征。应该说，这个工作很好地体现了蛋白质组学的思想方法和技术手段的运用。过去在细胞生物学领域还没有得到过一个主要亚细胞结构的完整的分子图。核孔复合体是一个巨大的跨核膜的八角形结构，是控制大分子在胞质和核质间运输的通道。多年来，很多方法被用来分析这一复合体的组成成分。虽然这些工作取得了很大的进展，但究竟在多大程度上反映了这一复合体的分子原貌仍然是一个未知数。最近通过使用蛋白质组学的手段，Rout等[11]鉴定了完整的酵母核孔复合体所有能检测到的多肽，并系统地对每种可能的蛋白质组分在细胞中定位，结合免疫电镜的方法将各组分在复合体内定位并定量，从而揭示了酵母核孔复合体的完整分子构造，并在此基础上揭示了其工作原理。这个工作可以说是蛋白质组学解决构造生物学问题的一个典范，为揭示其他巨大分子机器的"构造"和工作原理指出了一条新路[12]。通过分析一个蛋白质是否跟功能已知的蛋白质相互作用可得到揭示其功能的线索。因为经验告诉我们，如果两个蛋白质相互作用，那么它们一般参与相同或相关的细胞活动[13]。从近期国际上蛋白质组学研究的发展动向可以看出，揭示蛋白质之间的相互作用关系，建立相互作用关系的网络图，已成为揭示蛋白质组复杂体系与蛋白质功能模式的先导，业已成为蛋白质组学领域的研究热点。2000年初，《Science》登载了一篇应用蛋白质组学的大规模双杂交技术研究线虫生殖器发育的文章[14]。在这个工作中，Walhout等以线虫的生殖发育过程作为研究对象，从已知的27个与线虫发育的蛋白质出发，构造了一个大规模的酵母双杂交系统，得到了100多个相互作用的结果，初步建立了与线虫生殖发育相关的蛋白质相互作用图谱，从而为深入研究和揭示线虫发育的机制等提供了丰富的线索。这个工作不同于一般的应用酵母双杂交进行研究的地方在于，它出于对一个生物学问题的整体思考，尽可能地从所有已知的蛋白质而不只是个别的蛋白质为出发点。这一个工作为以前专注于信号转导过程中单个蛋白质作用的科学家们提供了一个新的思路，即将整个途径的相关蛋白质一起考虑。那么，能否通过酵母双杂交系统来分析一种细胞或特定组织的所有可能的蛋白质之间的相互作用呢？在今年初，《Nature》发表了一篇通过大规模双杂交技术研究酵母近6000个蛋白质之间相互作用的论文[15]。啤酒酵母基因组DNA的全序列业已测定，这为通过双杂交技术来鉴定酵母基因组编码的全部6000种左右的蛋白质间的可能相互作用提供了非常有利的条件。在这个工作中，研究人员采用了两种不同的策略对酵母的蛋白质间的相互作用作了全面分析。一是所谓的列阵筛选法（array screening）。在此方法中，6000株表达不同"猎物"蛋白的酵母单克隆分别加在微滴定板上，带有不同的"诱饵"蛋白的酵母株与前面6000株细胞一一接合形成二倍体细胞，"猎物"蛋白与"诱饵"蛋白的相互作用通过报道基因的表达而被鉴定。这篇文章中报道了192种不同的"诱饵"蛋白与近6000种"猎物"蛋白的相互作用的结果。另一种方法是文库筛选法。该方法与前一种方法的区别是，将表达6000种不同"猎物"蛋白的酵母细胞混在一起构成文库，再将这个文库分别与6000株表达不同"诱饵"蛋白的酵母细胞接合，再进一步筛选鉴定阳性克隆，即"诱饵"与"猎物"发生相互作用的克隆。根据这篇报告，上述两种策略得到了不同的结果，相比之下阵列筛选法更为有效，而文库筛选法的长处是通量大。这一工作的重要意义在于我们已经看到，在基因组序列被了解的基础上，可以利用大规模双杂交技术全面地，当然也是初步地，分析其物种或其细胞、组织的所有蛋白质之间的相互作用关系。相信类似的工作将很快针对其他物种开展，特别是基因组序列已被揭示的物种。由此可见，蛋白质组学已经开始从建立数据库走向解决生命科学的重大问题，成为研究生物学问题或机制的强有力手段。snow_white (2007-7-20 16:37:32)三、蛋白质组学研究进展与趋势曾嵘夏其昌（中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所蛋白质组学研究分析中心上海 200031）如果在五年前提到蛋白质组学（Proteomics），恐怕知之者甚少，而在略知一二者中，部分人还抱有怀疑态度。但是，2001年的Science杂志已把蛋白质组学列为六大研究热点之一，其“热度”仅次于干细胞研究，名列第二。蛋白质组学的受关注程度如今已令人刮目相看。1．蛋白质组学研究的研究意义和背景随着人类基因组计划的实施和推进，生命科学研究已进入了后基因组时代。在这个时代，生命科学的主要研究对象是功能基因组学，包括结构基因组研究和蛋白质组研究等。尽管现在已有多个物种的基因组被测序，但在这些基因组中通常有一半以上基因的功能是未知的。目前功能基因组中所采用的策略，如基因芯片、基因表达序列分析(Serial analysis of gene expression, SAGE)等，都是从细胞中mRNA的角度来考虑的，其前提是细胞中mRNA的水平反映了蛋白质表达的水平。但事实并不完全如此，从DNA mRNA 蛋白质，存在三个层次的调控，即转录水平调控(Transcriptional control )，翻译水平调控(Translational control)，翻译后水平调控(Post-translational control )。从mRNA角度考虑，实际上仅包括了转录水平调控，并不能全面代表蛋白质表达水平。实验也证明，组织中mRNA丰度与蛋白质丰度的相关性并不好，尤其对于低丰度蛋白质来说，相关性更差。更重要的是，蛋白质复杂的翻译后修饰、蛋白质的亚细胞定位或迁移、蛋白质－蛋白质相互作用等则几乎无法从mRNA水平来判断。毋庸置疑，蛋白质是生理功能的执行者，是生命现象的直接体现者，对蛋白质结构和功能的研究将直接阐明生命在生理或病理条件下的变化机制。蛋白质本身的存在形式和活动规律，如翻译后修饰、蛋白质间相互作用以及蛋白质构象等问题，仍依赖于直接对蛋白质的研究来解决。虽然蛋白质的可变性和多样性等特殊性质导致了蛋白质研究技术远远比核酸技术要复杂和困难得多，但正是这些特性参与和影响着整个生命过程。传统的对单个蛋白质进行研究的方式已无法满足后基因组时代的要求。这是因为：(1) 生命现象的发生往往是多因素影响的，必然涉及到多个蛋白质。(2) 多个蛋白质的参与是交织成网络的，或平行发生，或呈级联因果。(3) 在执行生理功能时蛋白质的表现是多样的、动态的，并不象基因组那样基本固定不变。因此要对生命的复杂活动有全面和深入的认识，必然要在整体、动态、网络的水平上对蛋白质进行研究。因此在上世纪90年代中期，国际上产生了一门新兴学科－蛋白质组学（Proteomics），它是以细胞内全部蛋白质的存在及其活动方式为研究对象。可以说蛋白质组研究的开展不仅是生命科学研究进入后基因组时代的里程碑，也是后基因组时代生命科学研究的核心内容之一。虽然第一次提出蛋白质组概念是在1994年，但相关研究可以追溯到上世纪90年代中期甚至更早，尤其是80年代初，在基因组计划提出之前，就有人提出过类似的蛋白质组计划，当时称为Human Protein Index计划，旨在分析细胞内的所有蛋白质。但由于种种原因，这一计划被搁浅。90年代初期，各种技术已比较成熟，在这样的背景下，经过各国科学家的讨论，才提出蛋白质组这一概念。国际上蛋白质组研究进展十分迅速，不论基础理论还是技术方法，都在不断进步和完善。相当多种细胞的蛋白质组数据库已经建立，相应的国际互联网站也层出不穷。1996年，澳大利亚建立了世界上第一个蛋白质组研究中心：Australia Proteome Analysis Facility ( APAF )。丹麦、加拿大、日本也先后成立了蛋白质组研究中心。在美国，各大药厂和公司在巨大财力的支持下，也纷纷加入蛋白质组的研究阵容。去年在瑞士成立的GeneProt公司，是由以蛋白质组数据库“SWISSPROT” 著称的蛋白质组研究人员成立的，以应用蛋白质组技术开发新药物靶标为目的，建立了配备有上百台质谱仪的高通量技术平台。而当年提出Human Protein Index 的美国科学家Normsn G. Anderson也成立了类似的蛋白质组学公司，继续其多年未实现的梦想。2001年4月，在美国成立了国际人类蛋白质组研究组织（Human Proteome Organization, HUPO）,随后欧洲、亚太地区都成立了区域性蛋白质组研究组织，试图通过合作的方式，融合各方面的力量，完成人类蛋白质组计划（Human Proteome Project）。snow_white (2007-7-20 16:37:49)2．蛋白质组学研究的策略和范围蛋白质组学一经出现，就有两种研究策略。一种可称为“竭泽法”，即采用高通量的蛋白质组研究技术分析生物体内尽可能多乃至接近所有的蛋白质，这种观点从大规模、系统性的角度来看待蛋白质组学，也更符合蛋白质组学的本质。但是，由于蛋白质表达随空间和时间不断变化，要分析生物体内所有的蛋白质是一个难以实现的目标。另一种策略可称为“功能法”，即研究不同时期细胞蛋白质组成的变化，如蛋白质在不同环境下的差异表达，以发现有差异的蛋白质种类为主要目标。这种观点更倾向于把蛋白质组学作为研究生命现象的手段和方法。早期蛋白质组学的研究范围主要是指蛋白质的表达模式（Expression profile）, 随着学科的发展，蛋白质组学的研究范围也在不断完善和扩充。蛋白质翻译后修饰研究已成为蛋白质组研究中的重要部分和巨大挑战。蛋白质-蛋白质相互作用的研究也已被纳入蛋白质组学的研究范畴。而蛋白质高级结构的解析即传统的结构生物学，虽也有人试图将其纳入蛋白质组学研究范围，但目前仍独树一帜。

你的论文准备往什么方向写，选题老师审核通过了没，有没有列个大纲让老师看一下写作方向？老师有没有和你说论文往哪个方向写比较好？写论文之前，一定要写个大纲，这样老师，好确定了框架，避免以后论文修改过程中出现大改的情况！！学校的格式要求、写作规范要注意，否则很可能发回来重新改，你要还有什么不明白或不懂可以问我，希望你能够顺利毕业，迈向新的人生。 1，论文应该是单一主题还是面面俱到？大学生碰到的第一个诱惑是想在论文里写很多东西。比如有个学生对文学感兴趣，他第一个念头就是给论文起一个《今日文学》这样的标题。如果迫不得已要缩小范围，他会选择《从战后到70年代的西班牙文学》。这类论文是非常危险的。这种题目会让即使是成熟得多的研究者们也直挠头的。对一个20a多岁的大学生来说这是不可能完成的挑战。它要么会变成各种名字和主流观点的简单罗列，要么对原始材料的引用会有失偏颇（这常常是由于省略了不该省略的东西引起的）。1961年，当代作家冈萨罗·托兰特·巴雷斯特写了一本《当代西班牙文学面面观》（瓜德拉玛版），然而，如果这是一篇博士论文的话，人们是一定会把它毙了的，虽然它厚达几百页。它被指责出于疏忽或者无知而没有提到一些被认为非常重要的人物的名字，或者他有时会花一整个章节来写一些“不怎么样”的作家，而对于一些被认为是“重要人物”的则只给了寥寥数笔。当然，我们知道该作者的历史学识以及批评能力都是得到认可的，所以这些遗漏或者比例失调都是有意为之，对某个人物避而不谈比为他洋洋洒洒地写上一整页更能够说明问题。不过如果同样的事情发生在一个二十二岁的大学生身上，谁又能保证他的沉默背后不是别有用心呢？或者他的避而不谈是因为会在其他地方花上几页纸来讨论这个问题？或者这个作者到底知不知道应该怎样写啊？写这种论文的学生常常会向评审委员会的成员抱怨说他们没看懂自己的意思，但是那些成员实际上“无法”看懂他的意思，所以一篇面面俱到的论文常常被看作是傲慢的表现。并不是说（论文中所体现的）学术上的傲慢就一定要被否定掉，我们甚至可以说但丁是个糟糕的诗人，但必须至少先写个300页，对但丁的文本进行深入的分析之后才能说。而这些在一片面面俱到的论文中是看不到的。正因为这样，对于一个大学生来说，与其写什么《从战后到70年代的西班牙文学》，还不如选一个更切实际的低调一点的题目。我可以很直接地告诉你什么才是好题目，它并不是《阿尔代科阿的小说》，而是《“天堂鸟”的两种不同版本》。听上去是不是有点无趣？可能吧，不过那会是更加有趣的挑战。只要好好想一想你就会看到归根到底这是一个如何讨巧的问题。如果写一篇关于四十年的文学的面面俱到的论文，学生将会面对各种可能的反对声音。如果有个提案人或者评审委员会的成员正好想要标榜自己知道某个不太知名的作家，如果那个学生正好又没有把那个作家包括在论文内，他将如何面对前者的发难呢？只要每个评审委员会的成员在看目录时都发现了三个没有被提到的人，那个学生就将在一顿猛烈的轰炸中变得脸色惨白，他的论文顿时好像变成了屁话连篇。相反的，如果学生认真地选择一个范围很小的题目，他就只需要牢牢把握住一份评审委员会大多数成员都不知道的材料就可以了。我并不是在兜售什么下三滥的伎俩，这的确是一种伎俩，但并不低俗，而且它很管用。只要学位申请人以“专家”的面目出现在不如他专业的公众面前，而且看得出为了成为专家他是花了一番心血的，这样占一点便宜是无可厚非的。在这两种极端之间（也就是写四十年文学史的面面俱到的论文以及两种文本之间区别这样严格的单一主题论文）存在着许多中间形式。比如我们可以写《四十年代先锋派文学家的经历》或者《胡安·贝内特和桑切斯·菲尔罗西奥对地理的文学处理》，甚至《卡洛斯·埃德蒙多·德·奥利，埃杜瓦多·奇恰罗以及格罗里亚·富埃尔特斯：三位后岛屿诗人的异同》。我们来看一下一本小册子上的一段话，虽然那是科学领域的，但它所给出的建议适用于所有学科：比如说，《地质学》这个题目就太宽泛了。《火山学》是地质学的一个分支，但是也太大了。《墨西哥的火山》是个不错的着手点，但是同样不够深入。我们把范围在缩小一点就有可能引出非常有价值的研究了：《波波卡莱佩伊尔火山的历史》（科尔特斯的征服者中的某人可能在1591年登上过那里，直到1702年它都没有猛烈喷发过）。一个范围更小，所涉及年份更少的题目是《帕里库丁火山的诞生和死亡》（它的生命仅仅从1943年2月20日延续到了到1952年3月4日）。好吧，我还是推荐最后一个题目。因为到了这个地步，只要申请人能够对那座不幸的火山知无不言，言无不尽就可以了。很久以前，有个学生跑来跟我说他要写一篇题为《当代思想中的符号》的论文。这样的论文是不可能的。连我也不知道“符号”到底指的是什么，实际上这个词在不同的作者那里具有不同的意思，有时，两个作者会用它来表达意思完全相反的两件东西。我们只要考虑一下形式逻辑学家或者数学家所理解的“符号”，它们是没有意义的，在计算公式中占据特定位置，具有特定功能的东西（比如代数公式中的a,b,x,y神马的）,而其他一些作者则可能把它们看做充满了模棱两可含义的东西，比如梦中出现的那些图像，它们可能指一棵树，或者性器官，或者想要长大的愿望等等。所以，我们怎么能把这个作为论文的题目呢？我们必须分析当代文化中所有关于符号的理论，列出它们的共同点和不同点，在它们的不同点里寻找所有作者和理论共有的基本的单一概念，看一下这些不同在不同理论中是否是不相容的。没有当代的哲学家，语言学家或者心理分析学家能够令人满意地解决这个问题。一个初出茅庐的大学生，即使他早慧也只不过接受了最多六七年的成年人的教育，他又怎么能够完成这样的研究呢？最多又是一个像托兰特·巴雷斯那样有失偏颇的东西了。或者他会提出自己的关于符号的理论，而把前人所说的东西晾在一边，下一节我们还要再来说说这种做法值得商榷的地方。我和这个学生交谈了一会儿，我建议他可以写弗洛伊德和荣格的符号，他需要忘记其他各种观点，专心考虑上面的两个作者。可惜这个学生不懂德语（关于语言的问题我们会在第五节谈到）。最后我们决定将题目定为《皮尔士，弗莱和荣格的符号概念》，论文将讨论这三位分别是哲学家，评论家和心理分析家的不同作者那里的三个用同一个词表示的不同概念。由于他们用了同一个词结果造成了混乱，常常有人把其中一位的概念安到另一个人身上。在文章的最后，作为假设的结论，这个学生试图在这些同名异义的概念间寻找平衡，找出它们的相似点。他还提到了一些自己所知道的其他作者，但表示因为论文篇幅所限就无法对他们更多展开了。这样，虽然他的论文只提到了作者X,Y,Z，但没有人能够指责他没有考虑作者K。也没有人能指摘他对引述的那些其他作者不够详细，因为那是在论文的结尾处顺带说一下的，而论文的主体是讨论题目中所出现的那三位作者。现在我们看到了论文不必非要恪守单一主题，一篇面面俱到的论文也可以变得中规中矩，让所有人都接受。需要指出的是，“单一”这个词的意思比我们在这里所用的要多得多。一篇单一论文只涉及一个主题，与“XXX的历史”或者一本手册或者一本百科全书完全相反。从这个意义上来说，《中世纪作家的“颠倒的世界”这个主题》应该也是一个单一主题。它涉及许多作家，但全都是围绕一个具体的主题（从他们想象的假设到所举的例子，悖论和寓言，比如在天上飞的鱼，在水里游的鸟神马的）。看上去这是一个理想的单一主题。但事实上，为了写这样一篇论文，我们需要讨论所有与这个主题有关的作者，特别是那些没有得到公认的不知名作者。所以这个题目还是要被归在“具有单一主题的面面俱到式论文”中，它是很难写的，需要准备无数的材料。如果有人一定要写的话，我建议把题目改成《卡洛林王朝时期的诗人的“颠倒的世界”这个主题》，范围一缩小，我们就知道该到哪儿不该到哪儿去寻找材料了。当然，面面俱到的论文写起来更加有劲，毕竟花一两年甚至更长的时间研究一位作家显得很无聊。但是我们要明白，写一篇严格意义上的单一主题的论文并不意味着在视角上不能做到面面俱到。写一篇关于阿尔德科阿的小说的论文需要我们深入了解西班牙的现实主义，我们还需要读桑切斯·菲尔罗西奥或者加西亚·奥尔特拉诺，需要研究阿尔德科阿度过的美洲小说以及古典文学。只有把作者放到全景当中我们才能理解和诠释他。但是把全景用作背景和绘出一幅全景的图画是两回事。前者只是以一片田野和一条河流作为背景画了一幅骑士的肖像，后者则要画许多田野，山谷和河流。我们必须要改变技法，或者用摄影的术语来说，改变焦距。从单一作者的角度出发拍摄的全景是有点失焦的，不完整的和劣质的。最后我们要记住下面这个基本结论：范围越小，干起活来就越是省心和安心。单一主题由于面面俱到，论文看起来最好像是随笔，而不是历史或者百科全书。

蛋白质是保证机体健康最重要的营养素，它是维持和修复机体以及细胞生长所必需的，它不仅影响机体组织如肌肉的生长，还参与激素的产生、免疫功能的维持、其它营养物质和氧的转运以及血红蛋白的生成、血液凝结等多方面。蛋白质的蛋白质食物来源可分为植物性蛋白质和动物性蛋白质两大类。虽然动物蛋白质和植物蛋白质的营养价值都是人体所必需的，但随着现代生活水平的提高，人们日常摄入动物蛋白质含量越来越多，植物蛋白质的摄入量却越来越少。营养学研究发现，食用过多的动物蛋白质有害于肾脏健康。植物蛋白质中，豆类、谷物含有丰富的蛋白质，特别是大豆含蛋白质高达36%~40%，氨基酸组成也比较合理，在体内的利用率较高，是植物蛋白质中非常好的蛋白质来源。麦弗逊植物蛋白粉天然的植物原料，优质可靠。

研究蛋白质论文

目录一、摘要二、现代生物技术与健康1、现代生物技术中蛋白质与健康2、现代生物技术中糖类与健康3、现代生物技术中与健康4、现代生物技术中与健康三、总结四、后序五、鸣谢六、参考文献关键词：现代生物技术、蛋白质、糖类、脂肪、维生素、健康摘要现代生物技术以其越来越重要的经济价值和科研价值而逐渐受到人们越来越多关注。据估计生物技术可以给人类创造数千亿美元的收入，但比这更重要的是现代生物技术挽救了数亿人的生命。最典型的例子就是青霉素的使用，因为青霉素的使用而使人类的平均年龄增加十几年。人类的生活条件也因生物技术的使用而大有改善。我国作为一个拥有十三亿人口大国，生物技术对保证国民的身体健康起着举足轻重的作用。那么现代生物技术与健康又有哪些连系呢？带着这些问题，我们小组对此进行了调查。希望通过我们的探究活动性报告，使您对现代生物技术与健康的关系有更深入的了解！现代生物技术与健康1、现代生物技术中蛋白质与健康（1）蛋白质的定义及概述蛋白质是一种复杂的有机化合物，旧称“朊”。组成蛋白质的基本单位是氨基酸，氨基酸通过脱水缩合形成肽链。蛋白质是由一条或多条多肽链组成的生物大分子，每一条多肽链二十～数百个氨基酸残基不等；各种氨基酸残基按一定的顺序排列，蛋白质的氨基酸序列是由对应基因所编码。除了遗传密码所编码的20种“标准”氨基酸，在蛋白质中，某些氨基酸残基还可以被翻译后修饰而发生化学结构的变化，从而对蛋白质进行激活或调控。多个蛋白质可以通过结合在一起形成稳定的蛋白质复合物，折叠或螺旋构成一定的空间结构，从而发挥某一特定功能。产生蛋白质的细胞器是核糖体。蛋白质（protein）是生命的物质基础，机体中的每一个细胞和所有重要组成部分都有蛋白质参与。蛋白质占人体质量的％，即一个60kg重的成年人其体内约有蛋白质。人体内蛋白质的种类很多，性质、功能各异，但都是由20多种氨基酸按不同比例组合而成的，并在体内不断进行代谢与更新。被食入的蛋白质在体内经过消化分解成氨基酸，吸收后在体内主要用于重新按一定比例组合成人体蛋白质，同时新的蛋白质又在不断代谢与分解，时刻处于动态平衡中。因此，食物蛋白质的质和量、各种氨基酸的比例，关系到人体蛋白质合成的量，尤其是青少年的生长发育、孕产妇的优生优育、老年人的健康长寿，都与膳食中蛋白质的量有着密切的关系。（2）蛋白质的生理功能1、构成蛋白质的身体。蛋白质是一切生命的物质基础，是肌体细胞的重要组成部分，是人体组织更新和修补的主要原料。人体的每个组织：毛发、皮肤、骨骼、内脏、大脑、血液、神经等都是由蛋白质组成，所以说饮食造就人本身。可见蛋白质对人的生长发育非常重要。2、修补人体组织。人的身体由百兆亿个细胞组成，它们处于永不停息的衰老、死亡、新生的新陈代谢过程中。例如年轻人的表皮28天更新一次，而胃黏膜两三天就要全部更新。所以一个人如果蛋白质的摄入、吸收、利用都很好，那么皮肤就是光泽而又有弹性的。反之，人则经常处于亚健康状态。组织受损后，若不能得到及时和高质量的修补，便会加速肌体衰退。3、维持肌体正常的新陈代谢和各种物质在体内的输送。载体蛋白对维持人体的正常生命活动是至关重要的。可以在体内运载各种物质。比如血红蛋白一输送氧、脂蛋白一输送脂肪、细胞膜上的受体和转运蛋白等。4、白蛋白：维持机体内的渗透压的平衡及体液平衡。5、维持体液的酸碱平衡。6、免疫细胞和免疫蛋白：有白蛋白、淋巴细胞、巨噬细胞、抗体（免疫球蛋白）、补体、干扰素等。七天更新一次。当蛋白质充足时，这个部队就很强，在需要时，数小时内可以增加100倍.7、构成人体必需的各种酶。我们身体有数千种酶，每一种只能催化一种生化反应。相应的酶充足，反应就会顺利、快捷的进行，我们就会精力充沛，不易生病。否则，反应就变慢或者被阻断。8、激素的主要原料。激素可以调节体内各器官的生理活动。如胰岛素是由51个氨基酸分子组合成，生长素是由191个氨基酸分子合成的。9、构成神经递质乙酰胆碱、五羟色氨等。维持神经系统的正常功能：味觉、视觉和记忆。10、胶原蛋白：占身体蛋白质的，生成结缔组织，构成身体骨骼。如骨骼、血管、韧带等，决定了皮肤的弹性，保护大脑（在大脑脑细胞中，很大一部分是胶原细胞，并且形成血脑屏障保护大脑）。11、提供生命活动的能量。（3）现代生物技术在蛋白质重点应用保持健康所需要的蛋白质含量因人而异。普通健康男性或女性每公斤体重大约需要克蛋白质。婴幼儿、青少年、怀孕期间的妇女、伤员和运动员通常每日可能需要摄入更多蛋白质。蛋白质缺乏：成年人：肌肉消瘦、肌体免疫力下降、贫血，严重者将产生水肿。未成年：成长发育停滞、贫血、智力发育差，视力差。蛋白质过量：蛋白质在体内不能贮存，多了肌体无法吸收，过量摄入蛋白质，将会因代谢障碍产生蛋白质中毒甚至死亡。面对这些问题营养师根据人体对不同蛋白质的需要量进行膳食调配以及人工添加或减少蛋白质的方法来保证人体内蛋白质含量的相对稳定。而生物学家则通过生物制药技术研发出一些新型的药品，这些药品不仅能促进人体对蛋白质的运输和吸收，而且还能预防由于外界环境或病毒引起的蛋白质变性。当然在临床医学上，这些变性因素也常被应用来消毒及灭菌。对防止蛋白质变性也是有效保存蛋白质制剂（如疫苗等）的必要条件。此外在蛋白质领域运用的现在生物技术还有X线衍射技术和磁共振技术等。它们的应用都能有效控制和制备蛋白质，促进人们的身体健康。2、现代生物技术中糖类与健康（1）糖的定义及概述糖是一类化学本质为多羟酮及其衍生物的有机化合物。在人体内糖的主要形成是葡萄糖及糖原。葡萄糖是糖在血液中的运输形式，在肌体糖代谢中占据主要地位；糖原是葡萄糖的多聚体，包括肝糖原、肌糖原和肾糖原等，是糖在体内的储存形式。葡萄糖和糖原都能在体内氧化提供能量。食物中的糖是机体中糖的主要来源，被人体摄入经消化成单糖吸收后，经血液运输到各组织细胞进行合成代谢和分解代谢。机体内糖的代谢途径主要有葡萄糖的无氧酵解、有氧氧化、磷酸戊糖途径、糖原合成与糖原分解、糖异生以及其他已糖代谢等。（2）糖的生理功能糖分是我们身体必不缺少的营养成分之一。人们摄入谷物、蔬菜等，经过消化系统转化为单糖（如葡萄糖等）进入血液，运送到全体细胞，作为能量的来源。血液中所含的葡萄糖，称为血糖。体内各组织细胞活动所需的能量大部分来自葡萄糖，所以血糖必须保持一定的水平才能维持体内各器官和组织的需要。正常人在清晨空腹血糖浓度为80～120毫克％。空腹血糖浓度超过130毫克％称为高血糖。如果血糖浓度超进160～180毫克％，就有一部分葡萄糖随尿排出，这就是糖尿。血糖浓度低于70毫克％称为低血糖。可见于饥饿时间过长，持续的剧烈体力活动，严重肝肾疾病，垂体前叶机能减退、肾上腺皮质机能减退等。低血糖时，脑组织首先对低血糖出现反应，表现为头晕、心悸、出冷汗以及饥饿感等。如果血糖持续下降到低于45毫克％，就可发生低血糖昏迷。如果从食物中摄取的糖一时消耗不了，则转化为糖原储存在肝脏和肌肉中，肝脏可储存70～120克，约张肝重的6～10％。细胞所能储存的肝糖是有限的。如果摄入的糖分过多，多于的糖即转变为脂肪。当食物消化完毕后，储存的肝糖即成为糖的正常来源，维持血糖的正常浓度。在剧烈运动时，或者长时间没有补充食物情况，肝糖也会消耗完，此时细胞将分解脂肪来供应能量。人类的大脑和神经细胞必需要糖来维持生存，必要时人体将分泌激素，把人体的某些部分（如肌肉、皮肤甚至脏器）摧毁，将其中的蛋白质转化为糖，以维持生存。（3）现代生物技术在糖类中的应用由于血糖高和血糖低对人体来说都是有害的。为此，有关科学家为了保证人体内糖类的正常供应，对低血糖人群提供含有浓缩糖的含片和糖果。开发出浓缩糖技术，保证他们维持血糖浓度恒定。而对高血糖患者，则用降血糖药物加以控制。在临床上静脉滴注葡萄糖过快，也会出现血糖升高的现象。所以对于血糖过高的病人点滴速度不应过快，而这些也都基于一定生物技术基础上。从而保证了人们身体的健康。3、现代生物技术脂质与健康（1）脂质的定义及概述脂质（lipids）是脂肪及类脂的总体，是一类不溶于水而易溶于有机溶液，并能为机体利用的有机化合物。脂肪是三脂肪酸甘油或称甘油三酯。脂肪的生理功能是储存能量及氧化供能。类脂包括固醇及其脂、磷脂及糖脂等，是细胞的膜结构重要部分。（2）脂质的生理功能及影响脂肪是人体重要的储能物质，当人们摄食过足时，人体会将多余的能力主要以脂肪形成储存下来。过去的日子中，在旧的封建思想的影响下，人们总以“肥头大耳”为富贵的象征，甚至到当今社会。但肥胖并不是富，更是一种负担。肥胖会带来许多疾病，威胁健康，甚至造成死亡。当人们身体肥胖，自然他们的血液中脂质的含量升高，随着血液的全身巡回，使他们和心力衰竭的正常体重者多1倍；冠心病多2－5倍；高血压多2－6倍；糖尿病多4倍；胆石病多4－6倍。这些疾病都是人类健康的主要杀手。像正处于成长期的人来说，肥胖不仅带来的是智力上的影响，更有心理上的一系列影响。所以在平常生活中，合理的饮食显得异常重要。有人喜欢大鱼大肉，时常酒足饭饱之后修身养性，静如止水，像这种生活习惯，终有一天会猝死在饭桌之上。胆固醇是由体内储有的脂肪转化而来的，而胆固醇又能合成乳汁、皮脂以及类固醇激素，保证人们内、外分系统的正常运转。胆固醇在人体内还参与血液中脂质的运输。但是，胆固醇过多压迫血管，使血液的径流量减少，导致脑供血不足、淤血等，严重的会导致人死亡。性激素则是一种与性别决定有关的激素，它能促进人和动物生殖器官的发育以及生殖细胞的形成。乱食性激素会使人生殖器官发育不完全，会内分泌失调，严重的还会变成“双性“人，大大减少其自身的寿命。（3）现代生物技术在脂质中应用面对这些现象，生物学家采用现代溶脂技术除去多余脂肪。通过一种溶解药物，舒缓血管，溶解多余胆固醇。面对因肥胖而造成心力衰竭的病人，科学家还采用强心剂等生物化学药物经行急救，这些都在一定程度上减缓了发病率，降低了死亡率，使人们的健康得以延续。4、现代生物技术中维生素与健康（1）、维生素的定义和概述维生素是近百年才被陆续发现的一组营养素，是维持人体正常功能的一类有机化合物。其共同特点：它们都不供应热量，也不是有机体的构造成分，但却是维持身体的正常生长和发育，繁殖等所必需的有机化合物，起着调节身体各种功能的作用，身体对它们的需要量很少，但供应不足时会出现各种代谢障碍和症状，称为维生素缺乏病。（2）、维生素的种类及应用V—A：缺乏维生素A会造成皮肤老化，维生素A是丘脑、脑垂体等内分泌腺体活动所需要的极为重要的营养成分。想要保持年轻靓丽，尽量多吃些维生素A高的动物性食物，如：肝、瘦肉、卵黄等。V—B2：维生素B2会促进脂肪的分解。V—B6：与氨基酸及代谢关系，能促进氨基酸的吸收和蛋白质的合成为细胞的生长所需，对脂肪代谢都会有影响，与皮脂分泌紧密相关。V—L：维生素L缺乏会影响结缔组织中中股原纤维的形成。V—E：公认有抗衰老作用，能促进皮肤血液的循环和肉芽组织的生长。谷维素：是从米粮油中提取出来的一种天然物质，其成分为以三萜（稀）醇类主体的阿魏酸酯的混合物，它对植物中枢功能有调节和激活作用。它能降低毛细血管脆性，提高人的皮肤血管循环机能，会使皮肤温度升高，四肢皮肤表面血流？增加，被称为“美容素”此外，谷维素还能降血脂，并含强有力的生长促进因子，有助于我们的亲少年成长。（3）现代生物技术在维生素中的应用。针对现在人体内维生素缺乏现象，有关药剂师及营养师在食品及保健品中添加适量维生素。同时生物学家也在这方面进行了许多研究，通过生物制药技术，将大量维生素合成在一个小药片内，制造出补充维生素的药片，这在一定程度上补充了现在爱吃肉类而不爱吃蔬菜的都市人群体内的维生素，使人体内维生素含量保持在一个平稳水平上，使人们身体更加健康。总结：“身体是革命的本钱”健康的身体是我们一切生活的基础，但一个人要做到健康，是十分不易的，这与我们日常的饮食习惯和生活习惯都息息相关。更重要的是我们是否爱护自己的身体，是否决心要要做一个身体健康的人。糖类、脂肪、蛋白质等都是构成我们身体的重要物质，像维生素，各种无机盐等这样的物质在人类体内的含量虽然相对较少，但其作用也是不忽视的。上述物质共同维持我们的生命活动，前面已经提到了各种维生素、无机盐及糖类、脂肪、蛋白质等对人身体的具体作用，例如在对身体的生长，身体器官的功能的影响都一一列出，同时也告诫了我们如果缺少了这些物质，将会有什么严重的后果。然而这些物质都来源于我们日常的食物中，所以合理膳食是相当重要的，这也是维持我们身体健康的惟一路径。随着科学技术的发展，生物科学家已经将着眼点放在人的身体营养健康上，科学家研发新的生物技术来改善人们的身体状况，减轻许多人身体上的痛苦和伤害。作为青年的我们，正处于身体发育的黄金阶段，所以我们更应要注意自己的饮食习惯，养成良好的生活习惯，这对我们以后的生活起着决定性的作用。后序如今，好好学习生物技术是很有必要的事。生物技术给人类的生活带来了无数变革。而“人类基因组计划”“克隆技术”都是当今最热门的生物技术项目。而我们生活中的大多数药物都是通过生物技术得到的。很难想象如果没有生物技术我们的生活究竟会怎样。我想一定非常糟糕，甚至我们的寿命将会变短，越来越多的问题都直接威胁着人们的生命。而如果没有生物技术对人体内蛋白质、维生素等重要物质的研究与应用，我们将会对自己一无所知，更提不上身体健康这些话，所以现代生物技术保护了我们自身的健康。现代生物技术不容忽视。而对现代生物技术的开发，我们责无旁贷。鸣谢通过此次探究活动，大家分工明确，都不辞辛苦的完成了各自的工作任务。在此感谢本小组各位成员，以及为我们提供资料的各出版社，还有我们的指导老师。在大家共同合作下，本次探究活动终于圆满结束。再次由衷致谢！参考文献：1、《生物必修1》人民教育出版社2、《生物化学》第六版人民卫生出版社主编：周爱儒副主编：查锡良3、《登上健康快车》北京出版社主编：关春若4、《高中生物基础知识手册》第七次修改北京教育出版社主编：薛金星这是我们小组写的,网上绝对跟这一样的。

关于捣蛋王的研究论文

在学习、工作乃至生活中，许多人都有过写作文的经历，对作文都不陌生吧，作文要求篇章结构完整，一定要避免无结尾作文的出现。相信写作文是一个让许多人都头痛的问题，以下是我整理的调皮的弟弟作文，仅供参考，欢迎大家阅读。

“砰砰砰……”不用说，一定是我淘气的表弟又在我房间里做什么了。我以和消防队一样的速度冲进自己的房间，一片混乱。

表弟5岁。他虽然这么年轻，但破坏力很强。坚强到能见到他，希望他少来我们家。他“斗牛”的眼睛、熊牙和他淘气的手。他一来，我的房间就被他控制了。

他从我房间里出来，戴着我小时候孙悟空的面具，拿着金箍棒，大声对我说：“我家哪里有妖怪敢撒野。”“什么，什么，我没听错！这不是我的家吗？怎么能成为你的家呢？”“谁说这是你的家”。

说完，他举起金箍来叫我，我是他哥哥，只能投降。我把手放在头上，扑倒在床上。这时，表哥的谋杀案开始了。我睡在床上，哥哥拿起被子让我闭上眼睛而不是闭上。不然我又被打了。不一会儿，我身上盖着被子，他就把我谋杀了。表哥走后，我叹了口气，唉。这个表哥真的很厉害。

还有一次，表哥在沙发上翻跟斗，他对我说：“表哥，你看我翻筋斗快。”我劝他不要翻身，但我的话音刚落，他已经从10米外冲到沙发上，只听他大叫一声，然后就倒在地上一动不动了。然后他嚎叫着，手断了。

一天，两天，三天。我没日没夜的等着表哥。我家没有表哥，真无聊。一个月后，表哥的手好了，他来我家了。他看到他的时候，还是那么天真可爱。

我的弟弟叫贺艺博，他有一双乌黑发亮的眼睛，小巧的鼻子下有一张特别能吃的嘴巴，笑起来圆嘟嘟的脸上嵌着一对可爱的小酒窝，好看极了。他身体胖乎乎的，可这一点也不影响他的灵巧，走起路来像只小肥兔，蹦来跳去，让人看了愈发可爱。

他今年4岁了，特别调皮。有一次，我早上9点还在蒙头大睡，贺艺博要我起来和他玩，可怎么叫都叫不动我，急的一蹦三尺高，这时，他急中生智，在水枪里装满了水，朝我头上一射，我猛地打了个激灵，一个鲤鱼打挺翻身下床，弟弟一看我起来，高兴极了，可再一看，我气势汹汹地冲他过来，他急忙脚底抹油—开溜了。我见他那机灵劲，也是哭笑不得了，只好陪他玩了。

这还不算什么，更让人无奈的是，妈妈有时也会掺和进来，有次，我做完作业，下楼去玩。我回到家时，贺艺博一见我就像老鼠见了猫似的，一下子躲开了，我心里有种不详的预感，立马跑到书桌边，看了一下，还好，我长吁一口气，再一看，我发现彩笔撒了一地，我把本子一翻，背面画着一只猪，我气得七窍生烟。“贺艺博—”我大吼一声，我刚要兴师问罪，他倒机灵，一下子蹿到老妈的后面，嘴还不停喊“哥哥打人了！哥哥打人了！”我连忙向妈妈说出事情的原委。妈妈听了，看了看“证据”，无奈的说；“贺艺博，你不能在哥哥的作业本上乱画，不过这头猪还挺可爱的，拍张照吧。”贺艺博听了，脸上露出一股得意之色，还不停地冲我吐吐舌头，我也只能敢怒不敢言。

唉—这个调皮蛋啊！我真拿他没办法，只好宠着他。我这调皮可爱的弟弟，我永远爱他。

“六六，吃饭了，再不吃就凉啦！”唉！婶婶又在喊弟弟吃饭了。弟弟似乎与吃饭有深仇大恨，不论婶婶怎么叫，他就是纹丝不动。

瞧！天天都是一个样——他总是精准地预料好要吃饭的时刻，马上跑到房间里，趴在床上，婶婶一喊，他便开启“装睡”模式：要么整个人无精打采，眼皮耷拉下来，两眼无神，一直喊“好困啊！好

困啊！我要睡觉…”然后便一头钻进被窝里；要么倒在床上，装着“打呼噜”，伴随着“哼哼”声，胸腔上下起伏，好像真的睡着了一样；要么趴在床上，咧着嘴巴，说着梦话：“嘻嘻，好玩好玩，继续！”没办法，婶婶许多时候只能任由他晚点吃饭。

过了一会儿，婶婶等不及了，便把他从被窝里抱起，他投来无奈厌烦的目光，脚用力地往前蹬，歇斯底里地喊着：“等一下，等一下…”同时奔腾的泪水在脸上流淌，嘴巴也不闲着，“呜呜”地大哭起来。

好不容易把他抱到饭桌前，他却搭着双手，拉着脸，紧闭嘴唇，满脸怒气，还暗暗发誓粒米不食！最终，还是在婶婶的百般哄诱下才安稳地坐了下来。刚开始，他还算听话，婶婶送过来的盛着食物的勺子一到他嘴边，他便乖乖张开嘴巴，任由食物滑进肚子里，还调皮地把吃东西的声音放大，“嘎吱嘎吱”响，似乎想让所有人知道他在吃饭。可没过多久，他便不耐烦了，跳下椅子，在餐桌旁跑来跑去，甚至故意在婶婶面前晃来晃去。可怜的婶婶只好围着他转来转去。突然他一动不动，嘴巴张成O形，正当别人疑惑的时候，“咕噜咕噜”，他居然吐了一桌子！饭后，他似乎得到了解脱，却仍然不放过婶婶，他又把卧室折腾得乱七八糟了，全家人真是拿他没办法！

这就是我那任性的弟弟！

我有很多弟弟，但是在乡下的弟弟比在城里的弟弟调皮多了。同学们可能会问了为什么呢？我的那个乡下的弟弟可调皮了。为什么说他调皮呢？你们可要听好了哦。去年暑假我去外婆家，有一天下午外公去田里干活，我和弟弟也跟去了，我和外公在干活，弟弟在一边玩耍。干了一会儿，外公觉得累了，就到田埂上休息，并吧嗒吧嗒地抽起烟来。弟弟看着外公的满头白发，想到了电视里动画片里的博士吧！

于是，就到家里拿来笔，在外公的脸上画上了一副“眼镜”。干好了活回家，一进家门，大家看见外公的样子都忍不住哈哈大笑，笑得肚子都痛了。外公看大家都笑成这样，觉得很奇怪，一照镜子，外公看着自己的样子，自己也笑了起来。赶紧去洗脸，把“眼镜”洗掉”了看着弟弟调皮的让大家笑地肚子都痛了场景，我觉得很难忘。所以这件事成了我美好的回忆，每当我想起就会觉得好笑！王韶佳名师点评：小作者这篇作文写得很有趣。通过弟弟为外公画眼镜的行为，体现出了乡下弟弟的调皮和有趣。作文的文题相符，对人物的描写也很生动传神。不过，小作者忽略了细节问题，为什么弟弟给外公画眼镜外公不知道呢？外公只是在抽烟，没有理由不知道弟弟的恶作剧，这处细节失真。“同学们可能会问了为什么呢？我的那个乡下的弟弟可调皮了。为什么说他调皮呢？你们可要听好了哦。”这段描写过于罗嗦，改成“下面的事情就是最好的证明”。

我表弟叫蒙前江，小名江江，今年5岁，我们都爱叫他“小江江”。弟弟十分可爱，白净的皮肤，圆圆的`小脸，一双大眼睛炯炯有神，看起来像个帅气的“奶油小生”。我总喜欢摸摸他那白嫩的脸蛋，感觉像鸡蛋那样柔嫩光滑。

弟弟可调皮了，一次我正在家里津津有味地看着小说。“咚咚咚”…听见那咚咚的敲门声我准知道是弟弟来咯。看来，我这看书的梦要被打破了。弟弟，一进来就大喊：“哥哥、哥哥来和我玩打牌。”我是一万个不愿意，可是为了弟弟欢心，我就舍身和他玩一次吧。可惜弟弟还不会打牌，简直就乱打一通，让我哭笑不得。他见打牌打不赢我，又叫我跟他玩球，我也只好答应了。弟弟拿着球朝我扔来，我躲闪不住，“砰”的一声直打在我的头上，我真是又气又好笑，他呢？在一旁哈哈大笑，我真是服了他。玩了好一会儿，他又觉得不好玩了。弟弟竟把我的房间上翻下翻了一顿，最后找出一个很好玩的东西“篮球小闹钟”，我立刻制止他不给他玩，可他却哭着要玩。这小闹钟可是去年我生日的时候，同学送给我的礼物啊，对我来说多么重要。我立马叫他拿过来，他却不给，最后还是把我心爱的小闹钟给弄坏了。我气愤至极，火冒三丈。我正想挥拳揍他一顿，一瞧，他早就拍拍屁股逃走了。唉，又白受苦喽！

我这个弟弟江江虽然天真可爱，可是他的调皮让我也受了不好苦呀！但是我还是那么的喜欢他！

“弟弟!你给我过来！”我吼道。他打了个的哆嗦，极不情愿地走到我面前。我看了他，又看了看我的书。这书已经被他弄得乱七八糟，有一些竟还坏了一个角!“姐姐跟你说了多少遍了不要动我东西，你怎么就听不进去呢······”我“滔滔不绝”的说道，他却无动于衷，气死我了！以上的捣蛋人物是我弟，今年六岁，是一个典型的顽皮捣蛋王。我弟呢，是一个酷爱画画的人。不过画出的并不是画，而是左一个圆圈，右一团黑的，实在让人费解他在画什么。可他自己倒能说出画中的意思，虽然没头没尾，但大致还是能让人听懂的。而且他是兴致来了就不管三七二十一随手拿起一本本子，开始铸就他的“大作”。

有一次，他心情可好了，就看到我的一本书的封面不错，就开始在书里画！只见他左手里拿着彩色笔，右手拿铅笔的，在这里涂一点，那里抹一点的，好我像一副格外认真的样子。我回来的时候，看他这么认真，以为他在写字呢！就夸了他一句：“哟！今天还挺乖的嘛！”可待我仔细一看，咦？呀！这是我的书呐！我急忙从他手里夺回了我的书，可一切都晚了，我的书已被他涂鸦得不成样了“干嘛呀，我还没画完呢！”说完，他竟在我面前抢回我的书，接着便在我的书上画了两道裂痕，指着它对我说：瞧！下雨了！”是下雨了，我的眼睛已经开始“下雨”了！我的一本书，就这么被他给毁了。虽然是这样，但他有时候还能带给我欢乐，有时候还能懂事的帮妈妈做家务活。说到这，我不能再说他是顽皮捣蛋王了，但他仍旧是。

我的弟弟今年六岁了，刚上一年级。他长着一双大而明亮的眼睛，就像一眼清泉，还长着一头挺拔、乌黑的头发。你别看他像一个乖巧听话的孩子，他可是出了名的“捣蛋鬼”。

每次，我到弟弟家里玩，准会看到他那猴子般的身影，上串下跳的，当然也少不了挨训。还有，他每次到我家做客，都会把我家里弄得一团糟。不仅在家如此，在学校上课时接老师的话茬、下课打闹的准是他了。

一天，我正在家里认真的写作业，突然，一阵急促的脚步声打断了我，“不好，准是弟弟来了！”我放下笔，飞一般冲到我的“玩具室”里面，把我那一个个珍贵的玩具藏好，确定安全了，我才慢吞吞地走到门前打开了门。只见弟弟连招呼也不打，拿出了百米跑的速度冲到我的玩具室里。看到这个情景，我自言自语地说：“好一个小客人，合着他就是来抢我的玩具的。”当我走到玩具室里，看到弟弟像哥伦布发现新大陆似的一脸兴奋，再看看他的手中：一个崭新的变形金刚和一个沙漠之鹰的悠悠球，还冲我得意地笑呢。我的心都快碎了。那两个玩具可是用我所有的零花钱买的。“亡羊补牢，为时不晚”。我想着，把差点被发现的光子精灵和擎天柱塞进了口袋里，一边偷天换柱把弟弟最想要的玩具换成了他不喜欢的。终于，功夫不负有心人，我的大部分玩具安全转移，才没有落入虎口。

我的弟弟真是既调皮又可爱。

我有一个弟弟，他非常可爱，也非常调皮，他那一双水灵灵，亮晶晶的大眼睛，可是当他笑起来的时候，那双小灯笼似的眼睛会变成一对“弯月牙”。现在，就由我来为你讲解一次他最调皮的事情吧。

那时候，我刚刚吃完午饭，带着弟弟来到了房间玩，我呆在旁边静静看书。由于我看书看得太入迷了，连弟弟爬上了我身后的床头了我都不知道。忽然，我的头上感到一阵剧痛，接着，头上又有一股巨大的压力正在把我压下去，我赶紧离开这个是非之地，突然，一声“呯”的巨响从我身后传来，回头看了一下之后，发现我的弟弟正呆呆地坐在那里，忽然，他的嘴角往上一咧，仅有的几颗牙齿，有的笑得在颤动，有的笑得在往外跑，然后，眼睛眯了起来，眯成了一对小月牙。此时此刻，我终于明白了这整件事情的过程，我怒了，心像火山一样喷发了，头上冒着一股一股的黑烟，像一条被饿了好几天的狼一般扑了过去，但他轻而易举地躲了过去，我刚想继续去找他报仇，却看见他正在对我的书“行凶”，我大喊一声“不”！就跑了过去整理书去了。

这时，妈妈上来了，我不失时机地向妈妈告了弟弟一状，结果就是弟弟被骂了一顿，他怒气冲冲地望着我，仿佛在说：我跟你没完！

这就是我的弟弟，一个调皮的弟弟，但我仍然一如既往地爱着他。

在生活中，每个人，不对！应该是地球中的生物，都会有变化，在这里，我要说说我那由调皮到懂事的弟弟。

我的弟弟有一双炯炯有神的眼睛，粉玫瑰般的嘴唇，红扑扑的脸蛋，让人看到他就想亲他一下。但你别以为他长得乖就会很听话，恰恰相反，他呀，可调皮着呢！

在一个风和日丽、阳光灿烂的星期六，我懒懒的睡在床上，弟弟却早早的起了床，他一起床呀，我就没好事。这不，他把我收拾好的整整一箱的玩具弄得东一个，西一个，我又得去收拾了，哎！谁叫我是他的姐姐呢！

下午，我去打印资料，爸爸和弟弟在家。爸爸带上耳机，在房间里的电脑上边听音乐边打斗地主，哪有时间管弟弟呀！我走在楼下，正要回家的时候，突然，我隐隐约约听到了小孩的哭声，还在喊救命，我跟着声音抬头向上一看?，哎呀！不好了！弟弟被夹在防护栏的缝隙里了！我在这十万火急的情况下，飞奔而上，赶紧开门，把弟弟抱了下来，弟弟脸色苍白，不停的抽噎着，也许刚才被夹在防护栏缝隙里的时候，他被吓得魂飞魄散了。

自从这件事以后，弟弟开始变得懂事了，不再调皮了。他知道帮大人做家务，把新买的卷纸放进柜子里，而且弟弟不再像以前那样，在别人午休的时候大吵大闹了，而是自己安安静静的在客厅里看电视，电视的声音也非常小。有时候他看累了，自己也倒在沙发上睡着了，那可爱的样子，使我真的感觉弟弟变的好可爱，好听话。

地球中的生物都会有变化，你呢？你感觉自己的身边有什么发生变化了吗？是人、是物、是环境，还是自己？如果有，那你也像我一样，把它给写下来吧！就当作一个永久的回忆。

在我的外婆家，有一个三四岁的小弟弟。他的头发乌黑发亮，明亮动人的大眼睛点缀在他光滑的脸蛋上，就像夜空中一闪一闪的星星似的，也像夏天晚上飞舞的萤火虫。我的弟弟很可爱，但是他也非常的调皮。

有一次，我正在刷牙，他在门口大声地喊道：“姐姐，姐姐，姐姐，你快出来！爷爷奶奶吵架啦！”“好，我马上出来。”我一边放下手上的牙刷，一边急急忙忙地出去了。正当我走到一半的时候，突然被一个东西绊倒了，我摔得四脚朝天，活像一个翻不了身的大乌龟。我心想，谁呀，竟然敢绊我！这时，我才明白过来，原来是弟弟在耍我，他把透明胶贴在了门的两边，我一不注意，就被绊倒了。

“哈哈哈哈哈哈！”弟弟一只手捂着嘴巴，一只手指着我，捧腹大笑，笑得眼泪都快出来了，就差没在地上打滚了，还从手指缝里蹦出几个字来，“活该！”我差点没被他气晕过去！

还有一次，弟弟肚子饿了，向我叫嚷道，“我饿，姐姐，我饿，你给我拿点吃的过来。”我没办法，只好起身给他拿吃的，零食刚拿来，弟弟就像大灰狼看见了小白兔似的，两眼放着光，直直地扑向了那几包零食。不一会儿，他就风卷残云地消灭完了，我看得目瞪口呆。我想把垃圾扔到垃圾桶里，可弟弟就是跟我对着干，把垃圾捡了出来，就这样一次又一次，可真烦人！

你们看，这就是我的弟弟，我那调皮惹事的弟弟！

我有一个调皮的弟弟，一岁半了，身高85厘米。他有一双水灵灵的大眼睛，圆圆的脸蛋，皮肤粉嫩粉嫩的，可爱极了。虽说很可爱，可也特别淘气。爸爸妈妈都说他是个“捣蛋鬼”，一玩乐起来就让全家人叫苦不迭。

自从弟弟会走路后，家里就没有哪天干净整洁过，不是积木洒了一地就是鞋子到处乱丢，地板上不是果皮就是米粒每次搞好卫生不到十分钟又恢复“惨不忍睹”状。弟弟很喜欢跟我玩，但是他更喜欢家中的“游乐场”我的房间。有一次，我在客厅看电视，突然听到房间里有摆东西的声音，噼里啪啦一阵响。我走近一看，见到弟弟正拿着一只笔和一个收纳盒东敲西打。我心想：完了，完了，我再不阻止弟弟，我的东西就要被他敲烂了。我立刻冲进房间把弟弟手中的物品强行拿下，想把他抱回客厅，可是他死活不愿，还坐在地上赖着不走，不管我怎样做，他都无动于衷，就像观音菩萨似的在房间里“打坐”，我很无奈，只好把一支笔给他，他才肯出房门。

每次吃饭，弟弟总是在玩。爸爸喂他，他一会玩玩具，一会东奔西跑，让爸爸追来追去，久不久吃一口饭，满脑子净是玩！他还用筷子“夹菜”玩，用手去抓饭，弄得地板、手心上都是饭菜，每当看到弟弟这狼狈样，我就拉下脸来，大喊：“黄梓晏！看看你干的好事！”然后我把“残局”收拾干净，带着弟弟去洗手，他却对我满不在意地笑了笑，唉，谁叫他还小呢？

这就是我那调皮的弟弟，他那古灵精怪的样子，真是叫人又爱又恨。

我的弟弟4岁了，正在幼儿园读书。他长着一双亮亮的眼睛，红红的嘴巴，笑起来非常可爱。别看他长得小，他可是家里“著名”的淘气包。

有一次，弟弟来我家玩。我正在玩电脑，弟弟跑过来对我说：“陪我玩一会儿吧。”我正玩在兴头上，哪儿有工夫陪他玩啦。弟弟见我没理他，气得火冒三丈。他瞪着眼睛，生气地对我说：“你为什么不陪我玩？”说完，他狠狠地踢了我两脚，疼得我眼泪都差点掉下来了。我生气极了，用力给了他两巴掌。弟弟哇的一声哭了起来。外婆看见了，骂我不是好哥哥。弟弟看见我被骂了，开心得不得了，可我却觉得很委屈：明明是弟弟先动的手，为什么要骂我呢？但我转念一想，我是哥哥呀，应该让着弟弟，算了，不跟他计较了。

我的弟弟4岁了，正在幼儿园读书。他长着一双亮亮的眼睛，红红的嘴巴，笑起来非常可爱。别看他长得小，他可是家里“著名”的淘气包。

有一次，弟弟来我家玩。我正在玩电脑，弟弟跑过来对我说：“陪我玩一会儿吧。”我正玩在兴头上，哪儿有工夫陪他玩啦。弟弟见我没理他，气得火冒三丈。他瞪着眼睛，生气地对我说：“你为什么不陪我玩？”说完，他狠狠地踢了我两脚，疼得我眼泪都差点掉下来了。我生气极了，用力给了他两巴掌。

弟弟哇的一声哭了起来。外婆看见了，骂我不是好哥哥。弟弟看见我被骂了，开心得不得了，可我却觉得很委屈：明明是弟弟先动的手，为什么要骂我呢？但我转念一想，我是哥哥呀，应该让着弟弟，算了，不跟他计较了。

有弟弟的都有一种感受，调皮到你生无可恋……

我的弟弟从外表看就有一副调皮样，眼睛大大的，鼻子扁扁的（我妈说他的鼻孔都可以接雨水了），整天还念叨着什么恐龙又僵尸的，简直是患了多动症啊！

又一次，我弟弟正在玩已经被他“玩烂”了的恐龙玩具，嘴里不时发出“咔咔”的声音。我坐在一旁写毛笔字，还是可提防着弟弟又搞出什么幺蛾子。这时，弟弟悄无声息地向我逼近，我察觉到他的动静，猛地一抬头，可是已经晚了。他伸出邪恶的小手，把妈妈珍藏的一个项链“啪啦”一声扔进了充满墨汁的砚台。此时，我的内心是崩溃的……然后，我就变成了一个“墨汁人”，提着妈妈的黑项链，走进了洗手间。妈妈被我吓了一跳，但很快意识到弟弟的手痒痒了，就罚了他一年不准看手机，弟弟失望地走开了。

还有一次，他为了上次的不可以玩手机之耻，又下了一个圈套。弟弟坏笑着拿着一个香蕉，快速地吃了果肉，然后把一根香蕉皮放在了不显眼的地方，又讨好地把我找来，说要带我去一个好地方。其实我早就看到了那个香蕉皮以及他的作案过程，于是我就来个将计就计！我跟着他走，假装什么也不知道的样子。我让他给我带路，到了香蕉皮区，他停了下来，让我四处找找看。我趴下来，把香蕉皮放到他脚旁边。我爬起来说：“前面是什么？”他就往前走，结果一走就踩到了香蕉皮，摔了个屁滚尿流，我在一旁笑得腰都弯了：“让你放香蕉皮，自作自受！”

经过这两件事，我只想说：“跟我斗，你还嫩了点儿！”

我的弟弟叫“顺毛坨”，他浓密的眉毛下有双水灵灵的大眼睛，鼻子有点往上撅，胖乎乎的脸蛋，加上胖乎乎的身材，十分讨人喜欢。

我的弟弟有对陌生事物好奇的心理。有一次，我把墨汁放在地上，由于弟弟以前是在乡下长大的，不知道这是墨汁，于是打开瓶盖一闻：“哎呀呀，好臭呀！比我的脚丫还要臭！”我忙告诉弟弟：“这是墨汁，别弄脏了你的手。”弟弟就是不信，不料，手一滑，整瓶墨水倒在他的手上，不过，他还不慌不忙，穿着拖鞋迈着鸭子步一摇一摆地走到外婆跟前说：“奶奶，我的手变成黑色的啦！”外婆看了十二分的生气：“怎么搞的。快点去洗了！”我在一旁看着热闹，不禁哈哈大笑出来。

我的弟弟有独特的“审美观”。有一次，他在我家照镜子，可能是觉得眉毛太黑了吧，他见爸爸以前拿剃须刀剃过胡须，于是他也学爸爸地样，拿起剃须刀，打开开关，在眉毛上左剃一下，右剃一下。“嗞－嗞－嗞”剃好了，弟弟突然打开房门，大吼一声：“奥特曼来了！”大家看着弟弟的脸上，怪怪的，总觉得少了点什么，哦！原来是眉毛被剃得无影无踪，水灵灵的大眼睛上什么也没了大家都哭笑不得地看着他，我叫弟弟演示一下，他随手拿了一个东西，在脸上胡乱地来回移动，害得我们捧腹大笑起来！

我的弟弟真调皮，正因为的调皮，我们家时时有欢声笑语。

这段时间我的弟弟会爬了，更调皮啦，这不，天天成了破坏分子。

昨天上午，妈妈出去买菜，叫我照顾弟弟，因为我的作业还没有做完，我抱了他一会儿，给他放到小床上，这张小床在飘窗的阳台上。弟弟咿咿呀呀不太愿意，我知道他想让我陪他玩，但我的作业还有很多，我想让他自己玩一会吧。我在隔壁房间写着作文，刚开始还听到他咿咿呀呀的声音，过了一会儿就没有声音了。我想肯定睡着了，这下我可以安心学习了。等我写完作文去看弟弟，呀，他哪里在睡觉，只见弟弟趴着，手上身上都是土，阳台上的十几个花盆，几乎有一半是倒的，花散落着，地上小床上到处都是，他开心急了，还在揪着花，好像找到了新的乐园。真是应了一句话：小孩静悄悄，一准在作妖。妈妈回来一定要批评我了。那些花是她的宝贝，现在被伤的体无完肤。我赶忙抱起弟弟，他嘴里也是土，还不愿意让我抱，咿咿呀呀不知道说着什么。我好不容易给他洗干净。放到大床上，又开始收拾他的“作案现场”。我把土一点点装回盆子，把花从新栽了栽。把那些折断的收拾到垃圾桶里去。我忙乎了半天总算收拾利亮。

我又开始陪弟弟玩，这个时候我可不敢离开他半步，就怕他又会干出什么事来。中午妈妈回来，尽管我极力掩饰，还是被妈妈发现她的花被糟蹋了，不过没有发火，只是叫我照顾弟弟不能一心二用。哎，我这调皮的弟弟啊！

我们班的捣蛋王叫王小明，他高高的个子，脸蛋圆圆的，肚子大大的，大腿就像两根小柱子，经常穿着蓝色上衣，黑色牛仔裤。他喜欢蹦蹦跳跳，喜欢搞恶作剧，喜欢欺负女生。我们给他起了一个绰号“捣蛋王”。有一次，小明把一只虫子悄悄地放在一个女生的头上，那个女生觉得头上痒痒的，用手一摸，“啊”！吓得尖叫一声，眼泪流出来了。旁边的同学指着小明说：“你太过分了，我要告诉老师。”小明伸伸舌头，做了一个鬼脸，还在偷偷笑呢！还有一次，老师来到教室上课，同学们全站起来向老师敬礼，不知什么时候，小明把前面那个同学的凳子用脚勾走了，等到老师叫同学们坐下时，那个同学没注意，一下摔倒了地上，老师批评他，同学们指责他，可他还若无其事地说“给大家添点乐趣不好吗？”我们真是哭笑不得。小明真是一个名符其实的捣蛋王，唉！不知道他什么时候能改好呀！

没有赏识就没有教育，人性中最本质的需求是渴望得到尊重与欣赏。下面是我给大家推荐的赏识教育论文范文，希望大家喜欢!

《我的赏识教育》

【摘要】没有赏识就没有教育，人性中最本质的需求是渴望得到尊重与欣赏。赏识导致成功，抱怨导致失败。会欣赏学生的老师是最幸福的;被老师欣赏的学生是最快乐的。赏识教育让孩子永远生活在希望和幸福之中。

【关键词】赏识教育有效手段学会自我赏识

引子：没有赏识就没有教育，人性中最本质的需求是渴望得到尊重与欣赏。赏识导致成功，抱怨导致失败。

-------摘自《周宏赏识教育理论》

会欣赏学生的老师是最幸福的;被老师欣赏的学生是最快乐的。赏识教育不是表扬加鼓励。是赏识孩子的行为结果，以强化孩子的行为;是赏识孩子的行为过程，以激发孩子的兴趣和动机;创造环境，以指明孩子发展方向;适当提醒，增强孩子的心理体验，纠正孩子的不良行为。赏识教育是使人将自身能力发展至极限的最好方法。赏识教育是我做班主任教育工作的有效手段，也是我近几年作为教师的感受。下面两则小故事与大家分享.

胆小心细的学习委员――刘雨思

1、基本情况：刘雨思，东街中心小学五年级(二)班学习委员。性格内向，学习刻苦，成绩优异，名列前茅。爱好广泛，喜欢读书，能写一手漂亮的字。

2、老师评语：刘雨思同学：你是一个积极上进，勤奋好学的女孩子。你思想纯朴，待人随和、诚恳，处事稳重;同学关系好，热爱集体，乐意助人。你纯真可爱，对待同学热情大方，思维灵活，记忆力好，自学能力较强。能够认真完成作业，写作业的速度令人惊讶，而且作业本干净，每当我看到你工工整整的作业，就忍不住停下来欣赏，刻苦踏实的学习精神也很让我喜欢。看着你的学习成绩不断进步，老师为你高兴、为你自豪。你是一名优秀的班干部，对自己的本职工作尤其负责，收发作业，认真及时。你总是默默地为班集体的每一项活动增添光彩。老师相信只要你信心不倒，努力不懈，终有一天会到达成功的彼岸!老师祝你更上一层楼。

3、案例背景：在开学初，我就宣布，本学期由学生们自由竞争小班干部，竞争时要在全班学生面前进行演讲，说出自己的优势，并表明如果选上了会怎么做。在准备期间，有一天，我发现自己书里夹着一个信封。打开一看，原来是我班刘雨思同学给我写的“一封信”。意思是，她非常愿意竞选班干部，并给我做了保证。可是又认为自己没有什么优点，不敢去演讲。因此给我写了这封信，想请求我的帮助。

4、案例分析：赏识教育，最重要的是让孩子学会赏识自己。赏识自己是自信的基础，要让孩子从小就感觉到自己是最好的，最棒的，自己有很多优点。老师要善于给孩子创造赏识自己的氛围和机会，学生在某一方面取得了成绩，作为老师应该及时发现，及时赏识，这样就可以激发学生看到自身的优点，他们就会从潜意识当中发现自己有着很优秀的一面，从而带动了其他方面的进取心，并且相信自己在其他方面也会做得非常好。

5、辅导策略及成效：看过信后，我分析：她由于弱小，看不到自己的潜能，因此才表现为缺乏自信。于是，我当天下午就找到她，诚恳地对她说：“好多同学都告诉我，你的字写得非常好，而且每次做卫生还非常积极，你为什么不竞选小队长?”可是她还是说：“我太想当了，就是不敢在同学们面前说。”我说;“你给我写的信就是一篇非常好的演讲稿，你就把它背下来吧，我相信到时你一定会说得特别好。”得到了我的鼓励，她非常高兴，一再表示一定要背得熟熟的。到了竞选那天，看到不少同学都发了言，于是我暗暗给她使眼色。开始她红着脸犹豫着，当第九名同学说完之后，她一咬嘴唇站起来走到讲台前，大声地说：“大家好，我叫刘雨思……”一串精彩的演说之后，学生们情不自禁地报以热烈的掌声。最后，刘雨思成了第二小组组长。后来她的胆子越来越大，学习成绩提高的很快，到期末考试，竟然取得全班第一名的好成绩，第二个学期，竞选班干部，当选为学习委员。在语文课教学中我经常把刘雨思的作业本拿到课堂上当样本让大家学习，，在办公室里我还让其他老师欣赏雨思的漂亮的硬笔书法，赢得了同事的赞许的眼光，我还在课堂上把这些事告诉雨思及全班同学，雨思听了脸上洋溢着自豪的笑容，同学听了露出羡慕的神情。在县举办的硬笔书法比赛中获一等奖。

6、案例感悟：在和学生们朝夕相处的过程中，我很注意观察他们，努力寻找出每个学生的闪光点。被赏识就是被信任，就会产生一种被鼓舞，被期盼的积极心理效应，就会更加努力。“赏识教育”就是要求教育者要以信任、尊重、理解、激励、宽容、提醒的心态和思维方式对被教育者实施教育，并且在教育的过程中，紧紧抓住被教育者发展方向上表现出来的优点、进步客观公正的肯定和赏识，让星星之火成燎原之势。让被教育者在“我能行”、“我是好学生”的感觉中走向成功。

捣蛋大王劳动委员――李高强

1、基本情况：李高强，东街中心小学五年级(二)班劳动委员。性格开朗，生性好动，学习成绩一般。不遵守纪律。爱好唱歌，擅长跳街舞。崇拜迈克尔.乔丹。

2、老师评语：李高强同学：课堂上，你总是聚精会神;从你上课高举的手中，老师看到了你的自信。六一汇演中你使尽浑身解数为大家表演了街舞赢得大家的掌声，老师为你自豪。但是，你身上还有诸多的毛病，例如自习课爱说笑话，课间爱和同学打闹，老爱给老师惹事，老让同学告你的状，出现问题老从别人身上找原因。你是个小小男子汉，聪明、勤劳、热爱集体、尊敬老师。如果你能处处严格要求自己，爱学习，不贪玩，把自己的聪明才智全部发挥出来，你一定让大家刮目相看。试试吧，你一定行!如果你在学习上再刻苦一些，大胆一些，认真把字练好，你一定是个优秀的学生。

3、案例背景：李高强是我们班上有名的捣蛋大王，调皮，多话，喜欢说些乱七八糟的话引起大家注意;而且经常缺交作业，上课不专心等。经常惹事、找事，大家多不喜欢他，都不愿意和他做同桌，班会上几乎变成了批判他的专题大会，为此我很头痛，我经常找他谈话，有时动之以情，晓之以理，苦口婆心;有时大发雷霆，怒发冲冠，指着他的鼻子一顿臭骂，他无动于衷，脸皮很厚。完不成作业，家长也请不来，一副死猪不怕开水烫的样子。