肺炎克雷伯菌的毕业论文

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药学毕业论文开题报告篇3 题目名称：番泻叶对小鼠尿量的影响研究现状：一、普鲁兰酶普鲁兰酶(Pullulanase，. 2. 1. 41)是一种能够专一性切开支链淀粉分支点中的α糖苷键，从而剪下整个侧枝，形成直链淀粉的脱支酶。普鲁兰酶还可以分解普鲁兰多糖，普鲁兰酶来源于微生物，R-酶则来源于植物。普鲁兰酶最初是由Bender和Wallenfels于1961年通过产气气杆菌Aerobacter. aerogenes}(典型菌为肺炎克雷伯氏杆)发酵获得，他们报道了该酶良好的酶学性能。之后，各国的科研人员经过广泛深入研究，从不同的地区、微生物中获得该酶，掀起了开发普鲁兰酶的高潮。在淀粉加工工业中，α淀粉酶最为常用，它的功能是水解淀粉的α-1,4糖苷键，单独用它时，产物中含有大量分支结构的糊精，其中就含有大量的α-1,6糖苷键。假如不把淀粉的α-1,6糖苷键彻底分解的话，势必会造成很大的浪费。自然界中，存在有能分解淀粉的α-1,6糖苷键的酶，通称为解支酶。如寡α-1,6葡萄糖苷酶( , Oligo-l,6-glucosidase )，普鲁兰酶( )，异淀粉酶( , Isoamylose )，支链淀粉一6-葡聚糖酶( )，其中普鲁兰酶要求的底物分子结构最小，故而可以将最小单位的支链分解，导致可以最大限度的利用淀粉，所以在淀粉加工工业中有着重要的用途和良好的市场前景。故而许多国家都争相开发，但是到现在为止，只有丹麦的NOVO公司具有普鲁兰酶的生产能力。我国只有向其进口，但是其价格昂贵，限制了普鲁兰酶在我国的应用。其实，我国早在七十年代就开发普鲁兰酶的产生菌，但是该菌的酶学性质不适合生产，至今我国在普鲁兰酶的国产化方面还没有报道。在淀粉的加工行业上，对普鲁兰酶的酶学性质的要求是耐酸耐热，其原因是因为通常使用外加酶化法，由于所用酶类的限制，普鲁兰酶的添加可以在两步反应的任何一步，但必须满足上述的反应的条件。因此所开发的普鲁兰酶的酶学性质必须满足现有的酶法水解制糖的条件，也就是耐酸耐热。二、普鲁兰酶的研究现状 1.产普鲁兰酶的微生物普鲁兰酶最初是由Bender和Wallenfels于1961年通过产气杆菌(Aerobacter aerogenes)发酵获得。他们报道了该酶的良好性能之后，各国的科研人员经过广泛深入的研究，从不同的地区的微生物中获得该酶，掀起了开发普鲁兰酶的高潮。但是迄今为止，尽管发现许多微生物能够产普鲁兰酶，但是由于当今工业生产条件(酸性，温度)，大多数微生物所产的普鲁兰酶并无商业价值。以下便介绍一下普鲁兰酶的生产菌种。蜡状芽抱杆菌覃状变种(Bacillus cereus ) 由日本的ToshiyukiTakasaki于1975年发现。该菌同时产生两种淀粉酶:β-淀粉酶和普鲁兰酶。最佳作用条件为pH6～，温度50℃，最大转化率(淀粉水解产生麦芽糖)大约为95%.酶学研究中发现，此酶在pH5，温度60℃依然保持大部分活性，该菌的营养细胞呈棒杆状，聚集成长短不等紊乱链状，无运动性，格兰氏阳性，产芽抱时细胞无明显膨胀。该菌最适生长温度30℃～37℃ ,最高生长温度在41℃～45℃，可以利用葡萄糖，甘露糖，麦芽糖，海藻糖，淀粉和糖原。嗜酸性分解普鲁兰多糖芽抱杆菌() 上世纪八十年代初，丹麦Novo公司获得此菌，此菌所生产的普鲁兰酶耐热 (60℃)，耐酸()。该公司经过投入巨资开发研究，1983年Nov。公司在日本和欧洲市场同时商业化销售，商品名Prornozyme。如今，它是应用最广，产量最大的普鲁兰酶。呈棒状，深层发酵几小时后，可观察到类原生质体的膨胀细胞，较稳定，饱子呈圆柱体或椭圆体。格兰氏反应阳性，37℃生长良好，45℃以上和pI-1高于以上不长，在以普鲁兰糖为碳源的培养基(( ～)上生长良好。枯草芽饱杆菌(Bacillus subtilis) 1986年，日本的Yushiyuki Takasaki报道了一株能产生耐热耐酸普鲁兰酶的菌种，被命名为Bacillus subtilis TU。此菌种所产生的酶为普鲁兰酶和淀粉酶的混合物，可水解淀粉为麦芽三糖和麦芽搪.水解普鲁兰糖为麦芽三糖，其中普鲁兰酶最佳作用pH为～，但在时亦有约50%的酶活，此普鲁兰酶最佳作用温度60℃。耐热产硫梭菌(Clostridum Themosulfurogenes) 1987年.德国的等报道了一株能同时产a淀粉酶、普鲁兰酶和葡萄糖淀粉酶的菌种:耐热产硫梭菌。该菌种所产普鲁兰酶有较广的温度适应范围(40℃～85℃)，在～有较高的活性，在如此广的范围内都有较强活力无疑将扩大该普鲁兰酶的应用领域. Bacillusnaganoensis,Bacillus deramificans, 上世纪九十年代，Deweer发现了普鲁兰酶产生菌Bacillus naganoensis;Tomimura筛选出Bacillus deramifrcans。这两株菌所产的普鲁兰酶的酶学性质与Bacillus. Acidopullulyticus的酶学性质相似。这两株菌都是中度嗜酸菌，在以上就不生长，温度超过45℃以上同样也不生长。这两株普鲁兰酶产生菌的发现，进一步拓宽了普鲁兰酶的应用。产普鲁兰酶的高温菌菌种自上世纪八十年代以来，人们逐渐意识到在通常的自然条件下，很难筛选得到极端耐热的普鲁兰酶生产菌种，于是各国的科学家便把目光转移到温泉嗜高温细菌的筛选，而且现在已经取得较多的成果。Bacillus如vorcaldarius所产普鲁兰酶的最适温度和pH分别是75～85℃, , Thermotoga maritime的最适温度和pH分别是90℃, , Thermurs caldopHilus的最适温度和pH分别是75℃,, Fenidobacterion pernnavoran最适温度和pH分别是80～85℃, 2.普鲁兰酶的分子结构至今为止，许多普鲁兰酶的基因己经被克隆，但是还没有见到任何有关普鲁兰酶结构的报道，但是在根据序列相似性对糖普键水解酶的分类，普鲁兰酶属于第13家族，α淀粉酶家族，这个家族中包含了30多种酶，可以分为水解酶，转移酶。异构酶三大类。这些酶能够水解和合成α～,α～,α～,α～,α～,α～糖苷键。其中很多酶的结构已经被报道，它们都采取了(β/α)8的结构，通过生物信息学的研究，这个家族的蛋白都有一个共同的结构，酶的活性中心都是(β/α)8折叠筒的结构，命名为结构域A。第13家族的大多数酶还具有结构域B，它是位于(β/α)8折叠筒中，第三个β片层与第三个α螺旋之间的一段序列，其特点是结构和长度差异较大，推测其功能是与底物的结合有关。在紧接着(β/α)8折叠筒后，还有C结构域，紧接C结构域，部分家族成员还有结构域D。 3.普鲁兰酶的应用普鲁兰酶，在食品工业中是一种用途广泛的酶制剂和加工助剂。它能专一性分解淀粉中的支链淀粉和糖原分子及其衍生的低聚糖分支中的α～l, 6糖苷键，使分支结构断裂，形成长短不一的直链淀粉。因此，将该酶与其它淀粉酶配合使用时，可使淀粉糖化完全。近年来，普鲁兰酶己作为淀粉酶类中的一个新酶种，应用于淀粉为原料的食品等工业部门，在食品工业中有如下几方面的作用: 单独使用普鲁兰酶，使支链淀粉变为直链淀粉直链淀粉具有凝结成块，易形成结构稳定的凝胶的特性，因此，可作为强韧的食品包装薄膜。这种薄膜对氧和油脂有良好的隔绝性，又因涂布开展性好，故适合于作为食品的保护层。它还适合于淀粉软糖制造，也可用作果酱增稠剂，用于装油脂含量高的食品，以防止油的渗出以及肉食品加工。近年来在食品工业中提倡使用可被生物降解的薄膜，直链淀粉在这些方面具有较大的发展前途。豆类直链淀粉含量较高，因此绿豆淀粉制成的粉丝韧性比其它淀粉好，如果用普鲁兰酶处理谷物淀粉，再制成直链淀粉后，可以制成高质量的粉丝。一般谷物淀粉中，直链淀粉含量仅占20%，支链淀粉含量约为80%。工业上每生产1吨直链淀粉就有4吨副产品的支链淀粉。美国虽然通过遗传育种的方法.得到含直链淀粉60%玉米新品种，但不大适于大量生产。国外已采用普鲁兰酶改变淀粉结构，可使支链淀粉变为直链淀粉。据报道，采用此法收率可达100%.制造直链淀粉的方法为，先采用普鲁兰酶分解经液化的分支部分，使其转变为直链淀粉，并以丁醇或缓慢冷却法沉淀淀粉。再回收含少量水分的晶型沉淀物，最后通过低温喷雾干燥法制成粉状的直链淀粉。普鲁兰酶与β～淀粉酶配合使用生产麦芽搪饴糖是我国传统的淀粉糖产品，其中所含部分麦芽糖，广泛用于糖果、糕点等食品工业。目前生产方法是以α～淀粉酶进行液化，再用β～淀粉酶水解支链淀粉，这样只能水解侧链部分。接近交叉地位的α～糖苷键时，水解反应停止。但如果使用普鲁兰酶共同水解，便能使分支断裂，提高淀粉酶水解程度，降低了β极限糊精的含量，大大提高了麦芽糖的产率，有利于生产麦芽搪浆。目前对加普鲁兰酶进行糖化己作了较大规模的试验。试验条件为。每批投料量约为900公斤碎米，粉浆浓度为15～16Be°数皮用量(对碎米计)，β～淀粉酶活性2,000单位/克以上，;普鲁兰酶活性45,000～55,0 00单位/克，系由产气气杆菌生产，每批用量为1公斤。试验结果表明，加入普鲁兰酶糖化的试验糖与对照糖品相比，还原糖平均增加，麦芽糖含量平均增加了，糊精含量平均减少了高浓度麦芽糖浆较之高浓度葡萄搪浆，具有不易结晶，吸湿性小的特点，所以高浓度麦芽糖浆在食品工业中有着广泛的用途。采用普鲁兰酶与p一淀粉酶配合使用，成本低廉，麦芽糖收率达到70%左右，其至更高。用于啤酒外加酶法糖化啤酒生产中麦芽，既是酿造啤酒的主要原料，也为酿造过程提供了丰富的酶源。在啤酒酿造的糖化过程中，麦芽中分解淀粉的主要酶是α～淀粉酶、β～淀粉酶和分解淀粉α～1. 6糖瞥键的R一酶(植物普鲁兰酶或植物茁霉多糖酶)。β～淀粉酶与另两种淀粉酶协同作用，可使淀粉分解成麦芽糖(也包括少量的麦芽三糖和极少量的葡萄糖)和低分子糊精。使麦芽汁有比较理想的糖类组成。在工业生产中为了节约麦芽用量，采用所谓外加酶法糖化，即在减少麦芽用量的前提下，增加淀粉质辅助原料的比率，并加入适当种类的酶制剂进行搪化。要使大麦及其它辅助原料糖化完全，需要外加a一淀粉酶和分解α～糖苷键的普鲁兰酶制剂等。单独使用a一淀粉酶时产生麦芽糖和麦芽三搪是很不完全的。假如分解淀粉α～糖苷键的酶活性不足，淀粉分解就不完全，其结果是可发酵性糖含量低，制成的啤酒发酵度达不到要求。若采用能分解α～和α～糖苷键的糖化型淀粉酶，则其反应产物为葡萄糖，容易使酒味淡薄。采用普鲁兰酶与α～淀粉酶协同，效果良好，其分解产物主要是麦芽糖和少量的麦芽多糖。采用外加酶法糖化时，加入酶制剂的用量为:淀粉酶6～7单位/克大麦及大米:蛋白酶，60-80单位/克，并配合以菠萝蛋白酶10ppm，普鲁兰酶50单位/克大麦。以上三种酶制剂均添加于糖化或酒化开始。总之，普鲁兰酶无论作为酶制剂和食品工业的加工助剂均有广阔的发展前途。研究目的和意义：酶制剂工业是上世纪七十年代就己经形成的一个重要的产业，目前世界酶制剂总产值达100亿美元，我国的产值约为100亿人民币，并且随着其应用领域的不断扩大以及新酶种的开发，这一市场正在迅猛发展。但是全球酶制剂产业几乎被几家外国公司所垄断，其中丹麦的NOVO公司几乎占全球总销售额的一半。本研究对普鲁兰酶的开发，对酶制剂产业的发展有重要的意义。其次我国自从七十年代开始便对普鲁兰酶进行研究开发，但是所开发得到的普鲁兰酶，既不耐热也不耐酸，这就使其在工业化应用中受到了局限。为了改变我国对进口产品的依赖，填补我国这一领域的空白，寻找一条国产化的道路，本研究的目的是利用自然微生物资源，普鲁兰酶，提高我国淀粉原料的利用率，从而提高整个淀粉加工行业的生产率，这对我国淀粉加工产业的意义是不言而喻的。研究内容(内容、结构框架以及重点、难点)：一.普鲁兰酶产生菌的筛选 (1)样品的采集; (2)菌种初筛; (3)菌种复筛; (4)菌种保藏方法; (5)酶活力测定方法的建立。二.产普鲁兰酶菌株的产酶条件的研究 (1)碳源，氮源对发酵产酶的影响; (2)初始PH对发酵产酶的影响; (3)接种量对发酵产酶的影响; (4)发酵温度对产酶的影响; (5)金属离子对产酶的影响。重点或关键技术： (1)纯菌株的分离; (2)菌株的鉴定方法的选择。研究方法、手段：一.普鲁兰酶产生菌的筛选 (1)样品的采集：选择适合产生的地点(面粉厂.菜地.果园等)采集土样 (2)菌种初筛：在采集的土样用无菌水稀释后，在含有淀粉类的培养基中做平板涂步， 37℃培养48h后，用碘液进行显色反应，将有淀粉酶产生的菌落接于斜面中保存。 (3)菌种复筛：将前期分离的能产生淀粉酶的菌株涂步于普鲁兰糖平板上，37℃培养48h后用95%乙醇进行透明圈实验。有透明圈产生说明菌株产生普鲁兰酶，将产生透明圈的菌落挑于斜面培养基培养。 (4)菌种保藏方法：采用4℃低温保藏。 (5)酶活力测定方法的建立：采用发酵培养液经过离心后利用DNS显色法 520nm测定吸光值，测定标准葡萄糖标准曲线，利用标准曲线计算普鲁兰酶酶活大小。二.产普鲁兰酶菌株的产酶条件的研究 (1)碳源，氮源对发酵产酶的影响：采用不同碳源，氮源培养基培养一段时间，测定酶活力。(其他条件相同：接种量，装瓶量，初始PH值，转速，培养时间。) (2)初始PH对发酵产酶的影响：采用相同发酵培养基，在不同初始PH下接种等量种子液。在相同条件下培养，测定发酵液的酶活。(其他条件相同：接种量，装瓶量，转速，最佳培养温度，最佳培养时间。) (3)接种量对发酵产酶的影响：在发酵培养基中分别接入2%，4%，6%，8%， 10%，14%，18%的种子培养液于最佳碳源，氮源，最佳初始PH的培养基中，在相同条件下培养，分别检测酶活。(采用以上确定的最佳碳源，氮源，最佳初始PH。) (4)发酵温度对产酶的影响：采用相同培养基，在不同温度下(25℃，30℃，35℃，40℃，45℃)培养一定时间，测定酶活力。 (5)金属离子对产酶的影响：在基础培养基中加入少量不同金属离子，发酵后测酶活。(金属离子有：锰离子，钙离子，锌离子，镁离子，铁离子，铜离子。) 研究进度：完成项目总体进度30%，样品土样的采集及前期的准备工作,菌株的初筛，包括(样品土样原液的涂步培养及摇床培养，产支链淀粉酶菌株的挑选及斜面培养)。：完成项目总体进度50%,菌株的复筛，包括(产普鲁兰酶菌株的筛选及斜面培养),葡萄糖标准曲线的测定,酶活测定方法的建立,并以酶活大小对菌株进行再次筛选。：完成项目总体进度80%,产酶条件的研究。包括：碳源，氮源，初始PH值，接种量，发酵温度，金属离子。并通过各中单因素试验确定发酵培养基的最佳碳源，氮源，初始PH值，接种量，发酵温度，金属离子。 2009、4—2009、5 ：完成项目总体进度100%,课题总结，撰写论文。文献综述(包括：国内外研究理论、研究方法、进展情况、存在问题、参考依据等) 自从1961年Bender H.等人在研究一株产气气杆菌Aerobacter aerogenes(典型菌为肺炎克雷伯氏杆菌)时首次发现普鲁兰酶后，国际上对产生这种酶的微生物进行了广泛研究，发现许多微生物可以产生此酶，并筛选出一些适用于工业化生产的优良菌株。随着该酶的应用发展，对耐热性普鲁兰酶的研究也逐渐增多，已成功克隆并表达了该酶的基因。国内1976年开始对一株产气气杆菌(Aerobacteraerogenes 10016)的普鲁兰酶进行研究，对该菌株的产酶条件、酶的分离提取及酶学性质作了报道，并研究了该酶的食品级提取技术。此外，陈朝银、刘涛等人从云南温泉水样中筛选到一株产普鲁兰酶高温栖热菌菌株，通过诱导等实验将该酶的酶活从提高到170u/mL，酶产量提高了近2500倍左右，酶的最适作用温度及pH分别是75℃和，具有一定的耐热和耐酸特性。陈金全等从温泉水样中筛选到一株产耐热耐酸普鲁兰酶的野生菌株，并根据形态、生理生化特征、细胞化学组分分析及16SrDNA序列比对、基因组DNA的G+C摩尔百分含量、同源性比对等实验，鉴定其为脂环酸芽抱杆菌属(Alicyclobacillus)的一个新种，所产酶最适作用温度为60℃，最适pH值，具有较好的耐热耐酸特性。杨云娟等利用毕赤酵母成功构建了普鲁兰酶表达量较高的基因工程菌，摇瓶发酵酶活可达，最佳发酵条件下产量可达 .酶的最适作用温度为600C，最适pH值，具有较好的耐热耐酸性。目前我国仍没有具备独立生产普鲁兰酶能力的厂商，要实现低成本、国产化的生产，还有很长的路要走。技术应用于耐热脱支酶的研究，使耐热异淀粉酶的研究有了很大发展。Coleman等人将嗜热厌氧菌T. brockii普鲁兰酶基因克隆到中得到的克隆子分泌的普鲁兰酶数量高于出发菌株，Okada等人将Bacillus Steanther, onhiu:中编码热稳定异淀粉酶的基因克隆到:中，得到的转化菌株其异淀粉酶能在60 ℃稳定15分钟。Burchadf将。ostridium thermosulf urogenes DSM38%的嗜热异淀粉酶基因克隆并在中表达，所得酶的最适pH和最适温度与出发菌相同，而且在高温下仍能保持活性.Antranikiam等人将Pyrococcus舟riousous的异淀粉酶基因克隆到中并分离得到了酶蛋白。尽管如此，目前尚未有已将转基因的耐热性异淀粉酶工程菌应用到工业生产中的报道。众所周知，利用物理和化学诱变剂单独或复合处理微生物细胞是选育高产变种菌株行之有效的经典方法，它在为培育多种抗生素、氨基酸、核苷酸激酶(尤其是蛋白酶和淀粉酶)的高产变种菌株方面曾经起过极为重要的作用，至今仍然是方便易行和行之有效的方法之一。主要参考文献： [1][美]惠斯特勒等编王雏文等译.淀粉的化学与工艺学[M].北京：中国食品出版社，1988 [2]张树政.酶制剂工业[M]. 北京: 科学出版社，1998 [3]邬显章.酶的工业生产技术[M]. 吉林: 吉林科学技术出版社，1988 [4]Taniguchi H, Sakano Y, Ohnishi M, Okada G(1985) Pullulanase[J].TanpakushitsuKakusan Koso. Ju1;30(8):989-992. Japanese [5] Jensen, B. F., and B. E. Norman. 1984. Bacillus acidopullulyticus pullulanase[J].:application and regulatory aspects for use in the food industry. Process [6]Tomimura E, Zeman NW, Frankiewicz JR, Teague WM. [J]. Description of Bacillus naganoensis sp. J Syst Bacteriol. I 990 Apr; 40(2):123-125 [7]吴燕萍，等. 微生物法生产普鲁兰酶的研究[J]. 生物学技术, 2003，8(6)：14-17 [8]金其荣，等. 普鲁兰酶初步研究[J]. 微生物学通报, 2001，28(1):39-43 [9]程池. 普鲁兰酶Promozyme 200L. 及其生产菌种[J].食品与发酵工业，1992 ，(6) [10]唐宝英等.耐酸耐热普鲁兰酶菌株的筛选及发酵条件的研究[J].微生物学通报，2001 28(1):39-43 猜你喜欢： 1. 关于医学开题报告范文 2. 药学论文开题报告 3. 生物制药毕业论文开题报告范文 4. 药理学开题报告范文 5. 药品市场营销毕业论文开题报告 6. 药学论文题目大全

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肺炎链球菌文献艾弗利论文

艾弗里实验中每组只保证一组实验有影响1艾弗里对转化因子的探究采用的是排除法思维排除法也叫淘汰法，是指引起某一现象的原因有多种可能，如果将假定的各种可能都加以一一排除，观察某一现象不出现的那个排除因素，就是某一现象产生的原因。艾弗里的实验研究过程，据文献考证是可信的。艾弗里用于转化实验的细胞提取物，是除去了Ⅲ型S细菌多糖和大部分蛋白质的混合物。转化实验的第一步，Ⅲ型S细菌的细胞提取物转化活的Ⅱ型R菌，能转化。第二步，用不同的水解酶（脂酶、蛋白酶、RNA酶、DNA酶）分别除去里面的大分子物质，观察转化结果。从实验方法上看，与提纯某些物质来一一检验相比，艾弗里的研究使用的“排除法”，能避免当时已知物质类别的限制，因为“转化因子”有可能是一种未知的全新物质。实验结果表明没有新物质！他们得出的实验结论是：被分解掉的DNA极可能就是有活性的转化因子。第三步：提纯检验转化因子的理化特性：与DNA分子特性相似。实验结果已经产生，是否就可以确认“DNA是遗传物质”呢？2艾弗里实验结论与“四核苷酸”假设冲突引发的质疑推动了科学研究艾弗里的论文一经发表就立即引发了广泛的质疑。虽然质疑集中在DNA的纯度上，但问题的关键不在于质疑实验的哪一部分，而在于为什么要质疑？质疑的依据是什么？有两个原因值得探讨。一是科学理论的建立，需要满足两个基本要求：理论间的“无矛盾性”和经验检验上的“可证伪性”。艾弗里的实验结论与当时流行的莱文的“四核苷酸”假设严重冲突：DNA是由四个不同核苷酸组成的小分子物质！人们很难想象，结构如此简单的物质怎能担当起遗传物质的重任？面对冲突，就连艾弗里自己都被实验结果给震惊了，在1944年《关于引起肺炎球菌发生转化的物质化学性质的实验研究》论文中也“没有明确指出DNA就是遗传物质”，而是谨慎地说“当然也有可能，这种物质的生物学活性并不是核酸的一种遗传特性，而是由于某些微量的其他物质所造成，这些微量物质或者吸附在它上面，或者与它密切结合在一起，因此检测不出来。”显然，他引入了“辅助假设”，但仍对“DNA是遗传物质”留下悬念，“如果目前研究的结果能得到证实，那么就必须认为核酸具有某种生物学的特异性，但这种特异性的化学基础到目前还未能搞清。”

艾弗里的肺炎双球菌转化实验：背景——1926年肺炎球菌被命名时，学名是Diplococcus pneumonia(肺炎双球菌)，但1974年，它的学名被改为Streptococcus pneumoniae(肺炎链球菌)。在抗菌素发明之前，它一直是人类的主要杀手，使人患肺炎而死亡。它对小鼠的危害更严重，往小鼠体内注入一个肺炎球菌，就能导致小鼠因败血症而死亡。肺炎链球菌有具多糖荚膜的致病菌S型菌(Smooth,因菌落外观光滑)和非致病菌R型菌(Rough,因菌落外观粗糙)。荚膜有不同的构造，根据免疫反应可以分成I型、II型、III型等，细菌是否具有产生荚膜的能力，以及产生荚膜的类型，为“遗传特性”。S型菌经过突变可以产生R突变体，反之亦然，但是突变总是涉及丢失或获得产生一个特定类型荚膜的能力(如II-S↔II-R；而不是III-S↔II-R)。1928年，在英国卫生部任职的医生格里菲斯(Frederick Griffith, 1879-1941)对肺炎球菌的致病情况做了研究。当他把热处理的S细菌(III-S型)与活的R细菌(II-R型)的混合物注射到小鼠中时，尽管这两种细菌本身都不是致死的，但是小鼠还是死亡了！更重要的是，从注射了这类混合物而死亡的小鼠身上分离的到S型菌，而且是与加热杀死的S细菌相同的S型(III-S)，因此这些S细菌不可能是通过这些特定的R细菌突变而来的。格里菲斯将这种引起转化(transform)的未知物质称为转化因子(transforming principle)，他不知道转化因子的本质，但错误地猜想它可能是一种涉及到荚膜合成的蛋白质，或是一些作为细菌荚膜前体的物质。对此实验，不同的科学家分别做出三种解释：1 R型菌以某种方式使加热杀死的S型菌“复活”；2 (新拉马克主义理论)III-S品系死菌刺激小鼠体内产生免疫物质，后者刺激II-R品系突变成了III-S品系(直至1958年，仍有教科书把肺炎球菌转化实验当作新拉马克主义的定向诱导的例子)；3 III-S型菌的遗传物质进入II-R型菌，合成了III-S型菌的荚膜。实验——艾弗里和他的同事为了弄清转化因子是什么，分离提取了S菌的DNA、蛋白质和多糖等物质，然后分别加入已培养R型细菌的培养基中，结果发现：只有加入DNA，R型细菌才能转化为S型细菌。艾弗里还发现：如果用DNA酶处理S型菌的DNA，使DNA分解，就不能使R型细菌发生转化。艾弗里等人先做了一下三组实验：1、S型细菌的蛋白质+R型活细菌→R型菌落2、S型细菌荚膜中得多糖+R型活细菌→R型菌落3、S型细菌的DNA+R型活细菌→R型菌落+S型菌落；艾弗里等人发现实验步骤并不严密，于是艾弗里等人又做了第四组实验，S型细菌的DNA+DNA酶+R型活细菌→R型菌落实验将蛋白质与DNA分开，得出：III-S型菌的遗传物质进入II-R型菌，合成了III-S型菌的荚膜，而且该遗传物质是DNA。其他——R型细菌之所以能整合S型菌的有关DNA片段，转化为S型，与其自身的结构和特性有关。R型活菌在对数期后期内处于“感受态”（细菌能从环境中摄取DNA进行转化的状态，称感受态(competence)。对于感受态本质的解释，有人认为处于感受态的受体菌局部失去了细胞壁，使外源DNA能顺利经膜进入菌体，称局部原生质体假说。也有人认为是受体细胞表面出现了一直能结合DNA并使之进入细胞的酶，称酶受体假说）。被加热杀死的S型肺炎双球菌（供体菌）自溶，释放出自身的DNA片段，当DNA片段遇到感受态的R型活肺炎双球菌（受体菌）时，R型活肺炎双球菌（受体菌）细胞膜上的结合位点相结合，随后其中一条链被细胞膜上的核酸酶降解，降解产生的能量协助把另一条单链推进受体细胞（该过程称为DNA的结合和摄取）。当单链进入受体菌细胞后，便与受体菌DNA上的同源区段发生交换重组。再通过受体菌DNA复制、细胞分裂，而表现出转化的性状，于是就由R型肺炎双球菌产生出S型肺炎双球菌的后代。而S型肺炎双球菌有荚膜，无感受态，不能作为受体菌，所以在S菌的培养基中加入R菌的DNA，S菌不能被转化为R型。当然S型菌在自然状态下或人工的诱变下发生基因突变，S型菌可能突变为R型，但不是转化。

肺炎链球菌的体内转化实验科学家是谁实验结论是什么答案如下：肺炎链球菌的体内转化实验科学家是谁实验结论是暗物质（Dark matter）是理论上提出的可能存在于宇宙中的一种不可见的物质，它可能是宇宙物质的主要组成部分，但又不属于构成可见天体的任何一种已知的物质。

他当年发表的文章信息：STUDIES ON THE CHEMICAL NATURE OF THE SUBSTANCE INDUCING TRANSFORMATION OF PNEUMOCOCCAL TYPES: INDUCTION OF TRANSFORMATION BY A DESOXYRIBONUCLEIC ACID FRACTION ISOLATED FROM PNEUMOCOCCUS TYPE IIIOswald T. Avery, Colin M. MacLeod, and Maclyn McCartyJ. Exp. Med., Feb 1944; 79: 137 - 158. 附上1944年发表的原文免费下载链接——，

细菌性肺炎论文参考文献格式

论文参考文献的正确格式一般包括：书写格式、书写技巧、国家标准、文献标注、参考示例。

参考文献是在学术研究过程中，对某一著作或论文的整体的参考或借鉴。征引过的文献在注释中已注明，不再出现于文后参考文献中。

按照字面的意思，参考文献是文章或著作等写作过程中参考过的文献。然而，按照GB/T7714-2015《信息与文献参考文献著录规则》”的定义，文后参考文献是指：“为撰写或编辑论文和著作而引用的有关文献信息资源。根据《中国学术期刊（光盘版）检索与评价数据规范（试行）》和《中国高等学校社会科学学报编排规范（修订版）》的要求。

很多刊物对参考文献和注释作出区分，将注释规定为“对正文中某一内容作进一步解释或补充说明的文字”，列于文末并与参考文献分列或置于当页脚地。

参考文献格式包括：

1、著[M]、论文集[C]、报纸文章[N]、期刊文章[J]、学位论文[D]、报告[R]、标准[S]、利[P]、论文集中的析出文献[A] ；

2、常见的字体字号有两种：和文文本保持一致，或者比正文本字号小一号；

3、行距常见的有倍、22磅、倍；

4、缩进方式悬挂缩进、首行缩进、无缩进均有出现；

5、文参考文献中的标符号要胖角标点，粗按照英文输入的习惯，标点符号后应该加一个空格，中幅文献中的标点，可以和英文文献保持一致，全部使用半角标点+空格的形式，也可以全部使用全角标点，标点后不加空格。

论文参考文献字体格式是：4号黑体，内容为5号宋体。

论文的写作格式要求是：

1、论文标题2号黑体加粗、居中。

2、论文副标题小2号字，紧挨正标题下居中，文字前加破折号。

3、填写姓名、专业、学号等项目时用3号楷体。

4、内容提要3号黑体，居中上下各空一行，内容为小4号楷体。

5、关键词4号黑体，内容为小4号黑体。

6、目录另起页，3号黑体，内容为小4号仿宋，并列出页码。

7、正文文字另起页，论文标题用3号黑体，正文文字一般用小4 号宋体，每段首起空两个格，单倍行距。

8、正文文中标题：

①级标题：标题序号为“一”，4号黑体，独占行，末尾不加标点符号。

②二级标题：标题序号为“（一）”与正文字号相同，独占行，未尾不加标点符号。

③三级标题：标题序号为“1.”与正文字号、字体相同。

④四级标题：标题序号为“（1）”与正文字号、字体相同。

⑤五级标题：标题序号为“①”与正文字号、字体相同。

9、注释：4号黑体，内容为5号宋体。

10、附录： 4号黑体，内容为5号宋体。

11、参考文献：另起页，4号黑体，内容为5号宋体。

应该按照会议论文的形式吧，会议论文表示方法为：[序号] 作者.篇名.会议名,会址,开会年: 起止页。

论文中参考文献引用的是国家颁布的文件或纲领政策，要用N字母表示。

根据GB3469- 83《文献类型与文献载体代码》规定，以单字母标识：

M一专著(含古籍中的史、志论著)。

C一论文集。

N-报纸文章。

J一期刊文章。

D一学位论文。

R-研究报告。

S-标准。

P-专利。

A-专著、论文集中的析出文献。

Z一其他未说明的文献类型。

电子文献类型以双字母作为标识：

DB一数据库。

CP一计算机程序。

EB- 电子公告。

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DB/OL一联机网上的数据库。

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J/OL-网上期刊。

EB/OL一网上电子公告。

参考文献著录格式：

1、期刊作者题名[J]。刊名，出版年，卷(期)：起止页码。

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文献引用不符合要求

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（1）所列文献范围过宽，凡所参阅过的均列出其中，如教材、内部刊物、获奖过但并未公开发表的成果报告等。

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（4）对文献的理解偏面，以为只有引用文献原文才需要列出。

（5）大而不当，将整期刊物甚至连续几期杂志或整张报纸作为参考文献。

犬肺炎毕业论文

犬猫肺炎临床症状

肺炎是肺实质的急性或慢性炎症，临床上以高热稽留、呼吸障碍、低氧血症、肺部广泛浊音区为特征。本病的病因主要有：感染病毒、细菌侵害呼吸系统所致；饲养管理不良如受寒感冒、劳役过度等；变态反应，吸入某些过敏源、异物、花粉等都可能是本病的诱因；另外，部分被溶解了的细菌放出内毒素，以及细菌毒素和组织的分解产物被吸收后，可刺激机体产生特异性的免疫抗体，引起变态反应。

患病动物精神不振，食欲减退或废绝，体温高达40℃以上，稽留不退，脉搏增数可达每分钟100~150次，结膜潮红或发绀，鼻镜干燥，流鼻液，先为浆液性，后为黏液性或脓性，有时可见铁锈色鼻液，常有剧烈的疼痛性咳嗽；动物呼吸急促，可达每分钟50次以上，并伴有明显的腹式呼吸，呈进行性呼吸困难，有严重的缺氧症状，可视黏膜发绀。肺部听诊病初肺泡呼吸音增强，可听到湿性_音，随病程发展，肺泡呼吸音减弱直至消失，但肺泡呼吸音消失区周围的肺泡呼吸音增强；叩诊病变部呈浊音或半浊音，周围肺组织呈过清音。X线检查可见不同区域的大小不等的肺部阴影。白细胞总数增高，核左移，红细胞沉降反应加速；血小板减少；淋巴细胞减少。

爪爪博士建议

1、维普达阿莫西林粉抗菌消炎，针对感冒、肺炎等引起的结膜炎、发热等情况，一日一次，连用3-5日。

2、弗诺多，缓解感冒、肺炎引起的顽固咳嗽、窝咳等症状，内服：每1kg体重，犬、猫5~10mg。一日1次，连用3~5日。

3、止咳平喘化痰专用-诺克芬（普安特），专门针对犬猫咳嗽与支气管炎，中药成分，副作用小，较苦，按体重兑水服用，连用5天。

4、IGY抗特力补充免疫球蛋白因子，提升犬猫免疫力，减少犬猫感冒、炎症感染的几率。每日1次，每次1瓶，连续口服5日。

5、氢氯噻嗪片（普安特）排尿利尿，促进犬猫体内尿液排出，促进身体病菌排出体外，3-4毫克／千克体重。

6、宠物电解质浓缩液（普安特）补充电解质，帮助患病犬、猫恢复身体机能，猫：50ml/kg，犬：根据品种及体重服用，自由口服2-5天。

7、对于容易受凉感冒，发生过敏的犬、猫应该注意换季保暖，尽量减少外出频率。

犬猫肺炎治疗方案

以消炎、止咳、化痰、制止渗出为治疗原则，参照支气管炎和支气管肺炎的治疗方法。

1、青霉素、链霉素，犬：各80万单位／次，肌内注射，每日2次。

2、速诺（阿莫西林克拉维酸钾混悬剂），犬／猫：毫升／千克，肌内注射／皮下注射，每日一次。

3、硫酸卡那霉素，犬：10~15毫克／千克，口服，每日2次；5~7毫克／千克，肌内注射，每日2次，肾功能差者慎用。

4、头孢噻吩，犬：10~30毫克／千克，肌内注射／静脉滴注，每日3~4次。

5、复方新诺明，抗菌，15毫克／千克，口服／皮下注射，每日2次。

6、阿奇霉素，犬：5~10毫克／千克，口服，每日1~2次；猫：7~15毫克／千克，口服，每日2次，连用5~7天。

7、克林霉素，犬：10~毫克／千克，口服，每日2次。

8、两性霉素B,犬／猫：毫克／千克，溶于升5%葡萄糖溶液，静脉滴注，超过6~8小时，隔天一次，总剂量8~10毫克／千克，或不使尿素氮和肌酸肝水平升高。猫：毫克／千克，静脉滴注，隔天一次，总剂量5~8毫克／千克。

9、碳酸铵，犬：克／次，口服，每日2~3次。

10、10%葡萄糖酸钙5%氯化钙制止渗出，10~15毫升／次静脉滴注。

11、速尿，犬：2~4毫克／千克，静脉滴注／肌内注射／口服，每4~12小时；猫：毫克／千克，静脉滴注，每日3次。

12、可待因，犬：15~60毫克／次，口服／皮下注射，每日3次；猫：5~30毫克／次，口服／皮下注射，每日3次。

13、复方甘草片，犬：1~2片／次，口服，每日3次。

供氧。对于呼吸困难、严重缺氧的患病动物，应予以吸氧。

肺炎主要表现为咳嗽不断，有痰，有少量鼻清水，食欲废绝，精神萎靡，呼吸略有急促现象，肺炎和支气管炎但是简单的诊断是很难区分的，但治疗的方法基本一致，自己会给狗狗打针的话我可以给你一个办法；清开灵一支单打,(利巴伟林1支+地塞米松1支+头孢（儿童用量）对在一起打!!) 每天2次这样效果来的比较快另外口服清肺颗！每天2次！每次1代要是自己解决不了，那就只有去宠物医院了，不过记住不要叫那些黑心的医生给蒙了。预防措施：注意环境清洁卫生，冬天狗狗容易感冒，不要让狗狗在空调下面用暖风直吹，除非你想让它并的快点，适当的让它得到锻炼这样可以让它增加自身免疫力。

【临床症状】

支气管肺炎也称为小叶性肺炎或卡他性肺炎，是细支气管及肺泡的炎症。临床上以弛张热型，呼吸次数增多，叩诊有散在的局灶性浊音区，听诊有_音和捻发音为特征。多见于老龄和幼龄犬、猫。原发性病因多为饥饿过劳、受寒感冒，物理、化学等因素刺激，降低了机体抵抗力，使外源性和内源性致病细菌大量繁殖以致引起发病。继发性支气管肺炎常发生在犬瘟热、犬腺病毒病、犬疱疹病毒病、猫呼吸道综合征过程中。患病犬、猫精神沉郁，眼睛无神，眼分泌物增多。食欲不振或废绝，体温升高（40℃以上），呈弛张热。脉搏随着体温的变化而改变，病初稍强，随着病程的发展，频率逐渐加快。病初鼻镜干燥、流鼻液，咳嗽。听诊局部肺泡音增强，以后减弱或消失，有支气管湿性_音及捻发音。叩诊出现浊音区。重症犬、猫呼吸困难，出现明显的腹式呼吸，可视黏膜发绀。X线检查可见肺纹理增强，伴有小片状模糊阴影。血液学检查，白细胞总数大量增加，嗜中性白细胞增加。

【治疗方案】

主要以消炎、止咳、化痰、制止渗出为治疗原则。可参照支气管炎一些治疗方法。

［处方1]阿米卡星，犬：5~15毫克／千克，肌内注射／皮下注射，每日1~3次；猫：10毫克／千克，肌内注射／皮下注射，每日3次。

［处方2] 四环素，犬：15~20毫克／千克，口服，每日3次；猫：10毫克／千克，口服，每日3次。

［处方3] 速诺（阿莫西林克拉维酸钾混悬剂），犬／猫：毫升／千克，肌内注射／皮下注射，每日一次。

［处方4] 头孢噻肟钠，犬：20~40毫克／千克，静脉滴注／肌内注射／皮下注射，每日3~4次。

［处方5] 复方甘草合剂，犬：5~10毫升／次，口服，每日3次；猫：2~4毫升／次，口服，每日3次。

［处方6] 盐酸洛美沙星，犬：3~5毫克／千克，口服／肌内注射，每日2次。

［处方7] 10%葡萄糖酸钙，犬：10~15毫升／次静脉滴注。

［处方8] 麻碱，犬：5~15毫克，口服，每日2~3次；猫：2~5毫克，口服，每日2~3次。

［处方9] 碘化钾，犬：克／次，口服，每日2~3次；猫：克／次，口服，每日2~3次（慢性支气管炎）。

［处方10] 氯化铵，犬：克／次，口服，每日2~3次。

支气管肺炎的毕业论文

真心的劝你自己写吧，自己努力过才学到东西才发现到问题，否则你答辩的时候也狠难通过。

扣扣号是1135开头的，中间是452，结尾是139。他们做这个服务的

肺部炎症是呼吸系统的常见病，主要是由细菌、病毒或某些特殊病因所引起的肺部炎症。下面是我带来的关于肺部炎症的X线表现的内容，欢迎阅读参考!

(一)大叶性肺炎

[图像特征]

X线正位胸片：

(1)左上肺可见大片高密度影，密度均匀;

(2)病灶边界欠清楚。

CT平扫(肺窗)：

(1)右肺下叶背段大片高密度影，病变累及整个肺段;

(2)内可见通气支气管;

(3)左肺下叶见小片状高密度影，境界清。

[影像诊断] 左肺上叶大叶性肺炎;两肺下叶大叶性肺炎，右肺下叶背段较明显。

[临床提醒] X线胸片及CT均可用于大叶性肺炎的诊断，胸片较CT在临床的应用更为广泛。大叶性肺炎典型的影像表现为累及整个肺叶或肺段的实变影，受累肺叶或肺段的体积不缩小，内可见“含气支气管征”。结合典型的影像学表现及临床症状和相关实验室检查，诊断本病较容易，但因抗生素的广泛使用，典型的大叶性肺炎已不常见，偶见于老年人、使用免疫抑制剂等免疫力低下的病人。大叶性肺炎早期在X线上缺乏特异征象，部分可表现正常。CT可显示肺炎早期的充血改变，并能更好的显示病变的范围。

X线胸片及CT检查的目的还在于及时反映病情变化，从而观察治疗效果，指导临床治疗。

(二)支气管肺炎

[图像特征]

X线正位胸片：左下肺见小片状模糊影，左侧心缘模糊不清。

CT平扫(肺窗)：两下肺见多发斑片状高密度影，呈局灶性分布。

[影像诊断] 两下肺支气管肺炎。

[临床提醒] 支气管肺炎的X线表现多样，大多数表现为两下肺野中、内带沿支气管分布的不规则斑点状或小片状致密影，境界较模糊。病变密度不均匀，中心密度较高，多伴有肺纹理增粗。病变可以比较散在且较小，也可集中呈大片融合趋势，但多不局限于某一肺段或肺叶。由于粘液堵塞支气管，病变区域可夹杂有小叶性肺不张或局限性肺气肿。当细支气管阻塞时，也可形成小三角形肺不张影。小儿多首先发生在脊柱旁，然后向心缘发展，因此早期易被心影所掩盖。CT是本病的主要检查手段，结合病史一般能够确诊。少数病例仅表现为不规则粟粒样病变或仅为肺纹理增强。此时，影像诊断比较困难。

(三)病毒性肺炎

[图像特征]

X线正位胸片：

(1)两肺纹理增加，以两下肺野中内带明显;

(2)沿肺纹理分布见密度不均匀斑片状模糊阴影。

CT平扫(肺窗)：

(1)两上肺纹理增多、增粗;

(2)两肺上叶散在小斑片状高密度影。

CT平扫(肺窗)：

(1)两下肺纹理增多、增粗;

(2)两肺下叶散在小斑片状高密度影，左肺下叶外带见多发小结节影，边缘模糊。

[影像诊断] 病毒性肺炎.

[临床提醒] 病毒性肺炎在肺内蔓延方式与细菌性支气管肺炎类似。其影像表现有：①分布于两下肺野中内带的小结节影，结节大小6～8mm，边缘模糊;②分布于两肺中下野内带，密度不均匀斑片状模糊影;③相邻小叶的斑片影可融合成大片状阴影，占据肺段甚至肺叶。病毒性肺炎在影像学上很难与细菌性肺炎鉴别，两者鉴别常需结合临床症状及相关化验检查;另外，通过观察抗炎治疗效果，也有助于两者鉴别。病毒性肺炎的影像表现缺乏特异性，因此影像学检查的目的在于发现病变、观察疗效及排除其他肺部疾病。

(四)过敏性肺炎

[图像特征]

CT平扫：右上肺外带多发小斑片状模糊影，境界欠清。

CT平扫：两周后检查，原病灶消失，右肺下叶可见片状模糊影，边界欠清。

[影像诊断] 过敏性肺炎。

[临床提醒] 过敏性肺炎的影像表现有：①一侧或两侧肺中、下野沿支气管分布的斑片状或云雾状阴影;②两肺弥漫分布的粟粒状和网线状阴影，边缘模糊，以中、下肺野病灶较密集;③病变呈游走性，即在短时间内，处病灶吸收，另一处病灶又出现，为本病特征性的X线表现。结合病人对过敏原的过敏史，可确立诊断。

(五)肺脓肿

[图像特征]

X线正位胸片：

(1)左肺中野可见一类圆形透亮影，为空洞性病灶;

(2)空洞壁厚，外缘毛糙，内壁较光整。

CT平扫(肺窗)：

(1)左肺上叶见含气透亮影，内可见液平;

(2)壁厚，内壁光整;

(3)空洞外侧邻近肺野见小片状模糊影。

CT增强(纵隔窗)：

(1)左肺下叶见类圆形含气透亮影，内可见液平;

(2)壁厚，见强化;

(3)病灶右后方见小片状高密度影，提示肺实变。

[影像诊断] 左肺肺脓肿。

[临床提醒] 胸片及CT发现肺内含液平的厚壁空洞，结合畏寒、发热、胸痛及咯大量脓臭痰等临床症状，肺脓肿的诊断叮确立。胸片基本可以反映肺脓肿的影像特征，急性期肺脓肿表现为浓密的团状阴影中见厚壁的透亮空洞，内壁多光滑，空洞内见气一液平面;慢性期肺脓肿空洞变小，壁变薄，空洞周围见纤维索条。CT则较易显示肺脓肿的早期坏死液化情况，能及早确立诊断。

肺脓肿空洞在临床上常需与肺结核空洞、肺癌空洞鉴别。结核空洞有其好发部位(上叶尖、后段，下叶背段)，空洞较小，壁薄，周围常见卫星灶;肺癌空洞壁厚，多为偏心空洞，内壁不规则，外壁可见毛刺。CT增强检查能为鉴别诊断提供更多的帮助，参照临床症状及相关实验室检查，三者鉴别不难。

(六)肺部炎性假瘤

[图像特征]

X线正位胸片：

(1)右下肺内带见片状高密度影;

(2)病灶与右心缘重叠，显示欠清。

X线右侧位胸片：

(1)病灶位于右肺下叶后基底段，与脊柱重叠，密度欠均匀;

(2)病灶可见分叶，边缘毛糙。

CT平扫(肺窗)：

(1)右下肺见高密度占位;

(2)病灶形态不规则，边缘可见长短不一的条状毛刺。

CT增强(纵隔窗)：

(1)病灶不均匀强化，其内见低密度坏死区;

(2)边缘不光整，见棘状突起，内侧缘与胸膜粘连。

[影像诊断] 右肺下叶炎性假瘤。

[临床提醒] 肺部炎性假瘤是在某些非特异性炎症的增生、帆化基础上进一步发展而成。因此既往有肺炎病史的患者，胸片及CT发现肺内软组织肿块，再结合患者咳嗽、胸痛等症状，基本可诊断本病。当肺部炎性假瘤患者肺炎病史不明确时，X线胸片或CT发现肺内软组织肿块，需与结核瘤和周围型肺癌鉴别。炎性假瘤X线表现为圆形或椭圆形软组织块影，边缘多光滑锐利，密度中等偏高，多数密度均匀，偶有钙化，少数见空洞形成，周围有纤维索条影或斑片状阴影，常伴有局限性胸膜增厚、粘连。追踪观察，炎性假瘤生长多较缓慢;结核瘤内常见钙化影，密度较高，周围散在卫星灶;周围型肺癌常表现为分叶状肿块，其边缘可见细短毛刺，发现肺门或纵隔淋巴结肿大则有助于两者的鉴别。

CT检查(尤其是HRCT)可更清楚显示软组织块影的内部密度及周围情况，对于肺门及纵隔淋巴结是否肿大显示更佳。另外，CT动态增强可为肺炎性假瘤的鉴别诊断提供更多的信息。

参考文献

[1] 陈文彬,潘祥林,等.诊断学.第6版.人民卫生出版社，2004,9,(第6版).

[2] 戴瑞鸿.内科疾病诊断标准.上海：上海科技教育出版社，～198.