autophagy杂志投稿
细菌程序性死亡机制的研究及其应用：毒素-抗毒素系统被认为可以介导不良生长状况下细菌的生长抑制和死亡，即细菌的程序性细胞死亡(Bacterial Programmed Cell Death)。通过对毒素-抗毒素系统（包括MazEF系统和PemIK系统）的研究，确立以mRNA为靶位触发细菌死亡的新机制，并首次提出mRNA interferase的概念。在此基础上，将深入研究在结核分枝杆菌(M. tuberculosis)中毒素-抗毒素系统对细菌的生长调控及其生理和病理意义，利用这些内源的自杀基因产物研发控制致病菌群的新方法。同时，还将探讨毒素-抗毒素系统在生物技术领域的应用。保守的G蛋白Era的功能研究：Era由N端的GTPase结构域和C端的KH结构域组成。era基因不仅广泛存在于原核生物中，而且在真核生物 （如蠕虫、小鼠和人）的组织中都发现有与细菌era高度同源的基因存在。我们的工作旨在研究Era的生理功能，克隆Era结合蛋白基因，阐明其作用机理。2012年，张教授课题组首次提出了Era参与细胞自噬过程，并部分揭示了其中的分子机制，相关研究结果发表在国际权威杂志“Autophagy”。肿瘤迁移相关的基因表达调控和信号传导通路的研究。所涉及的基因包括：Autotaxin，iPLA2和OGR1 GPCR家族等。近年来，张教授课题组以Autotaxin基因为切入点，深入研究了生物活性脂类分子溶血磷脂酸的代谢调控机制及生物学功能，部分解释了ATX-LPA信号在感染免疫，肿瘤进程中的调控机制，发表了一系列研究论文。同时研究组还致力于探究溶血磷脂分子是否可以作为肿瘤进程标志物，开拓新的溶血磷脂研究方向。
1、 自噬的定义： 细胞自噬是真核生物中进化保守的对细胞内物质进行周转的重要过程。该过程中一些损坏的蛋白或细胞器被双层膜结构的自噬小泡包裹后，送入溶酶体(动物）或液泡（酵母和植物）中进行降解并得以循环利用。2、 自噬的过程： 从一张图片开始： 步骤1：细胞接受自噬诱导信号后，在胞浆的某处形成一个小的类似“脂质体”样的膜结构，然后不断扩张，但它并不呈球形，而是扁平的，就像一个由2层脂双层组成的碗，可在电镜下观察到，被称为Phagophore，是自噬发生的铁证之一。 步骤2：Phagophore不断延伸，将胞浆中的任何成分，包括细胞器，全部揽入“碗”中，然后“收口”，成为密闭的球状的autophagosome，我把它翻译为“自噬体”。电镜下观察到自噬体是自噬发生的铁证之二。有2个特征：一是双层膜，二是内含胞浆成分，如线粒体、内质网碎片等。 步骤3：自噬体形成后，可与细胞内吞的吞噬泡、吞饮泡和内体融合（加了个“可”字，意思是这种情况不是必然要发生的）。 步骤4：自噬体与溶酶体融合形成autolysosome，期间自噬体的内膜被溶酶体酶降解，2者的内容物合为一体，自噬体中的“货物”也被降解，产物（氨基酸、脂肪酸等）被输送到胞浆中，供细胞重新利用，而残渣或被排出细胞外或滞留在胞浆中。3 、自噬的特性： 1）自噬是细胞消化掉自身的一部分，即self-eating，初一看似乎对细胞不利。事实上，细胞正常情况下很少发生自噬，除非有诱发因素的存在。这些诱发因素很多，也是研究的热门。既有来自于细胞外的（如外界中的营养成分、缺血缺氧、生长因子的浓度等），也有细胞内的（代谢压力、衰老或破损的细胞器、折叠错误或聚集的蛋白质等）。由于这些因素的经常性存在，因此，细胞保持了一种很低的、基础的自噬活性以维持自稳。 2）自噬过程很快，被诱导后8min即可观察到自噬体（autophagosome）形成，2h后自噬溶酶体（autolysosome）基本降解消失。这有利于细胞快速适应恶劣环境。 3）自噬的可诱导特性：表现在2个方面，第一是自噬相关蛋白的快速合成，这是准备阶段。第二是自噬体的快速大量形成，这是执行阶段。 4）批量降解：这是与蛋白酶体降解途径的显著区别 5）“捕获”胞浆成分的非特异性：由于自噬的速度要快、量要大，因此特异性不是首先考虑的，这与自噬的应急特性是相适应的。 6）自噬的保守性：由于自噬有利于细胞的存活，因此无论是物种间、还是各细胞类型之间（包括肿瘤细胞），自噬都普遍被保留下来（谁不喜欢留一手呢？）。4 、自噬过程的调控： 从上面总结的自噬特点中可以看出，自噬这一过程一旦启动，必须在度过危机后适时停止，否则，其非特异性捕获胞浆成分的特性将导致细胞发生不可逆的损伤。这也提醒我们在研究自噬时一定要动态观察，任何横断面的研究结果都不足以评价自噬的活性。目前，已经报告了很多因素能诱导细胞发生自噬，如饥饿、生长因子缺乏、微生物感染、细胞器损伤、蛋白质折叠错误或聚集、DNA损伤、放疗、化疗等等，这么多刺激信号如何传递的、哪些自噬蛋白接受信号、又有哪些自噬蛋白去执行等很多问题都还在等待进一步解答中。 关于传递自噬信号的通路目前比较肯定的有： 抑制类 1）Class I PI3K pathway（PI-phosphatidylinositol，磷脂酰肌醇）与IRS (Insulin receptor substrate)结合，接受胰岛素受体传来的信号（血糖水平高抑制自噬） 2）mTOR pathway（mammalian target of rapamycin） mTOR在人类中的同源基因是FRAP1（FK506 binding protein 12-rapamycin associated protein 1），是一个丝/苏氨酸蛋白激酶。能接受多种上游信号，如Class I PI3K、IGF-1/2、MAPK，能感受营养和能量的变化,rapamycin是最典型最常用的自噬激动剂. 激活类 1）Class III PI3K 结构上类似于Class I PI3K，但作用相反。3-MA是Class III PI3K的抑制剂,因此3-MA可以作为自噬的抑制剂. 5 、自噬的研究方法： 正常培养的细胞自噬活性很低，不适于观察，因此，必须对自噬进行人工干预和调节，经报道的工具药有： （一）自噬诱导剂 1）Bredeldin A /Thapsigargin / Tunicamycin ： 模拟内质网应激 2 ）Carbamazepine/L-690，330/ LithiumChloride（氯化锂）： IMPase 抑制剂 （即Inositolmonophosphatase，肌醇单磷酸酶） 3 ）Earle's平衡盐溶液： 制造饥饿 4 ）N-Acetyl-D-sphingosine（C2-ceramide）：Class I PI3KPathway抑制剂 5 ）Rapamycin：mTOR抑制剂 6 ）Xestospongin B/C：IP3R阻滞剂 （二）自噬抑制剂 1 ）3-Methyladenine（3-MA）：（Class III PI3K） hVps34 抑制剂 2 ）Bafilomycin A1：质子泵抑制剂 3 ）Hydroxychloroquine（羟氯喹）：Lysosomal lumenalkalizer（溶酶体腔碱化剂）除了选用上述工具药外，一般还需结合遗传学技术对自噬相关基因进行干预：包括反义RNA干扰技术（Knockdown）、突变株筛选、外源基因导入等。 细胞经诱导或抑制后，需对自噬过程进行观察和检测，常用的策略和技术有： 1）观察自噬体的形成 由于自噬体属于亚细胞结构，普通光镜下看不到，因此，直接观察自噬体需在透射电镜下。Phagophore的特征为：新月状或杯状，双层或多层膜，有包绕胞浆成分的趋势。自噬体（AV1）的特征为：双层或多层膜的液泡状结构，内含胞浆成分，如线粒体、内质网、核糖体等。自噬溶酶体（AV2）的特征为：单层膜，胞浆成分已降解。（autophagic vacuole，AV） 2）在荧光显微镜下采用GFP-LC3等融合蛋白来示踪自噬形成：(常用) GFP-LC3单荧光指示体系：由于电镜耗时长，不利于监测（Monitoring）自噬形成。我们利用LC3在自噬形成过程中发生聚集的现象开发出了GFP-LC3指示技术：无自噬时，GFP-LC3融合蛋白弥散在胞浆中；自噬形成时，GFP-LC3融合蛋白转位至自噬体膜，在荧光显微镜下形成多个明亮的绿色荧光斑点，一个斑点相当于一个自噬体，可以通过计数来评价自噬活性的高低。双荧光指示体系：汉恒生物科技（上海）有限公司已开发出用于表达mRFP-GFP-LC3融合蛋白的病毒产品。mRFP用于标记及追踪LC3，GFP的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体，即由于GFP荧光蛋白对酸性敏感，当自噬体与溶酶体融合后GFP荧光发生淬灭,此时只能检测到红色荧光。 3）利用Western Blot检测LC3-II/I比值的变化以评价自噬形成。 自噬形成时，胞浆型LC3（即LC3-I）会酶解掉一小段多肽，转变为（自噬体）膜型（即LC3-II），因此，LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。 (Note：LC3抗体对LC3-II有更高的亲和力，会造成假阳性。方法2和3需结合使用，同时需考虑溶酶体活性的影响) 4) 利用Western Blot检测p62蛋白来评价自噬以及自噬流的强弱:起初自噬所降解的底物被认为是随机的,但是后来的研究表明有些蛋白是选择性降解的,在这些蛋白之中研究的最为透彻的是p62蛋白，p62蛋白水平的多少与自噬流的强弱有着反比例关系。 5）MDC或者Cyto-ID染色：包括自噬体，所有酸性液泡都被染色，故属于非特异性的。 6）Cell Tracker TM Green染色：主要用于双染色，但其能染所有的液泡，故也属于非特异性的。 6、自噬体的发生： 目前认为，自噬体的膜不是直接来源于高尔基体或内质网，而是在胞浆中重新生成的，但具体的机制尚不清楚。当beclin-1被活化后，胞浆中先形成很多个membrane source（自噬体膜发生中心），在它们不断扩展的过程中(phagophore到autolysosome)，VMP1蛋白由内质网和高尔基体转位到自噬体膜上（VMP1又叫TMEM49，已知唯一与自噬有关的 跨膜 蛋白），同时，MAP1-LC3由胞浆型（即LC3-I）转位到自噬体膜（即LC3-II），LC3这一转变过程可被Western Blot和荧光显微镜检测到，现已成为监测自噬体形成的推荐方法。7、自噬与细胞死亡的关系： 有必要说明一下的是，细胞死亡是一个非常复杂的过程，为了研究方便，需进行分类，但我们思考时不要局限于这些 人为的分类，而应注重于现象本身来研究其背后的机制。 一直以来人们从不同角度、用不同方法来观察细胞的死亡，并把细胞的死亡方式分为2类：坏死和凋亡，因为两者有着明显的区别，其中最主要的区别之一就是细胞膜的通透性——坏死细胞的细胞膜丧失了完整性，内容物被释放出来，染料可自由进入细胞，而凋亡细胞保持完整，无内容物释放，染料也被排斥。很多实验亦根据这一原理来设计以区分坏死和凋亡，这将在后面一一介绍，如同刚刚说明的那样，这些实验只能说明细胞膜的通透性（必要条件，不是充分必要条件），而不能用来证实坏死细胞或凋亡细胞。一般认为坏死是被动的，不可控的，而凋亡是主动的，可控的。为了强调这一点，凋亡被定义为程序性细胞死亡（program celldeath，PCD）。但无论是坏死还是凋亡，都是一个过程，是需要时间的（尤其是凋亡，从启动到完成，细胞要执行很多反应），而且细胞死亡后都有“尸体”。在研究自噬与凋亡的关系时，人们发现细胞死亡前胞浆中存在大量的自噬体或自噬溶酶体，但这样的细胞缺乏凋亡的典型特点，如核固缩（pyknosis）, 核破裂（karyorhexis）、细胞皱缩（shrinkage）、没有凋亡小体的形成等，被称为自噬样细胞死亡（autophagic celldeath，ACD），它是一种新的细胞程序性死亡，为了与凋亡区别，被命名为Type II cell death，相应的，凋亡为Type I cell death，坏死为Type III cell death。尽管这样，但对于自噬是否是细胞死亡的直接原因目前还存在很大的争议。到底是Cell death by autophagy（自噬引起死亡）还是Cell death with autophagy（死亡时有自噬发生，但不是直接原因）？对此，自噬研究领域“大牛”级专家Levine Beth在一篇nature的Review中表达了自己的观点。由于在形态学上2者无明显区别，但通过阻断自噬，观察细胞的结局可区分开来：Cell death by autophagy细胞存活，而Cell death with autophagy细胞死亡。8、自噬与肿瘤的关系： 与凋亡（在肿瘤细胞中一般都存在缺限）不同，自噬是被优先保留的。无论是肿瘤细胞还是正常细胞，保持一种基础、低水平的自噬活性是至关重要的。因为细胞中随时产生的“垃圾”（破损或衰老的细胞器、长寿命蛋白质、错误合成或折叠错误的蛋白质等等）都需要及时清除，而这主要靠自噬来完成，因此， 自噬具有维持细胞自稳的功能 ；如果将自噬相关基因突变失活，如神经元会发生大量聚集蛋白，并出现神经元退化。同时，自噬的产物，如氨基酸、脂肪酸等小分子物质又可为细胞提供一定的能量和合成底物，可以说， 自噬就是一个 “ 备用仓库 ” 。如Atg-5缺陷的小鼠在出生后喝上第一口奶之前就会饿死。更重要的是，自噬活性可在代谢应激（饥饿、生长因子缺乏、射线、化疗等）时大大增强，表现为胞浆中迅速涌现大量自噬体，这一现象被称为“自噬潮”（autophagic flux），广泛用于自噬形成的监测。自噬潮为细胞度过危机提供了紧急的营养和能量支持，有利于细胞的存活。 鉴于自噬的上述作用，自噬可为肿瘤细胞带来几大好处： 1 ）肿瘤细胞本身就具有高代谢的特点，对营养和能量的需求比正常细胞更高，但肿瘤微环境往往不能如意，如肿瘤发生初始期到血管发生之前、肿瘤长大发生血管崩塌时、肿瘤细胞脱离原发灶游走时等都会出现营养不足或供应中断，而此时提高自噬活性可以有助于度过这一危机。 2）当化疗、放疗后，肿瘤细胞会产生大量的破损细胞器、损坏的蛋白质等有害成分，而此时提高自噬活性可及时清除这些有害物质，并提供应急的底物和能量为修复受损DNA赢得时间和条件。由于自噬减少了肿瘤细胞在代谢应激时发生坏死的机会，而对于肿瘤细胞群体而言，需要一部分细胞发生坏死，以引发适度的炎症（有利于血管的长入、吸引免疫细胞分泌生长因子等）。研究发现，很多类型的肿瘤在代谢应激时会“组成性”活化PI3K信号以抑制自噬（由于凋亡通路已受阻，抑制自噬会促进坏死），但具体机制尚不清楚。自噬与肿瘤的关系可能是双重的。①对不同的细胞，自噬的作用可能不同。②相同的细胞在不同的外部因素作用时，自噬的作用可能不同。③在肿瘤发生发展的不同阶段，自噬的作用可能不同。肿瘤生长的早期阶段自噬增强，是由于此时肿瘤的血管化作用不足，癌细胞的营养供给有限，需要通过自噬为自身提供营养。肿瘤进入发展阶段后基因变异积累，使包括 Beclin 1在内的众多抑癌基因失活，自噬活力降低。④对单个细胞和对整个肿瘤阻滞的作用可能不同。自噬功能不全的细胞易于坏死，但是坏死组织产生的细胞因子（包括部分生长因子）反而会促进肿瘤的生长。上述各种假设均有待证实。肿瘤为细胞分化障碍性的疾病已得到肯定，但自噬在肿瘤细胞的分化抑制过程中起着什么样的作用，自噬水平提高是抑制分化甚至导致去分化还是促进分化等问题尚未解决。 9、在研究自噬相关蛋白时，需对其进行定位。由于自噬体与溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体关系密切，为了区别，常用到一些示踪蛋白在荧光显微镜下来共定位： Lamp-2：溶酶体膜蛋白，可用于监测自噬体与溶酶体融合。 LysoTrackerTM探针：有红或蓝色可选，显示所有酸性液泡。 pDsRed2-mito：载体，转染后表达一个融合蛋白（红色荧光蛋白+线粒体基质定位信号），可用来检测线粒体被自噬掉的程度（Mitophagy）。 MitoTracker探针：特异性显示活的线粒体，荧光在经过固定后还能保留。 Hsp60：定位与线粒体基质，细胞死亡时不会被释放。 Calreticulin（钙网织蛋白）：内质网腔 Note：这些蛋白均为胞浆蛋白，爬片或胰酶消化的细胞在做免疫荧光前需先透膜（permeabilize），可采用0.1%SDS处理 自噬与细胞死亡经常需一起考虑，下面介绍一些检测细胞死亡的方法： 1）△ψmdissipation（线粒体跨膜电位的消失）：TMRM发红色荧光，DiOC6（3）发绿色荧光。 2）Phosphatidylserine Externalization（磷脂酰丝氨酸外翻）：Annexin V-FITC（绿色）染细胞膜。 3）检测线粒体产生的ROS：无荧光的HE（hydroethidine，氢化乙啶）可被ROS氧化为EthBr（ethidium bromide，溴乙啡啶），发红色荧光。NAO（nonylacridine orange，烷化吖啶橙，可发荧光）能与非氧化的cardiolipin（心磷脂，可被ROS氧化）反应而失去荧光。 4）线粒体IMS蛋白的释放：AIF，细胞色素c，分别用荧光二抗染色。 5）Capase 3a 染色：用荧光二抗染色，胞浆弥散分布。 6）细胞膜完整性检测：DAPI（蓝色）、Hoechst 33342或PI（红色）染核。胞膜完整的细胞（活细胞和早中期凋亡细胞）排斥，可联用annexin V。 10、如何用实验区分Cell death by autophagy和Cell death with autophagy？ 第一步：利用上述方法证实细胞死亡 第二步：证实细胞死亡前发生了自噬 第三步：在形态学上区别开“自噬样死亡”与凋亡 第四步：利用遗传学手段（反义RNA干扰Knockdown掉Atg基因或hVps34）或工具药抑制自噬 第五步：细胞存活则为Cell death by autophagy，反之，细胞死亡则为Cell death with autophagy。 自噬的抑制根据自噬形成的过程，自噬的抑制也分为不同的阶段，包括自噬的起始阶段，自噬泡和溶酶体融合阶段，以及溶酶体内的降解阶段。目前常用的一些抑制药物如下： 1）对自噬体形成的抑制：主要是PI3K通路的抑制剂（如3-MA, Wortmannin，LY294002等），这些药物均可干扰或阻断自噬体形成。3-甲基腺嘌呤（3-Methyladenine,3-MA）是磷脂酰肌醇3激酶的抑制剂，可特异性阻断Autophagy中自噬体的形成，被广泛用作Autophagy的抑制剂。另外，渥曼青霉素（Wortmannin）、LY294002 也可用作Autophagy的抑制剂。 2）对自噬体与溶酶体融合的抑制：对自噬体与溶酶体融合过程进行阻断也能起着抑制自噬的作用，这些药物有巴伐洛霉素A1、长春碱、诺考达唑等。巴伐洛霉素A1（Bafilomycin A1）是一种来源于灰色链霉菌的大环内酯类抗生素，分子式C35H58O9，是空泡型H+-ATP酶的特异性抑制剂，具有抗菌、抗真菌、抗肿瘤等作用。当突触小泡经历胞外分泌时，巴伐洛霉素A1可以避免小泡重新酸化。有研究表明，在已发生自噬的肿瘤细胞中加入巴伐洛霉素A1，可使蛋白降解被抑制，自噬体增多而自噬溶酶体数目减少，并且自噬体中的酸性磷酸酶的活性也明显降低，从而证明其阻断了自噬体与溶酶体的融合过程。这种阻断是可逆的，在去除了药物作用后，自噬体仍可以与溶酶体融合形成自噬溶酶体，继续自噬进程。 3）对溶酶体降解的抑制:自噬体与溶酶体融合后最终被溶酶体中的水解酶水解，它首先经过囊泡酸化，达到所需的PH值后经多种蛋白酶作用使囊内容物降解，降解产物在细胞内再循环利用。对溶酶体的降解进行抑制，使得被降解的囊泡内容物大量蓄积于溶酶体内，而不能释放出来进入细胞内再循环利用，这也同样起着抑制自噬的作用。因此，蛋白酶抑制剂，如E64d、Pepstatin A等，在抑制溶酶体降解的过程中发挥着自噬抑制剂的作用。E64d和Pepstatin A均属于蛋白酶抑制剂，二者以1：1的比例联用可以抑制自噬。有研究表明，在结肠癌细胞系中联用E64d及Pepstatin A，可明显抑制溶酶体的降解从而阻断自噬的进展，而自噬体的形成并没有受到明显影响。11 、自噬领域的大牛们： 1）YoshinoriOhsumi博士。日本科学家，克隆了第一个酵母自噬基因Atg1以及LC3，主要成果在酵母模型下自噬研究； 2 ）Daniel J. Klionsky博士。美国科学家，主要成果在酵母模型的自噬研究。最早在《Science》上发表综述介绍自噬，2005年创办了第一本自噬杂志《Autophagy》；2007年举办了第一次自噬国际会议，为自噬的宣传做了大量工作。 3 ）Noboru Mizushima博士。日本科学家，2001年主要报道了Atg5的功能，被认为是哺乳动物分子机制研究的第一环，以及参与克隆自噬标志物LC3，而且制备了一些ATG基因敲除老鼠以及LC3转基因老鼠； 4 ）Beth Levine博士。美国科学家，首先克隆了第一个哺乳动物自噬基因Beclin 1； 5 ）Guido Kroemer博士。法国科学家，是细胞凋亡和死亡领域中引用率第一的科学家。在细胞凋亡研究中作出了卓越贡献而且涉猎及其广泛。目前也从事自噬研究，例如p53，Bcl2家族与细胞自噬。 6 ）Tamotsu Yoshimori博士。日本科学家，2000年克隆了目前广泛使用的自噬标志物LC3文章的通讯作者，而且也参与了2010年ATG5机制研究，是通讯作者之一。在方法学上也有关键贡献。目前主要研究ATG14和ATG16。值得注意的是，上述三位日本科学家合作紧密，克隆了目前大部分的ATG基因，经常共享文章通讯作者。 7 ）Patrice Codogno博士。法国科学家，2000年首先证实了PI3K信号通路在自噬的作用，I型抗自噬，III型促自噬，是自噬信号通路的开拓者。 8 ）Ana Maria Cuervo博士。美国科学家，是分子伴侣自噬的开拓者。 9 ）David Rubinsztein博士。英国科学家，2004年首次报道了mTOR与自噬的关系，抑制mTOR促进自噬。目前利用rapamycin诱导自噬成为经典模型之一。2010年Nature的报道首次证实了自噬对mTOR的负反馈调节。 12 、自噬信号通路： 1 ） KEGG 2 ） Abcam 3 ） CST 4) Enzo 13、我在做自噬课题中的一些心得： 自噬小体的增多有两种可能：一是形成增加即自噬被诱导；另外一种是自噬体成熟受抑即自噬体不能和溶酶体结合。该怎么来判断呢？自噬体增多，也就是“自噬潮”出现的原因一是形成增多，二是与溶酶体融合受阻（如使用了氢化氯喹或氯喹，另外，溶酶体的酶抑制剂和质子泵抑制剂的使用亦有可能影响溶酶体与自噬体或异噬泡的融合），使自噬体不能降解而积聚，这种积聚造成的自噬体增多的效应要大于自噬体诱导剂效应的数倍之多。鉴于这样的原因，单纯的GFP-LC3荧光斑点增多不足以作为自噬激活的证据，可联用多个方法来判断： 1 ）加用自噬体与溶酶体融合的抑制剂，如氯喹，观察自噬潮的变化。 2 ）或加用LC3和溶酶体示踪物在荧光显微镜下观察共定位情况。 3 ）或Knockdown掉LAMP-2基因（溶酶体膜蛋白）。 4 ）检测胞浆长寿蛋白的降解。 WesternBlot 检测LC3时除了上述的原因外，还有几个需考虑到的地方： 1 ）抗体的亲和力：有报道认为LC3抗体对II型LC3的亲和力较高 2 ）结合于自噬体内层膜的LC3-II在与溶酶体结合后被降解。 3 ）自噬过程很快，一个自噬体从产生到降解仅需2~3个小时或更短，其中自噬体形成阶段更迅速，数分钟即可完成，而溶酶体降解阶段耗时相对较长。因此，设置多个检测时间点（time frame）是非常重要的。
autophagy期刊投稿过程
是，SCI一区期刊名字 Autophagy 期刊ISSN 1554-8627 2015-2016最新影响因子 9.108 是否OA开放访问 No 通讯方式 LANDES BIOSCIENCE, 1002 WEST AVENUE, 2ND FLOOR, AUSTIN, USA, TX, 78701 涉及的研究方向 生物-细胞生物学 出版国家或地区 UNITED STATES 出版周期 Monthly 出版年份 2005 年文章数 163
ups与自噬取决于，UPS和自噬形成了一个相互联系的质量控制网络，在该网络中，决定性因素是生物物理参数（结合亲和力、局部浓度以及亲和力）和分区（通过膜、液-液相分离或聚合）。研究人员重点介绍了细胞质量控制因素，这些因素揭示了它们如何向大分子复合、液-液相分离的亚细胞结构或膜结合细胞器的不同部署。最后，研究人员强调需要不断深入定量和机理研究，以了解UPS和自噬在人类病理生理学中的作用。
cell cycle是细胞生物学分类下的 3 区期刊，一审速度一般在4-6周。 landes bioscience的期刊一般比较快。Cancer Biology & Therapy也是这样。 5分以上的杂志，对PAPER的要求很高，尤其是对格式上的要求细致入微，建议严格按照INSTRUCTION编辑。总体感觉偏基础，有动物实验的PAPER不多。要用基础研究的思路来写，分子生物学的实验数据要多些。 出版社或管理机构 杂志由 LANDES BIOSCIENCE 出版或管理。 ISSN号：1538-4101 杂志简介/稿件收录要求 Cell Cycle is not just about cell division. We cover topics from man to virus, from DNA to RNA, from ageing to development, from cell senescence to stem cells, from adhesion to autophagy, from cancer to immunity, from neurobiology to molecular therapeutics, from theoretical biology to therapy.
杂志社杂志投稿
怎样给杂志社投稿：
一、是在杂志社官方投稿系统中注册、按照指示投稿。
二、是邮箱投稿，即把论文发给杂志社官方邮箱。
投稿前注意事项：
1、了解杂志社的投稿要求，比如字数，文章类型，格式要求，投稿方式要求等等，即使是邮箱投稿也有的杂志社会要求在邮件怎么写。
2、了解杂志社需不需要投稿时就要上传《单位介绍信》、《版权转让说明》。
3、可以多方面打听你想投稿的期刊审稿周期长短、投稿难易程度等等，有的期刊比较坑，投稿周期贼长还态度不好，大家要学会及时止损。
现在比较流行电子邮件投稿！研究透杂志风格，跟编辑多交流！好的杂志会在1个月内给你回复!1.格式：word或纯文本格式！2.怎样投稿到杂志社：强烈推荐用电子邮件，这样回复快！3.有什么要特别注意：写清楚投稿给杂志的哪个栏目，你的地址、邮编，你的电话，方便编辑联系你！最好标明字数，段落分好，不要有错别字！4.稿酬的类别：个杂志不一样，总体来说，记实类稿件高，故事类的也不错，200-300元/千字！校园的50-200元/千字！5.你把你的真名字写上，这是必须的，笔名也可以写上，注明你用笔名发表！等到邮寄稿费时，编辑自然写的真名，而不是笔名！这个你不用担心。
投稿杂志期刊杂志
可以投稿的杂志有《中国青年》、《作品》、《东方文学》。
1、《中国青年》
这是一本95岁的杂志，永远和青年在一起，笃信思考的力量，澎湃生活的热望。有坚守，有改变，警惕说教，欢迎探讨。稿件类型是书评、影视评、海外见闻、生活故事随笔、文化随笔、心灵励志故事等。暂时可能不适合接收诗歌、散文类投稿。
投稿方式：在「投稿指南」公众号回复关键词“中国青年”，获取投稿邮箱。
2、《作品》
有60年历史的《作品》杂志，2017年再次华丽转身——做中国最好的“真文学”杂志。我们在寻找你，有风骨，有态度，有才情，有腔调，有内容，可以玩形式，但内涵为王。关注现实，心怀苍生，在纷繁的世相里，不缺席，不逃避，发出写作者的最强音。
投稿方式：在「投稿指南」公众号回复关键词“作品”，获取投稿邮箱。
3、《东方文学》
《东方文学》杂志由中国作家协会网络文学委员会首批会员单位《东方文学网》原创文学网站主办。自创刊起，《东方文学》一直坚持以“弘扬民族文化、发掘优秀作品、打造汉语高地”为己任，力图成长为国内优秀纯文学杂志期刊。
投稿方式：在「投稿指南」公众号回复关键词“东方文学”，获取投稿邮箱。
大学生可以投稿的杂志有：
1、青年文摘
由共青团中央主管、中国青年出版社主办，创刊于1981年1月，自2000年起改为半月刊，是中国发行量最大的青年杂志，单期发行145-150万册。 《青年文摘》是一本面向全国、以青少年为核心读者群的文摘类综合刊物，刊物集萃来自报纸、期刊、图书等大众媒体的名篇佳作，旨在为青少年打造一个丰富生动、健康向上的精神空间。刊物分上下半月刊（上半月刊红版，下半月刊绿版）、彩版（ 半月刊 ）。
2、《中国青年报》
是中国共产主义青年团中央机关报，是以中国各族青年和中国共产主义青年团团员和干部为主要读者对象的全国性综合日报。毛泽东同志为中国青年报题写了报名。中国青年报作为中宣部直管的中央级大报，以“推动社会进步，服务青年成长”为己任，服务一代又一代的青年。
3、《人民文学》
《人民文学》是中国作家出版集团出版的文学期刊，由中国作家协会主管。主要刊登小说、散文、诗歌和报告文学等纯文学作品。 人民文学创刊于1949年10月25日，是新中国第一份文学期刊，毛泽东曾为《人民文学》创刊号题词“希望有更多好作品出世。
4、《星星诗刊》
是中国当代诗坛创刊最早专业诗歌刊物。创刊以来，一直保持前沿、开放的姿态，以推介中国新诗最新成果、展现诗歌文本演变为己任，见证了诗坛的繁荣和诗歌新人的崛起。2004、2005连续两年荣获国家期刊奖，国家中文类核心期刊。是中国诗坛具有权威性、经典性的专业诗歌刊物。
参考资料：百度百科-青年文摘
百度百科-中国青年报
百度百科-人民文学
百度百科-星星诗刊
诗歌类适合投稿于《星星诗刊》，《诗刊》等。其它是是一些民刊，但不一定会有稿费，可以做为交流。而《读者》有个原创版的，也可以投下试试，其它如一些杂志也可行试试。小说类适合投稿于可尝试投《上海文学》，《北京文学》，《人民文学》等大刊物，也可以写一些校园或青春文学等，投《80后》《萌芽》等。散文类适合投稿于一些青春时尚刊物。因为不大注意这个了，所有举不出来了！杂文类适合投稿于《读者》《杂文选刊》等。其它如《中国校园文学》《意林》等也可以根据自己情况投下试试。
杂志期刊杂志投稿
怎么向杂志社投稿？ 现在比较流行电子邮件投稿！ 研究透杂志风格，跟编辑多交流！好的杂志会在1个月内给你回复! 1.格式：word或纯文字格式！ 2.怎样投稿到杂志社：强烈推荐用电子邮件，这样回复快！ 3.有什么要特别注意：写清楚投稿给杂志的哪个栏目，你的地址、邮编，你的电话，方便编辑联络你！最好标明字数，段落分好，不要有错别字！ 4.稿酬的类别：个杂志不一样，总体来说，记实类稿件高，故事类的也不错，200-300元/千字！校园的50-200元/千字！5.你把你的真名字写上，这是必须的，笔名也可以写上，注明你用笔名发表！等到邮寄稿费时，编辑自然写的真名，而不是笔名！这个你不用担心。 怎么向杂志社投稿 现在都是电子邮箱投稿的，还有很多，你去靠谱的约稿网站看各大杂志的靠谱约稿，我知道的就有很多，你问的那些，约稿上都有注明，不要轻易加编辑qq，很多编辑都说，最讨厌加了qq来问，你要什么稿子，因为空间里都有约稿要求。 你说的这两个都比较难投，不过稿也不会有回复，因为是牛刊，编辑忙，不缺写手，新手，我建议还是投一些对新手比较接纳，编辑比较有爱的杂志比较好吧，免得石沉大海也不知道自己差在哪里，灰心丧气一蹶不振。 如何给杂志社投稿 如果楼主以前没什么发表经历，我个人觉得不要太好高骛远，以免打击太大，一蹶不振（很多写手都是这么放弃的），可以先从校园青春杂志开始投稿，等熟悉圈子和杂志文的大致要求，也有了做编辑，写手的朋友后，积累了一定人气，那么慢慢进军更好的杂志也是水到渠成，在中国，没什么一步登天的事儿（黑幕的不算），而且写文字来就是个漫长的过程。 不过我个人觉得一本杂志一个月大概就10来篇吧。全国各地的写手都在投稿，如果你要竞争上岗，必须有与众不同的亮点吧，如果楼主真的愿意走写文这条路，也打算好好修炼水平，提高文笔，写好了去投稿让更多的人看到，那么我可以介绍你去这个写作班，里面有很多志同道合，交流写文的写手，也有很多杂志出版的资讯，大家互帮互助，气氛和谐，成功的人很多，但真正要发表，前期还是要有毅力了。 写小说写纪实写散文写故事写作文写影评写采访，只要写得好，风格符合杂志或者报纸的需要，又有熟人编辑，上稿也不是特别难，但有好的约稿资讯，有一个写手的圈子也是非常重要的，前者可以找寻适合投稿的地方，后者可以互相交流，提高水准。有的人写得再好，没有一定的投稿资讯，投个3，4次都不中，就会觉得我这文大概不行，然后压箱底了，我的不少文，都是投了10次以上再发表的，现在干脆把5年前写的文拿出来翻新修改一下继续拿出去投，也中了。所以说不仅写文需要毅力，投稿也需要毅力啊……可以尝试很多很多同类的约稿，听取那些编辑对你文章的建议，这个很关键。 百度里搜寻，天使领域，第一个论坛，浮云殿版块。注册下就能看见，是一个写手编辑聚集的私人向交流论坛，网路小说类杂志约稿，这里的资讯最及时了，分类也清楚。而且最重要的，不会被稿。 这里约稿很多，型别也多，粉红和蓝色都是比较有信誉的，如果编辑比较负责，友爱的，下面一定有回复的，你按照自己文章的型别风格参照约稿去投吧。 稿费标准在标题上，还有分类，你选择杂志型别，字数栏目都在帖子里，新手要投稿，可以先看置顶贴里的扫盲课。（比如不能乱用标点，一出手可能就被编辑b掉了，而且标点一定要用全形，还有全文基本不能有错别字，投稿要贴正文，邮件标题怎么写，联络方式写哪些，对编辑的用语，另投时间，如何修改文章等等一些常识）每个杂志约稿的回帖都是写手投稿反馈和经验，最好看看，最重要的是，这里资讯更新很快，能及时了解编辑离职交接，杂志运作情况，如果出现拖稿费等现象也能马上知道，停止投稿，在网路上这样资源共享的资讯地，不多，非常少。在这里混过了，你基本就不会去其他地方找约稿了= = 你自己去翻下约稿吧，太多了。这个懒是不能偷的，有助你摸清各类杂志的要求和风格，过这类杂志，也真的不是太难，要有信心，多修改自己的文，就好了。其实没有所谓录用率高的杂志，实力，努力加运气就可以了。如果你被退稿很多，可以去论坛其他板块（比如女王教室和点将版块）看下别人的文和下面的评论，也许可以知道自己写文的弱点，被退稿么很正常，原因也有很多，但只要听取别人的意见，努力修改提高，基本就能发表了，拿到稿费和样刊，特别是发表在自己喜欢向往的杂志上，是一样非常快乐和有成就感的事情啊，所以要努力。 怎样向杂志社投稿 1,如何通过电子邮箱投稿? 只需把你打车文章,一般用WORD格局,作为附件发到编辑部的邮箱即可,正题写上投稿. 正题写上你的文章名字和要投的栏目 2,.向一些刊物的电子邮箱投稿有什么讲求吗？ 第一步，网上投稿要有一个的邮箱，邮箱就是你和编辑联络的最好方式，另外，一个QQ也是不可少的！很多时候可以加一些编辑以及笔者，各人可以多多交流。 第二步就是实战阶段。 在看清哪些杂志和报馆需要稿子往后，就可以投稿了（注：肯定是要选那些有信誉的杂志，不然有些杂志发表了可能拖欠稿费！） 针对自己的稿件，选择适合的杂志。你总不克不及把你写的恋爱小说投到人民日报去吧！嘻嘻~~~~ 底下着意介绍一下投稿格局： 首先，在邮件的正题内里一般要标明：投稿（有的人是提建议啊什么的，这样便于编辑区分！）、投稿的栏目（如果你很熟悉那本杂志，或者那本杂志的征稿讯息很详细，肯定是要标明栏目，这一点是加印象分的关键！）还有就是作品名称（便于日后编辑找到你的稿子）。以上是最基本的三要素。 然后就是正文了，一般可以加一些问候之类的言语，但不要太多。贴上文章（注：一般都把自己的文章直接贴上在正文中，没有特殊要求，不要以附件形式传送。还有，要以简朴为主，不要搞什么信纸啊，插图啊） 最后，在末尾留下你的联络方式，一般采用这个格局： 真名： 笔名： 地址： 邮编： 邮箱: QQ： （越详细越好） 这样，编辑就可以很方便的在人山人海中找到联络你的方式了！ 最后一步，就是等吧！ 这段时间是最难过的，但也是最有意义的。每一天城市登陆邮箱，看有无新邮件。哪怕是退稿信！ 一般，如果2~4周没有回复，那么代表你落选了，就可以把稿件投给其他地方 小窍门：固定用一个邮箱，不要总是换。多在网上跟其他妙手学习，虚心讨教。如果你觉得你的文章真的太好了的话，可以思量一稿多投，但也不要太贪婪，不然被发现就没有稿费了哦，一般给一个好点的杂志投，再给另一个小点的投，或者给报纸投，再给另一个风牛马不相及的杂志投，这样，稿费就多了两份，呵呵~~但原则上我们还是不鼓励一稿多投。现在有些杂志接收二手稿了，只要注明原发地在哪里即可！ 好了，最后祝你的文章早发表！ 怎么向杂志社投稿 您好 ，九品论文很高兴为您解答，希望能帮助到您。 九品论文专注论文帮发帮写 请问您的论文是什么方向的呢?我们这边可以帮您呢 怎么向杂志社投稿？以及注意事项！1 我也经常去投稿的，但是很难被采用。呵呵。凭自己的经历我觉得应该写全自己的个人资讯，比如：姓名，笔名，电话，手机，邮箱，qq，还有一个详细的能够联络到你的地址。此外，文章要有文采，或者是内涵。这么久的投稿，我感觉最重要的就是文章的主旨的把握，有时候自己觉得写的不错了，但是有时候往往不符合杂志社的要求。其实，最主要的是看你写的文的风格适合哪个杂志社，这个选对了，也算稍稍的成功了。还有就是用邮箱投稿投一次就好了，很多杂志社不让一稿多投的。还有如果用邮件发稿，杂志社有的要求用附件的格式投稿，有的就是用平常的邮件传送。这个你要看好杂志社的要求。其实最主要的就是文章的质量。希望你的文章早点被采用哈~~加油~~~ 如何给报社和杂志社投稿 常有人问：你发表了文章，你否在该杂志社有关系。我肯定地说：“我不认识杂志社的人，只要你的文章质量高，一定有地方发表”。又有说，我的文章投出去怎么就没有发表，有多种原因：你的文章质量不高；虽然质量高但投错了地方，不信你将一篇研究中学化学教学的论文投到《有机化学杂志》看结果如何，这就是投错了地方。下面结合笔者自己的体会，谈谈怎样提高投稿的命中率。 大多数报刊杂志都有相对稳定的作者群和稿源，要在激烈的用稿竞争中获胜，为自己争得一席之地，使自己的作品尽可能变成铅字，让你的研究成果为更多的人认可和受益，也让大家与你共同分享成功的喜悦，投稿时须注意以下5个问题： 1.投稿要对路 每种报刊杂志都有自己特定的办报（刊）方针和宗旨，有自己的读者物件，投稿前必须先对此进行了解，搞清它的发行出版周期是双月刊、季刊、月刊还是半月刊、周刊，如果是报纸的话，是日报、周二报、周报还是半月报、月报，接下来要了解各种报刊都开设了哪些栏目，各栏目都发表些什么样的文章，可能的话还应该了解一下报刊的办刊历史，看看近年都发表过什么样的文章，对照一下你研究的问题以及撰写的论文原来有没有人研究过写过，研究现状如何，原来发表过的此类文章是从哪些角度写的，你的文章有无创新发展。此外，还应对报刊的发稿动态和走向以及下一步热点稿件是哪一类进行研究，最后看看你撰写的文章适合于哪些报刊的哪些栏目，投寄时最好在信封上注明栏目名称，以便于编辑人员及时准确地处理稿件。要做到这一点，平时对有关报刊必须多看、多翻阅， 至少对近期目录做到心中有数，这样投稿时才能做到有的放矢，不致于把中学化学教学方面的稿件寄给适合小学生阅读的报刊。 例如：中学化学教学研究的权威杂志——《化学教育》是中国化学会主办的综合性学术月刊。经常在每年第一期刊登《化学教育》栏目简介，《化学教育》征稿简则。如果要向这家杂志投稿，就必须仔细研究这两篇文章。其它几家杂志如：中学化学教学参考、中学化学等也会对其读者物件、投稿要求、杂志栏目等方面进行介绍。 2.注意把握时机 教研论文按时效性大体可分为两类：一类时效性强，与教学进度配合（例如《中学化学教学参考》的新教材教学参考，各种同步练习等），另一类时效性不强，与教学进度无关。后者什么时候投稿都行， 而前者必须掌握一定的提前量，到底提前多长时间投稿，一般报刊都会弗过报刊启示提醒读者和作者。正常情况下，如果报刊没有规定，与教学进度配合的稿件，双月刊、月刊应提前4—6个月。总的说来，新闻类稿件越及时越好，报刊发行周期越短，提前量相应要小些。投稿最忌讳“马后炮”，一般不是很出色的稿子，“马后炮”是很难发表的，比如：与下学期一开学要学的内容有关的稿件， 一般在上学期期末最迟在假期当中就要发，这样才能给教师备课提供借鉴和参考，如果你等到教完这部分内容后再写出来投出去，那就成了“马后炮”，这类稿件不是极有价值一般不会保留到第二年再发。这便产生了矛盾，因为大多数与教学进度有关的稿件都是在教学后发现了问题才研究撰写出来的，而此时已经错过了投稿时机。怎么办？笔者的经验是可以先写出来慢慢加工仔细斟酌，到第二年合适的时候再投出去，这样经过冷加工后，稿件会更成熟。有些报刊采用期长达几个月甚至半年，即使只有一个月，由于不能一稿多投，等到收到答复，再投给其它报刊也已错过了时机。这种情况下也可以采用上述办法，只是最好有个发稿记录，记下何时发给谁？结果如何？再投稿时心中有数。 3.注意格式要规范 如果稿件是手写的，要注意书写认真规范，整洁清楚，无错别字，标点符号准确无误，而且必须使用方格...... 怎样向杂志社或者报刊投稿？ 为杂志写稿注意的36个问题 一、 电子邮件投稿应该用什么格式？ 主题：投稿栏目、文章名、发表笔名。 内容：文章的全部内容。 落款：您的真实联络地址、邮编、姓名、邮箱地址、固定电话、手机、QQ号码（注明QQ名）、其他您觉得有必要留的联络资讯。 除了以上内容，一概不欢迎。 二、 为什么不欢迎使用附件？ 大家知道，很多病毒是通过邮件附件传送的，就我知道，很多杂志社的电脑上都装了病毒粉碎机这个软体，就是说在处理电子邮件的时候，有附件的系统一律删除。这意味着您辛苦的文字永远不会被编辑看到。 另外，附件来稿格式不同，往往因为软体问题而打不开，或者，开启是乱码。 所以，为了您自身利益，别使用附件投稿。 三、 来稿之前知道自己的文字适合什么栏目吗？ 每个杂志都是由无数个栏目组成的。你在来稿之前，必须确定自己的文章适合哪个栏目。这样，在邮件的主题里列出来，编辑在看稿的时候，也有更强的目的性。此外，这么做，也代表着你对杂志的熟悉程度。编辑在文章归档的时候，也方便。编辑都很懒，喜欢省事省心的作者。 四、 一个月来几篇稿子比较适合？ 个人觉得，不要超过三篇。有一次，一个作者一下子给我发来二十多篇文章。从好的方面想，这是作者信任你，将他的文章全部都给你挑选；但是，从另一个角度上说，如果你这么多文章都是没发表过的，那是否意味着这些都是被其他编辑筛选下来的？别的编辑不要的文章，我要来干什么？ 五、 截稿时间是什么样的概念？ 截稿时间分为两种，一是杂志每月交稿时间；二是临时征稿截止时间。对于第一个时间，我个人觉得写手没必要太计较。因为杂志是做长线，你这一期赶不上，放到下一期好了。对于第二个时间，那么就是说，在截稿之前你可以去按照要求来写，但是，一旦过了时间，就没必要再写再投稿了。因为时间一过立即定稿，就算你写得再好，也不会用。个人经验是宜早不宜迟，因为我们在临时组稿的时候，往往时间没到就取得了适合的好稿子而提前定稿了。 六、 字数要求的含义是什么？ 简单点来说，能少就不要多。规定多少字那你就写多少字，不可以任性多写几百一千字让编辑删。毕竟，你字少了，只要文章不错，我空出来的版面还可以安排其他一些东西；但是，你字多了，虽然你恼潞芷?粒?蛞晃依恋蒙玖耍?喑隼吹淖质?又痉拍睦铮? 七、 为什么不能有错别字？ 一个作者线上问我，我给你的信刚发过去，几千字的文章，你怎么一分钟就看完说不要？你这是什么工作态度？我回答很简单：你的文章我没看就退了，答案是你去注意一下你的文章标题。其实，答案很简单，他的标题上有一个错别字。文章中的个别错别字可以原谅，但是，标题都写错了的作者，你觉得他的文笔和责任心会怎么样？文章中的错别字也别太多。多了，编辑会坏了胃口，不想再将你文章看下去的。所以，恳请各位，在发稿之前，至少将文章读三遍，没必要来考核编辑的改错字能力。请写手注意“像”与“象”，“的、地、得”等的使用区别。标点符号的使用也是问题。 八、 编辑是否有义务给作者回信？ 应该回每一封信，但是，做起来，不现实。虽然我现在依然做到每信必复，但是，我也怀疑我自己能坚持多久。你要问答案？随便你去一个论坛，一天回两百个帖子看看就能理解我的感受。毕竟，我们的工作重点是在编稿子和做栏目上。我不给你回信，不是不尊重你的劳动，是我实在没时间。大哥，我一天看稿下来，也真得很累。 九、 是否应该要求编辑给自己修改文章？ 可以要求...... 怎样向杂志社投稿 20分 若你是初次投稿，建议找些门槛低的省级期刊投稿，这类杂志有《故事》、攻故事汇》、《故事世界》、《幽默与笑话》。另外《知识窗》、《青年科学》、《思维与智慧》这些杂志你也可去试试。投稿时，你还要注意投稿格式，电子邮件投稿注意事项。 在这里顺便给你介绍一些注意事项，以提高你命中率：稿子后，要有完备的联络方式：作者名字、署名、地址、电话、邮箱，QQ什么的都要详细，以便编辑联络你！要是没有这些，发了你文章，难找你拿稿酬！ 用电子邮件投稿，得注明投什么栏目，写上你名字和稿子名字。 如何向青年文摘等杂志投稿? 青年文摘一般都是荐稿，原创稿投给该刊的很少。关于青年文摘杂志的投稿要求、稿酬及投稿邮箱你可以看看此图片。百度知道不让上传邮箱，故只得这样发给你。
1,现在是信息化时代，我们大部分人都拥有着电子产品，相较于以前的投稿方式的匮乏，现代社会中的投稿方式不可谓不多。首先使用的投稿方式就是通过电子邮箱进行投稿。
2,对于电子邮箱进行投稿，小伙伴们需要通过网上搜索你想要投稿的杂志的官网，通常来说官网上会有信息展示他们的官方电子邮箱地址。如果我们没有发现，也可以到他们的杂志论坛上寻找，或者直接找他们的官方客服进行询问。
3,得到电子邮箱以后，我们就可以将我们的稿件通过邮箱发给报社了，需要注意的是，我们一定要记得留底稿，因为杂志社通常都是不退稿的。所以我们一定要注意保留好我们的底稿。
4,除了电子邮箱发稿以外，我们也可以通过最原始的邮寄的方式进行投稿。对于我们想要邮寄的杂志社，我们可以在他们的官网或者论坛找到实际邮寄地址，又或者可以通过杂志实体书籍获取他们的邮寄地址。
5,最后还是要提醒大家，无论是哪一种投稿方式，我们都需要注明自己的真实姓名，笔名，还有地址，电子邮箱地址，邮政编码等重要的信息。最后祝大家投稿顺利！
您好，期刊论文投稿的步骤是撰写稿件——投稿——杂志社审核——录用通知书——支付版面费——定版排版——等待出刊邮寄——数据库检索。首先写好论文，到知网寻找编辑部的联系方式，如果是前期看过纸质版刊物了，那在期刊上也很容易找到投稿信箱。大家注意千万别百度杂志社官网，因为很多都是假的，都是子利用杂志社没有官网的空子，自己建了一个山寨的，有的作者不明真相，结果就上当了，所以还是一定要去知网找。选择合适的期刊，根据写的内容进行选择，可以看看参考的文献中是否有类似的，并且应该根据文章的水平选择学术水平相符的期刊，选择好后根据期刊的投稿要求对论文进行排版，把文章寄到编辑部，有些期刊需要评审费，等待文章审稿结果。有三种可能:退稿、修改、直接发表，第一种情况需要修改后投其他期刊，第二、三种情况根据编辑部要求进行，当文章正式录用后编辑部会正式通知，发录用通知，支付版面费即可，后续等待出刊检索。希望回答对您有帮助。
选择合适的期刊，根据写的内容进行选择，可以看看参考的文献中是否有类似的，并且应该根据文章的水平选择学术水平相符的期刊，选择好后根据期刊的投稿要求对论文进行排版，把文章寄到编辑部，论文考试答辩取消、条件放宽文件政策，搜：论文热线要我发先起腰发我就发腰（换成数字）总结的经验教训，翻到158页后，一、大道至简、职称不难。二、对照评审条件找差距。三、业绩技巧。四、不符合评审条件也可能合格。五、2012年后，关系的作用几乎是零。发现规律：搜论文考试答辩取消、条件放宽文件政策，有两个办法，都是搜后翻到158页后。一、11位电话号码在后，搜：论文热线要我发先起腰【发】我就发腰（把【发】换成汉字八，其他换成10位数字，再搜，注意必须搜够11位。否则不但找不到，还会搜到假冒的。下同）、高级职称论文（后同）、高级职称论文取消（后同）、高级职称论文价格（后同）、高级经济师论文（后同）、高级会计师论文（后同）、其他职称论文（后同）。二、11位电话号码在前，搜：要我发先起腰发我就发腰（换成数字）论文热线、（前同即11位号码）高级职称论文、（前同）高级职称论文取消、（前同即11位号码）高级职称论文价格、（前同）高级经济师论文、（前同）高级会计师论文、（前同）其他职称论文。论文取消文件政策搜任何职称论文问题加11位热线都能找到。例：搜：论文加急见刊+要我发先起腰【发】我就发腰（是11位电话号码，把【发】换成汉字八，其他换成10位数字，再搜，翻到158页后，即可找到。注意必须搜11位。否则找不到，还会找到假冒的。下同）。同样搜：靠谱的期刊中介（后同）、论文快速见刊（后同）、职称论文怎么写（后同）、职称论文发表（后同）、职称论文收费标准（后同）、职称论文期刊杂志（后同）、职称论文价格（后同）、职称论文要求（后同）、职称论文查重率（后同）、职称论文三大网站（后同）、同样搜：高级经济师论文（后同）、高级会计师论文（后同）、高级职称论文（后同）、其他论文（后同）、高级职称论文取消（后同）、高级职称论文价格（后同）、高级职称论文的要求（后同）、任何论文问题（后同）、论文热线（后同）、职称热线（后同）。同样搜：论文辅导热线（后同）、论文加急见刊（后同）、职称热线（后同）、课题热线（后同）、靠谱的期刊中介（后同）、论文快速见刊（后同）、职称论文怎么写（后同）、职称论文发表（后同）、职称论文收费标准（后同）、职称论文期刊杂志（后同）、职称论文价格（后同）、职称论文要求（后同）、职称论文查重率（后同）、职称论文三大网站（后同）、搜：要我发先起腰发我就发腰（换成数字）论文热线30年创建的名牌被假冒经历。请转发网友总结，共同防：标“广告保障”的全是假冒子。网上出现顺口溜，搜：看到广告保障，想到假冒上当，令人头昏脑涨。防假冒、论文考试答辩取消、条件放宽文件政策，只能搜：要我发先起腰发我就发腰（换成11位数字）论文热线、（同）职称热线、（同）课题热线。30年创建的名牌被假冒经历。第一阶段：1992年-2022年，假冒名称。搜：河南职称论文大学、郑州职称论文大学、郑州高级职称论文大学、郑密路论文，等。标“广告保障”的全是假冒子、都不在郑州。第二阶段：2022年后，假冒名称被网友揭露后（河南郑州职称论文大学不在河南郑州？），又开始假冒1位电话号码的前3-6位。如搜：论文热线158、全国论文办158371、高级经济师158371、高级会计师论文158371等。标“广告保障”的全是假冒子。所以必须完整搜索11位热线。可见：子只能假冒汉字和11位电话号码的前3-6位，无法全部假冒11位。搜够11位，就难杜绝假冒。如搜：要我发先起腰发我就发腰（换成11位数字）论文热线。防假冒必须搜：问题+11位电话号码（要我发先起腰【发】我就发腰，把第7位【发】换成汉字八，其他换成10位数字，再搜），翻到158页后，即可找到。如：搜：高级职称论文的要求+要我发先起腰【发】我就发腰、高级职称论文价格（后同）、高级职称论文取消（后同）、高级经济师论文（后同）、高级会计师论文（后同）、其他职称论文（后同）。 搜：任何省任何职称论文+要我发先起腰【发】我就发腰，如搜：河南高级经济师论文（后同）、山东高级会计师论文（后同）。必须搜：问题+11位（要我发先起腰【发】我就发腰，【发】换成汉字八，其他换成数字，）。否则会搜到假冒子。以高级经济师为例，搜：高级经济师任何问题+要我发先起腰【发】我就发腰（把【发】换成汉字八，其他换成10位数字再搜，必须搜够11位，否则会搜到假冒的），都能找到答案。如搜：高级经济师论文（后同）、高级经济师论文取消（后同）、高级经济师论文范文（后同）、高级经济师论文选题（后同）、高级经济师报考条件（后同）、高级经济师评审条件（后同）、高级经济师考试科目（后同）、高级经济师考试用书（后同）、高级经济师评审业绩成果（后同），等。把“经济”换成“会计、工程、教师、医师等任何职称”再搜，都能找到答案。以高级职称论文为例，搜：高级职称论文的要求+要我发先起腰【发】我就发腰、高级职称论文价格（后同）、高级职称论文发表要求（后同）、高级职称论文有效期（后同）、高级职称论文期刊（后同）、高级职称论文答辩（后同）、高级经济师论文（后同）、高级会计师论文（后同）、其他职称论文（后同）。必须搜：问题+11位（要我发先起腰【发】我就发腰，【发】换成汉字八，其他换成数字，）。否则会搜到假冒子。