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血液研究生论文发表

发布时间:2024-07-03 02:43:06

血液研究生论文发表

把论文给美国血液杂志社是较高水准,应该在学术期刊中名前100,是收录最佳血液学研究文章的核心期刊。

研究生也是可以发表论文的,可以参考以下步骤1,筛选需要投稿的几个期刊,详细看看投稿要求,比如字符,引用率,参考文献等。2,根据期刊要求撰写论文,修改论文。3,投稿,等待杂志社审稿,检测等。4,杂志社会针对文章给出意见返修等,这个时候需要你修改。5,审核通过后,给杂志社缴费,6,等待出刊

期刊介绍|Blood新晋6分子刊,势头迅猛,审稿迅速!科研情报站BioSCI基本信息期刊名称:Blood Advances;期刊ISSN: 2473-9529;研究方向:医学-血液学;出版社:American Society of Hematology;期刊官网:;期刊投稿网址:;期刊主编:obert Negrin 加州斯坦福大学医学中心医学教授;JCR中科院分区期刊SCI分区:血液学属于Q1分区;中科院分区:医学类属于二区,血液学属于二区;接收领域《Blood Advances》是由美国血液学学会出版的半月刊医学杂志。这是70年来第一本加入Blood家族的期刊,是一份同行评审、仅在线、开放获取的期刊。《Blood Advances》为发表描述血液学基础实验室、转化和临床研究的原始文章提供了一个国际论坛。该杂志涵盖了血液学的所有方面,包括良性和恶性白细胞、红细胞、血小板、止血机制、血管生物学、免疫学和血液学肿瘤学。所有的文章都经过严格的同行评审,并根据发现的原创性、所描述的工作的卓越质量和表达的清晰性来挑选。影响因子影响因子:6.686;自引率:5.10%;期刊发文量:612;审稿相关是否OA开放:YES;版面费:审稿费用为USD75;补充实验费用为USD105;OA费用为USD3000;约合人民币19061;通讯方式:2021 L ST NW, SUITE 900, WASHINGTON, USA, DC, 20036;平均审稿速度:初审时间为30天左右,投稿到接收约为3个月;总结《Blood Advances》作为Blood子刊,发展潜力十分巨大。这两年来的影响因子也是飞速上涨。期刊作为OA期刊,6分的影响因子,版面费不到2万,可以说是性价比还是很不错的。但是期刊有审稿费用,后续如果需要补充实验数据等还需缴纳补充呢费用,这个大家可以注意一下。审稿的速度中等,一般一个月左右就可以有结果。审稿人非常专业,对文章要求非常高。非常提倡有实力的小伙伴冲刺一下。喜欢这篇内容的话欢迎关注我,或者点赞、评论、分享给其他读者吧!不关注也没关系,我还是爱你的~

研究生论文发表要求每个学校是不一样的:有的学校要求必须在正规期刊上发表的;有的则不作要求,这个就得看你们学校的要求了:正规期刊的话,是有自己的CN的。所谓CN 类刊物是指在我国境内注册、国内公开发行的刊物。该类刊物的刊号均标注有CN字母,人们习惯称之为CN类刊物。CN刊号标准格式是:CNXX-XXXX,其中前两位是各省(区、市)区号。而印有“CN(HK)”或“CNXXX(HK)/R”的不是合法的国内统一刊号。这是我在百姓论文网发表的时候,负责的老师告诉我的,有需要的话你可以去问问的。

血液期刊投稿

1.1 凡来稿在接到本刊回执后3个月内未收到稿件通知者,系仍在审阅研究中,作者如欲投他刊,请来信与本刊联系。本刊一般不退稿,请作者自留底稿。退交作者修改的稿件,请按期将原稿与修改意见、修改稿一并寄回,超过3个月不寄回者,按“自动退稿”处理。1.2 依照《著作权法》有关规定,本刊可对稿件进行文字修改、删节,凡涉及原意的修改,则提请作者考虑。凡对退稿意见持异议者,请直接与本刊联系。1.3 论文所涉及的课题如属国家自然科学基金项目或省、部级以上重点攻关项目,或获相应级别的科技成果奖,应脚注于文题页左下方,如“基金项目:国家自然科学基金资助项目(No.××××××)”。1.4 来稿必须一式两份,以方便送审。来稿须附单位推荐信(属使用攻读研究生或进修单位的资料撰写的稿件,而本人已离开该单位,还须附该单位推荐信),推荐信应注明稿件无一稿两投、不涉及保密、署名无争议等项。同时注明联系电话、传真号码以备用。

期刊介绍|Blood新晋6分子刊,势头迅猛,审稿迅速!科研情报站BioSCI基本信息期刊名称:Blood Advances;期刊ISSN: 2473-9529;研究方向:医学-血液学;出版社:American Society of Hematology;期刊官网:;期刊投稿网址:;期刊主编:obert Negrin 加州斯坦福大学医学中心医学教授;JCR中科院分区期刊SCI分区:血液学属于Q1分区;中科院分区:医学类属于二区,血液学属于二区;接收领域《Blood Advances》是由美国血液学学会出版的半月刊医学杂志。这是70年来第一本加入Blood家族的期刊,是一份同行评审、仅在线、开放获取的期刊。《Blood Advances》为发表描述血液学基础实验室、转化和临床研究的原始文章提供了一个国际论坛。该杂志涵盖了血液学的所有方面,包括良性和恶性白细胞、红细胞、血小板、止血机制、血管生物学、免疫学和血液学肿瘤学。所有的文章都经过严格的同行评审,并根据发现的原创性、所描述的工作的卓越质量和表达的清晰性来挑选。影响因子影响因子:6.686;自引率:5.10%;期刊发文量:612;审稿相关是否OA开放:YES;版面费:审稿费用为USD75;补充实验费用为USD105;OA费用为USD3000;约合人民币19061;通讯方式:2021 L ST NW, SUITE 900, WASHINGTON, USA, DC, 20036;平均审稿速度:初审时间为30天左右,投稿到接收约为3个月;总结《Blood Advances》作为Blood子刊,发展潜力十分巨大。这两年来的影响因子也是飞速上涨。期刊作为OA期刊,6分的影响因子,版面费不到2万,可以说是性价比还是很不错的。但是期刊有审稿费用,后续如果需要补充实验数据等还需缴纳补充呢费用,这个大家可以注意一下。审稿的速度中等,一般一个月左右就可以有结果。审稿人非常专业,对文章要求非常高。非常提倡有实力的小伙伴冲刺一下。喜欢这篇内容的话欢迎关注我,或者点赞、评论、分享给其他读者吧!不关注也没关系,我还是爱你的~

鱼类血液生理生化投稿期刊

1、血清:现在的很多文献都写的4度下静置(1到数小时都可以,甚至有人写过夜),然后4度下3000或3500 r/min,10或15min.见过最少的写1500 r/min,最多的写5000r/min.但这只是写……实际情况未必是这样. 先说静置,4度下静置要好久才析出一点血清,很不实惠.其实室温下放1、2个小时,大部分酶都不会失活,而且出血清很快.一些经典老教材上甚至写着,冬天室温低,可以在37度水浴中放置到血清析出.所以我觉得,4度下静置有点多此一举. 再说静置后的离心,如果您用的是玻璃离心管或者放免管(内壁一定要干净),那么按照文献中的转速和时间离心可以.但是现在大多数时候都用塑料离心管,如果还用3000—4000的转速,所得血清经常会出现果冻状的东西,常温化不开,不能用了.所以,如果用塑料管离心,建议慢一些,4度下1500、1000都可以,离30—60min,可有效避免上述情况. 2、血浆:采的时候加抗凝剂.现在的文献上也写的是3000、3500、4000离心10或15分钟.当然这个不需要静置.其实血浆就是把抗凝血里面的血细胞沉降出来就行了,您可以用2000或2500离心15分钟看看,效果是一样的. 3、全血:当然不需要离心了…… 另:1、以上说法只能针对鱼,别的动物我不懂.2、只针对血液生理生化指标,做基因的我也不懂……3、做是做,写是写.您写文章的时候还是得按文献来.

鱼类用鳃呼吸,通过鳃丝与水进行气体交换,水中的氧气扩散到鳃丝中的毛细血管里,毛细血管中的二氧化碳扩散到水中。

吴彤血液发表论文

1、BMT后血液肿瘤的过继细胞免疫治疗。a. 对传统治疗无效的BMT后早期复发的DC-CIK和NK细胞治疗。b. 难治/复发白血病的挽救性移植联合预防性免疫治疗。2、BMT后难治性病毒/真菌感染的免疫治疗。a. CMV-CTL,EBV-CTL,BKV-CTL。b. 曲霉-CTL。3、应用无关脐血作为第三方细胞诱导亲缘半相同及非血缘BMT的免疫耐受。4、用脐带来源的间充质干细胞治疗难治性GVHD。5、亚急性白血病的论证诊断和探索性治疗(北京大学人民医院血液病研究所,2003-2005,211课题,负责人)6、应用大蒜提取物预防和治疗BMT后CMV感染/疾病(北京大学人民医院血液病研究所, 1987-现在,研究骨干)7、应用胎盘提取物预防及治疗GVHD(北京大学人民医院血液病研究所, 1989-现在,研究骨干)8、应用胎肝和胎胸腺细胞诱导HLA不全相合BMT的免疫耐受(北京大学人民医院血液病研究所,1990-1993,研究骨干)9、用免疫毒素体外去除T细胞以减轻移植后GVHD(北京大学人民医院血液病研究所,1990-1992,研究骨干)10、应用抗CD3单克隆抗体预防异基因BMT的排斥反应和移植物抗宿主病(GVHD(北京大学人民医院血液病研究所,1988-1992,研究骨干)

吴彤教授在长期从事教学工作中,认真负责,治学严谨。他注意培养和提高学生实践能力及创新能力,把专业知识与教学实践相结合,不断总结反思,努力探索适合学生的教学方法,摸索出了一套成功的教学经验,教学效果优良,深受学生好评。他把课堂还给学生,保证学生有充分的自学、思考、合作、交流讨论、动手操作的时间,给学生提供展示自己才能的平台,鼓励学生畅所欲言、各抒己见,鼓励学生相互争辩、大胆质疑,表达创造性的见解,尽量为学生创造表现的机会。他上课总是把书本上的知识扩展开来,旁征博引,深入浅出、生动活泼地进行教学,不仅促进了学生学习的积极性,同时也有利于学生对知识的消化和吸收,让枯燥乏味的知识,变得有滋有味,提高了学生的动手能力和思维能力,让学生有了成就感,更有了学习的动力。吴彤教授在动物病毒学、免疫学领域具有较深造诣,主持多项省自然科学基金、省长人才基金、省“六五”和“八五”攻关项目等科研课题,发表科研论文40余篇。辛勤的汗水换得了丰硕的果实,吴彤教授获得了省科技进步二、三等奖达6项,其中“禽霍乱荚膜菌苗的研究”获1986年省科技进步三等奖;“贵州省新近发现的家禽主要传染病的研究”获1996年省科技进步二等奖;“禽腺病毒不同分离株的核酸酶切分析与蛋白抗原鉴定”获2002年省科技进步三等奖。吴彤教授出生于农村,对农民有着深厚的感情。在主持贵州省教育厅的“农科教结合模式研究及生态农业建设”项目时,作为农业专家,他深深地认识到:服务“三农”、发展“三农”是高等农业教育改革发展的目标。作为“农科教结合模式研究及生态农业建设”项目的主持者,吴彤教授和项目组老师一道多次赴黔西县大关镇,为当地调整农业产业结构,制定农业发展规划,建设生态农业献计献策。他们不辞辛劳,培训农民万余人次,发放先进的种、养殖业配套技术资料万余份。“农科教结合模式研究及生态农业建设”项目的实施,使大关镇农民的科学意识得到增强,素质得以提高,促进了农业科技成果转化和应用,促进了当地产业结构的调整,种、养殖业协调发展,粮食得到了增产,收入亦大幅提高,农民们喜笑颜开走上了致富路。结合“农科教结合模式研究及生态农业建设”项目实施,吴彤教授积极促成了多个校外实习基地的建立,促进了教育与生产的结合,提高了学生的实际操作能力和专业水平,增强了学生的劳动观念,专业思想得到进一步巩固,增强了学校的办学效益、经济效益和社会效益。四十五年的耕耘,四十五年的收获;平凡的岗位,不平凡的事业,吴彤教授受到了广大师生和农民的爱戴,他所践行的“农科教、产学研”之路也必将越走越宽广。

血液制品发表论文

2005年前后,对中国艾滋病研究领域用“春意盎然”来形容应该是不过分的——在长春百克标志性的艾滋病疫苗人体试验首度“撞线”之前,我国唯一的治疗性艾滋病疫苗也刚刚结束实验室工作;不久前,更传出中美合作找到阻断艾滋病病毒复制新途径的好消息。而5月14日上午,长春百克进行的艾滋病疫苗一期临床试验则进入第二阶段。[br]然而,在硕果频结之际,近日“艾滋病疫苗与药物联合研究中心”可行性咨询会与曾毅院士牵头的艾滋病研究领域十专家会几乎同时在北京召开,无论是以探讨艾滋病疫苗与药物联合开发为主题的前者,还是以讨论艾滋病研究思路转变为目的的后者,都不约而同地传达出这样一种“萌动”——中国的艾滋病疫苗研究应该考虑换个“脑筋”、换个“活儿法”。种种迹象表明,研究者们在热发展的进程中已开始对日后的科研道路进行必要的冷思考。[b]■资金短缺掣肘研发[/b][br][br]自3月12日国内首次进行艾滋病疫苗人体试验至今的两个月内,如同8名受试者目前的平静感觉一样,事件本身也似乎逐渐归于平淡。当记者就目前试验进展问及事件主角长春百克公司时,该公司副总经理冯大强信心十足,反复强调的一句话就是——“一切都挺好”。这句话在5月14日这一天得到了广泛的验证——当日,长春百克疫苗人体试验顺利进入一期临床研究第二阶段,每一位志愿者陆续接种由两种艾滋病疫苗组成的混合疫苗,目的是全面考察艾滋病疫苗的安全性。迄今为止,接受疫苗的24名受试者无一出现不良反应。[br]然而,相关统计数据也表明,就世界范围而言,进入一期临床试验的106(一说109例或110例)例艾滋病疫苗中,能顺利进入二期临床试验的仅为12例,比例尚不到十分之一。摆在长春百克面前的风险由此可见一斑。[br]参照国家食品药品监管局2003年3月颁布的《艾滋病疫苗临床研究技术指导原则》,排除风险因素,长春百克进行疫苗临床试验的全过程最少也要7年时间。而在这7年间,试验究竟是会缓步前行,还是会在某天戛然而止,无论是试验机构还是研发单位,心里都没底。[br]但毫无疑问的是,长春百克虽然只是该研究领域的后起者,但全球35支进行艾滋病疫苗临床试验的研发队伍中出现中国名字仍属破冰之举。中国医学科学院艾滋病中心主任张林琦教授对该试验给予了高度评价:退一万步说,此次试验即使失败,也可从中获得很多重要的“实战经验”,推动我们下一步的研究。[br]然而,摆在百克和所有中国研究者面前最现实也最迫切的问题仍旧是缺乏资金。中国疾控中心性病艾滋病预防控制中心首席专家邵一鸣教授就明确指出,目前艾滋病疫苗研制的困难首先在于资金不足。按邵一鸣的说法,目前国内多数队伍是“欠债干活”。[br]而长春百克“掌柜”孔维对资金压力的感受则更为真切。孔维坦言,对长春百克而言,资金日趋紧张可能是目前最大问题。此番启动的一期临床试验,该公司投入了约1亿元资金,而长春高新(000661)的年报称,2004年长春百克亏损额达553万,远远超过公司的注册资本。[br]不仅如此,在过去的几年里,长春百克获得中国各级政府经费支持也屈指可数:2003年获得国家863计划生物技术专题资助120万元;2004年11月,获国家第二批科技型中小企业技术创新基金100万元资助;2004年获长春市振兴老工业基地科技攻关资金10万元支持。这些支持对于动辄千万元的艾滋疫苗临床研究来说,相去甚远。[br]据有关人士介绍,国家863计划单列一笔资金支持疫苗研究,其中真正分到艾滋病疫苗研究领域的仅数百万元。而2003年突如其来的SARS事件,对863计划的经费支配造成相当大的冲击。身为全国政协委员的邵一鸣,曾在“两会”上建议:国家应加大对艾滋病疫苗研究的投入,支持更多队伍。此提案受到了中央高层的重视,科技部当年便设专项资金,经费从每年100多万元增至1000万元。但在一些科研团队看来,这还是杯水车薪。[br][br][b]整合力量提升效率[br][/b][br]4月底的北京,“艾滋病疫苗与药物联合研究中心”可行性研究咨询会与曾毅院士牵头的有3位院士、7位专家参加的3小时的研讨会,都将目光投注于艾滋病研究思路的更新。[br]建立“艾滋病疫苗与药物联合研究中心”旨在将艾滋病研究尽快纳入快车道。作为会议的牵头者,科技部中国生物技术发展中心主任王宏广对设立“联合研究中心”的解释是,“提高我国艾滋病研究水平,加快艾滋病疫苗和药物的研发速度”。而吸引海内外华人专家联合开展艾滋病防治研究也成为专家们的热议话题。[br]专家们一致认为,在我国建立国家艾滋病疫苗与药物联合研究中心是非常必要且相当紧迫的工作。如果该中心得以组成,应该可以充分发挥协调和管理职能,联合海内外华人科学家,整合国内已有科研力量和资源,建立并完善中试基地、灵长类实验动物平台、临床试验基地、质量标准与检测平台等一整套技术体系,有力推动我国艾滋病疫苗与药物的研发进度和产业化进程。[br]而曾毅院士的专家会则聚集了十位当今国内艾滋病研究领域的权威人物,会后,与会专家之一军事医学科学院十一所金宁一教授用“时间很短”、“人数不多”、“规格颇高”评价这次会议。他告诉记者,在目前艾滋病迅速蔓延而疫苗研发进展不快的情况下,专家们一致认为,中国的艾滋病疫苗研究确实有必要换一个思路,以往“盲目、重复的工作做得太多了”,“研发中心和产业化基地”必须结合起来。[br]作为目前我国唯一的治疗性艾滋病疫苗学科队伍带头人,金宁一早在2004年岁末就已经结束了相关实验室研究工作,但由于缺乏企业资金的介入,该项目产业化至今仍处于等待和谈判阶段。也正是因为辛苦研究出来的结果不能尽早付诸试验,对于合理和高效的产业化,金宁一有着比别人更迫切的需求。[br]尽管对于两场会议的具体内容,到会专家都特别谨慎,不肯多言,科技部中国生物技术发展中心范处长更是反复向记者强调,“目前仅仅是一个想法”,但“自觉”考虑研发长远运作思路对下一步研究可能产生的推动作用还是让人多多少少感觉到了希望。金宁一则向记者透露,尽管这次意在抛砖引玉的十专家会只是对可行性进行初步讨论,但是,“每位专家都领了任务,考虑研发思路的转变”,而且,“我们已经在计划下半年的香山会,并希望能够引起国家相关领导的重视”。[br][br][b]国际合作专利破题[/b][br][br]今天看来,长春百克现阶段的快人一步源于多方面的因素,孔维力邀来自美国、韩国、瑞典的近20名博士共同创业应属其中关键一环。而霍普金斯大学VITAL公司以艾滋病疫苗非专利技术成果作为无形资产,作价200万元入股,更是为这一项目打上了鲜明的国际合作印记。冯大强得知北京会上专家们提出“吸引海外华人科学家联合开发”计划时很是赞同。他表示,“只要能够找到合作的共同内容,对于可以扬长避短的联合开发,我们会密切期待和关注。”[br]而有关合作最“新鲜”的例子来自于中国科技大学。日前,该校化学与材料科学学院有机材料研究室宣布,他们与美国西莱山医学院合作,已成功找到阻断艾滋病病毒复制的新途径。作为课题组负责人,该院副院长汪志勇教授介绍说,在这支由8名科研人员组成的中美联合队伍中,有3名中方人员。[br]目前,国际合作日益增多,研发成果知识产权的分配值得关注。在市场经济中,科学家通力合作,研究获成功之后,成果知识产权的归属与合理分配易成为双方争夺的“焦点”。金宁一告诉记者,通常双方在合作之前会进行一定的约定,对于未来可能承担的责任和享受的权利都有详细的划分。如果试验成功,双方保守属于自己的那一部分“秘密”,也就有了知识产权。当然,各企业和实验室都会根据各自分工不同而在产权约定上有别。[br]对于这一问题,中国科技大学化学与材料科学学院执行院长陈初升对记者的解释是,“目前还没有牵扯到知识产权问题,现在只是取得了阶段性的成绩,以后的合作还要很多年”。而汪志勇也曾经表示,目前这个项目所有经费都是由政府承担,他本人只是以个人名义参与研究,在论文发表上享有同等贡献的署名权。今年3月,汪志勇向国家有关部门递交了该项目30万元研究经费的申请报告,他希望可以向美国合作方提出以我国政府名义介入项目合作,这样将来我国就可以享受到部分知识产权。[br]而事实上,看中艾滋病疫苗潜在庞大市场的眼睛还有很多,不少具备条件的高校实验室也在与国内外企业进行联合研发。对于这样的各自为战,有业内人士谨慎地表示了担心:在重视知识产权的大背景下,我们的研发队伍缺乏知识产权保护意识和相关知识,免不了会因此“吃亏”。此外,研究机构与企业,特别是与国外企业进行合作,在看重资金支持的同时,更重要的是应该对双方的研究思路和理念进行充分的沟通,如果双方在研发思路上有较大分歧,难免会影响今后的研发进展。[br][br][b]相关链接:美科学家揭示多数艾滋病疫苗效果不理想的原因[br][/b][br]近年来科学家不断开发出新的艾滋病疫苗,但其效果却并不令人满意。美国科学家的最新研究揭示出其中原因:艾滋病疫苗在人体内制造的多数抗体,被人体自身免疫系统消灭了。[br]美国杜克大学研究人员在日前出版的《科学》杂志上发表论文说,此前开发的艾滋病疫苗,大多数利用了艾滋病病毒表面的蛋白质gp41,而艾滋病病毒的某些表面蛋白质,只会引起人体内产生短期的自反应抗体,而不是长效的、针对艾滋病病毒的抗体。[br]由杜克大学人类疫苗研究所主任巴顿·海恩斯领导的这个研究小组在论文中解释说,人体免疫反应可以按其生成的抗体分成两大类。一类是先天性B细胞免疫,包括一些功能较弱、针对许多种病原体的抗体。这类抗体也可能攻击人体组织,引起自身免疫病。如果病毒激活了先天性B细胞免疫反应,那人体会首先摧毁B细胞,以免引发自身免疫病。[br]另一类是适应性B细胞免疫,这种免疫反应一般较慢,但会产生功能较强的特异性抗体,也就是免疫系统只会攻击入侵的病毒等病原体,这类免疫会对特定的病原体具有长时间的免疫力。大多数成功的疫苗,都利用了适应性B细胞免疫原理。[br]科学家在开发艾滋病疫苗时,也希望用病毒的某些表面蛋白引发人体的适应性B细胞免疫反应。但海恩斯等人在实验中发现,目前用于开发艾滋病疫苗的gp41表面蛋白质,在人体内引发的免疫反应更类似于先天性B细胞免疫,免疫系统生成的抗体,能与人体组织内的多种分子发生反应,结果类似自身免疫病。这样,免疫系统首先就要摧毁抗体。[br]海恩斯说,这一研究成果指明了艾滋病疫苗开发中的主要方向。以后科学家在开发艾滋病疫苗时,应注意“诱使”机体对艾滋病病毒的表面蛋白质产生适应性B细胞免疫,这样才能成功预防病毒感染

我国对艾滋病针头的研究已经是处于越来越成熟的阶段,因为我国对艾滋病研究的投入是越来越大的,而且现在也对艾滋针头产生了一定的了解,知道为什么被扎针会被感染等传播的途径

你牛啊,刚才还说空军医院呢,现在成四院了

我给你一部分,因为太多了,过不来,具体的你点击下面的网址自己挑选吧,拼拼就成了!干燥是保持物质不致腐败变质的方法之一。干燥的方法许多,如晒干、煮干、烘干、喷雾干燥和真空干燥等。但这些干燥方法都是在0℃以上或更高的温度下进行。干燥所得的产品,一般是体积缩小、质地变硬,有些物质发生了氧化,一些易挥发的成分大部分会损失掉,有些热敏性的物质,如蛋白质、维生素会发生变性。微生物会失去生物活力,干燥后的物质不易在水中溶解等。因此干燥后的产品与干燥前相比在性状上有很大的差别。而冷冻干燥法不同于以上的干燥方法,产品的干燥基本上在0℃以下的温度进行,即在产品冻结的状态下进行,直到后期,为了进一步降低产品的残余水份含量,才让产品升至0℃以上的温度,但一般不超过40℃。冷冻干燥就是把含有大量水分物质,预先进行降温冻结成固体,然后在真空的条件下使水蒸汽直接升华出来,而物质本身剩留在冻结时的冰架中,因此它干燥后体积不变,疏松多孔在升华时要吸收热量。引起产品本身温度的下降而减慢升华速度,为了增加升华速度,缩短干燥时间,必须要对产品进行适当加热。整个干燥是在较低的温度下进行的。冷冻干燥有下列优点:一.冷冻干燥在低温下进行,因此对于许多热敏性的物质特别适用。如蛋白质、微生物之类不会发生变性或失去生物活力。因此在医药上得到广泛地应用。二.在低温下干燥时,物质中的一些挥发性成分损失很小,适合一些化学产品,药品和食品干燥。三.在冷冻干燥过程中,微生物的生长和酶的作用无法进行,因此能保持原来的性装。四.由于在冻结的状态下进行干燥,因此体积几乎不变,保持了原来的结构,不会发生浓缩现象。五.干燥后的物质疏松多孔,呈海绵状,加水后溶解迅速而完全,几乎立即恢复原来的性状。六.由于干燥在真空下进行,氧气极少,因此一些易氧化的物质得到了保护。七.干燥能排除95-99%以上的水份,使干燥后产品能长期保存而不致变质。因此,冷冻干燥目前在医药工业,食品工业,科研和其他部门得到广泛的应用。第二节 冻干机的组成和冻干程序产品的冷冻干燥需要在一定装置中进行,这个装置叫做真空冷冻干燥机,简称冻干机。冻干机按系统分,由致冷系统、真空系统、加热系统、和控制系统四个主要部分组成。按结构分,由冻干箱或称干燥箱、冷凝器或称水汽凝集器、冷冻机、真空泵和阀门、电气控制元件等组成。图十三是冻干机组成示意图。冻干箱是一个能够致冷到-40℃左右,能够加热到+50℃左右的高低温箱,也是一个能抽成真空的密闭容器。它是冻干机的主要部分,需要冻干的产品就放在箱内分层的金属板层上,对产品进行冷冻,并在真空下加温,使产品内的水份升华而干燥。冷凝器同样是一个真空密闭容器,在它的内部有一个较大表面积的金属吸附面,吸附面的温度能降到-40℃以下,并且能恒定地维持这个低温。冷凝器的功用是把冻干箱内产品升华出来的水蒸气冻结吸附在其金属表面上。冻干箱、冷凝器、真空管道和阀门,再加上真空泵,便构成冻干机的真空系统。真空系统要求没有漏气现象,真空泵是真空系统建立真空的重要部件。真空系统对于产品的迅速升华干燥是必不可少的。致冷系统由冷冻机与冻干箱、冷凝器内部的管道等组成。冷冻机可以是互相独立的二套,也可以合用一套。冷冻机的功用是对冻干箱和冷凝器进行致冷,以产生和维持它们工作时所需要的低温,它有直接致冷和间接致冷二种方式。加热系统对于不同的冻干机有不同的加热方式。有的是利用直接电加热法;有的则利用中间介质来进行加热,由一台泵使中间介质不断循环。加热系统的作用是对冻干箱内的产品进行加热,以使产品内的水份不断升华,并达到规定的残余水份要求。控制系统由各种控制开关,指示调节仪表及一些自动装置等组成,它可以较为简单,也可以很复杂。一般自动化程度较高的冻干机则控制系统较为复杂。控制系统的功用是对冻干机进行手动或自动控制,操纵机器正常运转,以冻干出合乎要求的产品来。冷冻干燥的程序是这样的:在冻干之前,把需要冻干的产品分装在合适的容器内,一般是玻瓶或安瓶,装量要均匀,蒸发表面尽量大而厚度尽量薄些;然后放入与冻干箱尺寸相适应的金属盘内。装箱之前,先将冻干箱进行空箱降温,然后将产品放入冻干箱内进行预冻,抽真空之前要根据冷凝器冷冻机的降温速度提前使冷凝器工作,抽真空时冷凝器应达到-40℃左右的温度,待真空度达到一定数值后(通常应达到100uHg以上的真空度),即可对箱内产品进行加热。一般加热分两步进行,第一步加温不使产品的温度超过共熔点的温度;待产品内水份基本干完后进行第二步加温,这时可迅速地使产品上升的规定的最高温度。在最高温度保持数小时后,即可结束冻干。整个升华干燥的时间约12-24小时左右,与产品在每瓶内的装量,总装量,玻璃容器的形状、规格,产品的种类,冻干曲线及机器的性能等等有关。冻干结束后,要放干燥无菌的空气进入干燥箱,然后尽快地进行加塞封口,以防重新吸收空气中的水份。在冻干过程中,把产品和板层的温度、冷凝器温度和真空度对照时间划成曲线,叫做冻干曲线。一般以温度为纵坐标,时间为横坐标。冻干不同的产品采用不同的冻干曲线。同一产品使用不同的冻干曲线时,产品的质量也不相同,冻干曲线还与冻干机的性能有关。因此不同的产品,不同的冻干机应用不同的冻干曲线。图十四是冻干曲线示意图(其中没有冷凝器的温度曲线和真空度曲线)。第三节 共溶点及其测量方法需要冻干的产品,一般是预先配制成水的溶液或悬浊液,因此它的冰点与水就不相同了,水在0℃时结冰,而海水却要在低于0℃的温度才结冰,因为海水也是多种物质的水溶液。实验指出溶液的冰点将低于溶媒的冰点。另外,溶液的结冰过程与纯液体也不一样,纯液体如水在0℃时结冰,水的温度并不下降,直到全部水结冰之后温度才下降,这说明纯液体有一个固定的结冰点。而溶液却不一样,它不是在某一固定温度完全凝结成固体,而是在某一温度时,晶体开始析出,随着温度的下降,晶体的数量不断增加,直到最后,溶液才全部凝结。这样,溶液并不是在某一固定温度时凝结。而是在某一温度范围内凝结,当冷却时开始析出晶体的温度称为溶液的冰点。而溶液全部凝结的温度叫做溶液的凝固点。因为凝固点就是融化的开始点(既熔点),对于溶液来说也就是溶质和溶媒共同熔化的点。所以又叫做共熔点。可见溶液的冰点与共熔点是不相同的。共熔点才是溶液真正全部凝成固体的温度。显然共熔点的概念对于冷冻干燥是重要的,因为冻干产品可能有盐类、糖类、明胶、蛋白质、血球、组织、病毒、细菌等等的物质。因此它是一个复杂的液体,它的冻结过程肯定也是一个复杂的过程,与溶液相似,也有一个真正全部凝结成固体的温度。即共熔点。由于冷冻干燥是在真空状态下进行。只有产品全部冻结后才能在真空下进行升华,否则有部分液体存在时,在真空下不仅会迅速蒸发,造成液体的浓缩使冻干产品的体积缩小;而且溶解在水中的气体在真空下会迅速冒出来,造成象液体沸腾的样子,使冻干产品鼓泡,甚至冒出瓶外。这是我们所不希望的。为此冻干产品在升华开始时必须要冷到共熔点以下的温度,使冻干产品真正全部冻结。在冻结过程中,从外表的观察来确定产品是否完全冻结成固体是不可能的;靠测量温度也无法确定产品内部的结构状态。而随着产品结构发生变化时电性能的变化是极为有用的,特别是在冻结是电阻率的测量能使我们知道冻结是在进行还是已经完成了,全部冻结后电阻率将非常大,因此溶液是离子导电。冻结是离子将固定不能运动,因此电阻率明显增大。而有少量液体存在时电阻率将显著下降。因此测量产品的电阻率将能确定产品的共熔点。正规的共熔点测量法是将一对白金电极浸入液体产品之中,并在产品中插一温度计,把它们冷却到-40℃以下的低温,然后将冻结产品慢慢升温。用惠斯顿电桥来测量其电阻,当发生电阻突然降低时,这时的温度即为产品的共熔点。电桥要用交流电供电,因为直流电会发生电解作用,整个过程由仪表记录。(图十六)也可用简单的方法来测量,如图十五所示。用二根适当粗细而又互相绝缘的铜丝插入盛放产品的容器中,作为电极。在铜电极附近插入一支温度计,插入深度与电极差不多,把它们一起放入冻干箱内的观察窗孔附近,并用适当方法把它们固定好,然后与其他产品一起预冻,这时我们用万用表不断地测量在降温过程中的电阻数值,根据电阻数值的变化来确定共熔点。把电极引线通过一个开关与万用表相连,可以不分正负极。如果冻干箱没有电线引出接头,则可以用二根细导线从箱门缝处引出,在电线附近涂些真空密封蜡,这样不致于影响真空度。待温度计降至0℃之后即开始测量并作记录。把万用表的转换开关放在测量电阻的最高档(×1K或×10K)。由于万用表内使用的是直流电,为了防止电解作用,在每次测量完之后要把开关立即关掉,把每一次测量的温度和电阻数值一一记录下来。开始时电阻值很小,以后逐步增高。到某一温度时电阻突然增大,几乎是无穷大,这时的温度值便是共熔点数值。用这种方法测量的共熔点有一定的误差,因为铜电极处多少有些电解作用。万用表对于高阻值没有电桥灵敏;另外,冻结过程与熔化过程电阻的变化情况并不完全相同,但所测之值仍有实用参考价值。共熔点的数值从0℃到40℃不等,与产品的品种、保护剂的种类和浓度有关。一些物质的共熔点列表二十二供参考,因实际的冻干产品还有其它成份。所以与此不相同。第四节 产品的预冻产品在进行冷冻干燥时,需要装入适宜的容器,然后进行预先冻结,才能进行升华干燥。预冻过程不仅昰为了保护物质的主要性能不变;而且要获得冻结后产品有合理的结构以利于水份的升华;还要有恰当的装量,以便日后的应用。产品的分装通常有散装和瓶装二种方式。散装可以采用金属盘,饭盒或玻璃器皿;瓶装采用玻璃瓶和安瓿。玻璃瓶又有血浆瓶。疫苗瓶和青霉素小瓶等,安瓿也有平底安瓿、长安瓿和圆安瓿等;这些需根据产品的日后使用情况来决定,瓶子还需配上合适的胶塞。表二十二 一些物质的共熔点(℃)物质 共熔点0.85%氯化钠溶液 -2210%蔗糖溶液 -2640%蔗糖溶液 -3310%葡萄糖溶液 -272%明胶、10%葡萄糖溶液 -322%明胶、10%蔗糖溶液 -1910%蔗糖溶液、10%葡萄糖溶液、0.85%氯化钠溶液 -36脱脂牛奶 -26马血清 -35各种容器在分装之前要求清洗干净并进行灭菌处理。需要冻干的产品需配制成一定浓度的液体,为了能保证干燥后有一定的形状,物质含量在10~15%之间最佳。产品分装到容器有一定的表面积与厚度之比。表面积要大一些,厚度要小些。表面积大有利于升华,产品厚度大不利于升华。一般分装厚度不大于10mm。有些产品需用大瓶。并冻干较大量的产品时,可以采用旋冻的方法冻成壳状,或倾斜容器冻成斜面,以增大表面积,减小厚度。产品的预冻方法有冻干箱内预冻法和箱外预冻法。箱内预冻法是直接把产品放置在冻干机冻干箱内的多层搁板上,由冻干机的冷冻机来进行冷冻。大量的小瓶和安瓿进行冻干时为了进箱和出箱方便,一般把小瓶或安瓿分装在若干金属盘内,再装进箱子。为了改进热传递,有些金属盘制成可分离式,进箱时把底抽走,让小瓶直接与冻干箱的金属板接触;对于不可抽低的盘子要求盘底平整,以获得产品的均一性。采用旋冻法的大血浆瓶要事先冻好后加上导热用的金属架或块后再进行冷冻。箱外预冻有二种方法。有些小型冻干机没有进行预冻产品的装置。只能利用低温冰箱或酒精加干冰来进行预冻。另一种是专用的旋冻器,它可把大瓶的产品边旋转边冷冻成壳状结构。然后再进入冻干箱内。还有一种特殊的离心式预冻法,离心式冻干机就采用此法。利用在真空下液体迅速蒸发,吸收本身的热量而冻结。旋转的离心力防止产品中的气体溢出,使产品能“平静地”冻结成一定的形状。转速一般为800转/分左右。冷冻会对细胞和生命体产生一定的破坏作用,其机理是非常复杂的。目前尚无统一的理论,但一般认为主要是由机械效应和溶质效应引起。生物物质的冷冻过程首先是从纯水结冰开始,冰晶的生长逐步造成电解质的浓缩。随后是低共熔混合物凝固。最后全部变为固体。机械效应是细胞内外冰晶生长而产生的机械力量引起的。特别是对于有细胞膜的生命体影像较大。一般冰晶越大,细胞膜越易破裂,从而造成细胞死亡;冰晶小,对细胞膜的机械损伤也较小。缓慢冷冻产生的冰晶较大,快速冷冻产生的冰晶较小;就此而言。快速冷冻对细胞的影响较小。缓慢冷冻容易引起细胞的死亡。溶质效应是由于水的冻结使间隙液体逐渐浓缩,从而使电解质的浓度增加,蛋白质对电解质是较敏感的。电解质浓度的增加引起蛋白质的变性,而使细胞死亡;另外电解质浓度的增加会使细胞脱水而死亡。间隙液体浓度越高。上述原因引起的破坏也越厉害。溶质效应在某一温度范围最为明显。这个温度范围在水的冰点和该液体的全部固化温度之间。若能以较高的速度越过这一温度范围,溶质效应所产生的效果就能大大减弱。另外冷冻时所形成的晶体大小在很大程度上也影响干燥的速率和干燥后产品的溶解速度。大的冰晶容易升华,小的冰晶不利于升华;但大的冰晶溶解慢,小的冰晶溶解快。冰晶越小、干燥后越能反映产品的原来结构。综上所述,需要有一个最优的冷却速率。以得到最高的细胞存活率,最好的产品物理性状和溶解速度。当然提高存活率与在产品中加入抗低温剂(保护剂之一)还有很大的关系。列如甘油、二甲亚砜、糖类等。这些抗低温物质能帮助产品扩大最优冷却速率的范围,以便使更多的细胞存活下来。为了获的不同的降温速度。就要采取不同的预冻方法;列如有时需装箱之后才开始冻干箱的降温,有时需让机器预先降到低温,再将产品装入冻干箱内。预冻的目的也是为了固定产品,以便在真空下进行升华。如果没有冻实。则抽真空时产品会冒出瓶外来,没有一定的形状;如果冷的过低,则不仅浪费了能源和时间,而且对某些产品还会降低存活率。因此预冻之前应确定三个数据。其一是预冻的速率,应根据产品不同而试验出一个最优冷冻速率。其二是预冻的最低温度,应根据改产品的共熔点来决定,预冻的最低温度应低于共熔点的温度。其三是预冻的时间,根据机器的情况来决定,保证抽真空之前所有产品均已冻实。不致因抽真空而冒出瓶外,冻干箱的每一板层之间,每一板层的各部分之间温差越小,则预冻的时间可以相应缩短,一般产品的温度达到预冻最低温度之后1-2小时即可开始抽真空升华。第五节 产品的第一阶段干燥产品的干燥可分为二个阶段,在产品内的冻结冰消失之前称第一阶段干燥、也叫作解吸干燥阶段。产品在升华时要吸收热量,一克冰全部变成水蒸汽大约需要吸收670卡左右的热量,因此升华阶段必须对产品进行加热。但对产品的加热量是有限度的,不能使产品的温度超过其自身共熔点温度。升华的产品如果低于共熔点温度过多,则升华的速率降低,升华阶段的时间会延长;如果高于共熔点温度,则产品会发生熔化,干燥后的产品将发生体积缩小,出现气泡,颜色加深,溶解困难等现象。因此升华阶段产品的温度要求接近共熔点温度,但又不能超过共熔点温度。由于产品升华时,升华面不是固定的。而是在不断的变化,并且随着升华的进行,冻结产品越来越少。因此造成对产品温度测量的困难,利用温度计来测量均会有一定的误差。可以利用气压测量法来确定升华时产品的温度,把冻干箱和冷凝器之间的阀门迅速地关闭1-2秒的时间(切不可太长)。然后又迅速打开,在关闭的瞬间观察冻干箱内的压强升高情况,计下压强升高到某一点的最高数值。从冰的不同温度的饱和蒸汽压曲线或表上可以查出相应数值,这个温度值就是升华时产品的温度。产品的温度也能通过对升华产品的电阻的测量来推断。如果测得产品的电阻大于共熔点时的电阻数值,则说明产品的温度低于共熔点的温度;如果测得的电阻接近共熔点时的电阻数值,则说明产品温度已接近或达到共熔点的温度。冷冻干燥时冻干箱内的压强,过去认为是越低越好,现在则认为不是越低越好,而是要控制在一定的范围之内。压强低当然有利于产品内冰的升华。但由于压强太低时对传热不利,产品不易获得热量,升华速率反而降低。实验标明:在冻干箱的压强低于0.1毫巴时,气体的对流传热小到可以忽略不计;而压强大于0.1毫巴时,气体的对流传热就明显增加。在同样的板层温度下,压强高于0.1毫巴时,产品容易获得热量,因而升华速率增加。但是,当压强太高时,产品内冰的升华速率减慢,产品吸热量降减少。于是产品自身的温度上升,当高于共熔点温度时,产品将发生熔化,造成冻干失败。冻干箱的合适压强一般认为是在0.1~0.3毫巴之间,在这个压强范围内,既利于热量的传递又利于升华的进行。超过0.3毫巴时,产品可能熔化,此时应发出真空报警信号,切断对产品的加热,甚至启动冷冻机对冻干箱进行降温,以保护产品不致发生熔化。冻干箱内的压强是由空气的分压强和水蒸汽的分压强组成的,因此要使用能测量全压强的热真空计来测量真空度;而不宜使用压缩式真空计,以水银为介质的压缩式真空计由于水银蒸汽有害产品应禁止使用。1克冰在压强0.1毫巴时大约能产生10000升体积的蒸汽,为了排除大量的水蒸汽,光靠机械真空泵排除是不行的。冷凝器作为冷却使大量水蒸汽凝结在其内部的制冷表面上,因此冷凝器实际上起着水蒸汽泵的作用。大量水蒸汽凝结时放出的热量能使冷凝器的温度发生回升,这是正常的现象。但由于冷凝器冷冻机的制冷能力不够,冷凝器吸附水蒸汽的表面太小,或对产品提供热量过多而产生过多的水蒸汽等原因,会引起冷凝器温度的过度回升。当发生这种情况时。冻干箱和冷凝器之间的水蒸汽压力差减小,从而导致升华速率的降低;与此同时冻干机系统内水蒸汽的分压强增强,使真空度恶化,进而又引起升华速率的减慢,产品吸收热量减少,产品温度上升,致使产品发生熔化,冻干失败。因此为了冷冻干燥出好的产品,需要保持系统内良好而稳定的真空度。需要冷凝器始终能低于-40℃以下的低温,因为-40℃时冰的蒸汽压为0.1毫巴左右。在升华干燥阶段,冻干箱的板层是产品热量的来源。板层温度高,产品获得的热量就多;板层温度低,产品获得的热量就少;板层温度过高,产品获得过多的热量使产品发生熔化;板层温度过低,产品得不到足够的热量会延长升华干燥时间。因此,板层的温度应进行合理的控制。板层温度的高低应根据产品温度、冻干箱的压强(即冻干箱的真空度)、冷凝器温度三个因素来确定。如果在升华干燥的时候,产品的温度低于该产品的共熔点温度较多,冻干箱内的压强小于真空报警设定的压强较多,冷凝器温度也低于-40℃较多,则板层的加热温度还可以继续提高。如果板层温度提高到某一数值之后产品的温度已接近共熔点温度,或者冻干箱的压强上升到接近真空报警的数值或者冷凝器温度回升到-40℃,则板层温度不可再继续提高,不然会出现危险的情况。实际上升华时板层温度的高低还与冻干机的性能有关,性能较好的冻干机,板层的加热温度可以升得高一些。升华阶段时间的长短与下列因素有关:产品的品种:有些产品容易干燥,有些产品不容易干燥。一般来说,共熔点温度较高的产品容易干燥,升华的时间短些。产品的分装厚度:正常的干燥速率大约每小时使产品下降1毫米的厚度。因此分装厚度大,升华时间也长。升华时提供的热量:升华时若提供的热量不足,则会减慢升华速率,延长升华阶段的时间。当然热量也不能过多地提供。冻干机本身的性能,这包括冻干机的真空性能,冷凝器的温度和效能,甚至机器构造的几何形状等,性能良好的冻干机使升华阶段的时间较短些。在产品的第一阶段时,除了要保持冻结产品的温度不能超过共熔点以外,还要保持已干燥的产品温度不能超过崩解温度。所谓崩解温度是对已经干燥的产品而言的。已干燥的产品应该是疏松多乱,保持一个稳定的状态,以便下层冻结产品中升华的水蒸汽顺利通过,使全部的产品都良好的干燥。但某些已干燥的产品当温度达到某一数值时会失去刚性,发生类似崩溃的现象,失去了疏松多乱的性质,使干燥产品有些发粘。比重增加,颜色加深。发生这种变化的温度就叫做崩解温度。干燥产品发生崩解之后,阻碍或影响下层冻结产品升华的水蒸汽的通过,于是升华速度减慢冻结产品吸收热量减少,由板层继续供给的热量就有多余。将会造成冻结产品温度上升,产品发生熔化发泡现象。崩解温度与产品的种类和性质有关,因此应该合理的选择产品的保护剂,使崩解温度尽可能高一些,例如产品的崩解温度应高于该产品的共熔点温度。崩解温度一般由试验来确定,通过显微冷冻干燥试验可以观察到崩解现象,从而确定崩解温度。

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