更全的杂志信息网

Sysmex XS-800i 血细胞分析仪血小板计数性能评价

更新时间:2016-07-05

Sysmex XS-800i全自动血细胞分析仪具有故障率低、噪音低、稳定性强、操作简单等特点,并且检测成本适中,适合于大、中、小型的医疗单位使用。因其可进行微量血液检测(仅需20 μL),更加适用于小儿科、化疗科等采血相对困难的人群。Sysmex XS-800i仪器计数血小板(platelet,PLT)联合应用电阻抗法和浮动界标技术,即根据红细胞(red blood cell,RBC)和PLT因体积大小不同所致分布曲线的差别,用微积分方法计算两者交界处的最低点,作为PLT和RBC的分界线,一般在10~35 fL。小于此分界线的血细胞数量即为PLT数。但是,电阻抗法本身无法完全排除非PLT颗粒(如细胞碎片、细菌、真菌等)的干扰[1-2]。笔者科室的Sysmex XS-800i仪主要用于儿科患者末梢血标本的检测,自使用以来已经建立了完善的复检规则。但随着设备使用时间增长,仪器报警增多,PLT计数的假阴性率有增高趋势。为保证PLT计数的准确性,依据ISO 15189《医学实验室质量和能力认可准则》的要求[3],笔者科室对Sysmex XS-800i仪检测PLT的性能和影响因素重新进行全面评估,以期为修订该仪器的PLT复检规则提供依据,现报道如下。

1 材料与方法

1.1 标本 收集2017年3-5月在笔者医院儿科就诊患儿的末梢及静脉血液标本共498例。所有受检标本用EDTA-K2抗凝,充分混匀防止凝固,2 h内完成检测。

1.2 主要仪器与试剂

1.2.1 仪器 全自动血细胞分析仪(Sysmex XS-800i,日本希森美康公司);全自动血细胞分析仪(ADVIA 2120i,德国西门子公司);OLYMPUS普通光学显微镜(CX31,日本奥林帕斯公司);改良牛鲍计数板、EDTA-K2真空负压采血管(批号:OTD6O26,福州长庚医疗器械公司);微量采血管(批号:V29S518E5,美国MEDLANCE公司)。

1.2.2 试剂 Sysmex XS-800i检测试剂:CELLPACK稀释液(批号:G 6459),低值质控品(批号:70780810),中值质控品(批号:70780811),高值质控品(批号:70780812),均为希森美康公司。ADVIA 2120i检测试剂:RBC/PLT计数(批号:90995),SHEATH/RINCE(批号:0247),中值质控品(批号:TP 72035),高值质控品(批号:TP 73035),均为德国西门子公司。1%草酸铵稀释液(PLT稀释液)参照文献[4]的要求配置,4 ℃保存。Baso瑞氏吉姆萨染色液(批号:416092,珠海贝索公司)。

《儿科阿奇霉素注射使用的快速建议指南》实施方案介绍…………………………………………………… 周鹏翔等(4):436

1.3 PLT 测定方法

2.2 线性分析 对高、低值标本进行等浓度梯度稀释后,以理论计算值为x轴,实际测试值为y轴,回归方程为y=1.001x+6.163,r=0.999 5,实际测量值与理论计算值相关性良好,表明仪器在厂家提供的测量范围内线性良好(图1)。

1.3.1.1 阻抗法(PLT-I) 按照Sysmex XS-800i的标准操作规程操作。操作前参照文献[5]进行校准,确保仪器正常运行。运行质控在控,试剂无过期变质现象。记录PLT计数结果,观察直方图,记录相关报警(如PLT直方图异常、PLT聚集、RBC碎片、小RBC等)。

1.3.1.2 光学法(PLT-O)二维激光法 按照ADVIA 2120i的标准操作规程操作。操作前确保仪器正常运行。运行质控在控,试剂无过期变质现象。记录PLT计数结果。

本研究发现ESRD行透析治疗患者肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导剂(sTWEAK)水平较健康对照组明显降低。sTWEAK水平随肾功能逐渐下降而降低,sTWEAK及FMD均随eGFR的减退而下降。随着肾脏损害程度的增加,患者血清sTWEAK浓度相应降低,治疗后浓度较治疗前提高。

1.3.2 显微镜计数法(PLT-M) 参照文献[4]操作。由2名技术熟练的技师采用双盲法进行显微镜下PLT的计数,取2人计数平均值。2人计数差别较大时,则由第3人计数。取3次结果中相近的2次均值作为显微镜检计数值。

徐培均先生的《李清照集笺注》,收录了李清照的诗16首、词53首、文10篇。这本书选用的是罕见的明汲古阁未刻词本作底本,辅以清汪玢辑、清沈瑾手抄本等相互参校,颇具校勘价值。着实钦佩徐培均先生克服千难,埋首纸堆,不遗余力地寻求易安词的“沧海遗珠”,给了我等全面了解易安的机会。

就EAR而言,通过计算得出EARr和EARl后,将EARr和EARl分别与预先设定好的阈值进行比较,判断左右眼是否闭眼,当双眼同时满足闭眼条件时,开启定时器,结束条件为下一次某只眼睛睁眼或同时睁眼,测得闭眼时长,与预先设定好的时间阈值进行比较后判断是否存在长时间闭眼。同理可以得到打哈欠状态。

1.7 统计学处理 运用SPSS 17.0软件及Excel软件进行数据处理,对各组间差别性比较采用配对t或独立样本t检验,P<0.05为差别具有统计学意义。

1.4 性能评价 参照文献[6]执行。

1.5.2 大PLT干扰评价 统计100名健康体检儿童的平均血小板体积(mean platelet volume,MPV)值,得出均数与标准差(s)。以将MCV正常末梢血标本60例分为3组,2种方法(PLT-I、PLT-M)检测PLT并进行配对t检验。

1.4.1 日内精密度 取PLT高、中、低值静脉血标本各1份,分别用仪器连续测量11次,剔除第1次结果,计算其变异系数(CV)、标准差(s)及均值

1.4.2 批间精密度 取Sysmex XS-800i原装全血质控品,每天随送检标本一同进行检测,连续测定20个工作日,计算其变异系数(CV)、标准差(s)及均值

1.4.3 线性实验 将相同血型,PLT高值(>900×109 L-1)、低值(<30×109L-1)两份静脉血标本按5∶1,4∶2,3∶3,2∶4及1∶5的比例配制成系列浓度,加上原标本,共7个标本,每个标本重复检测3次取平均值,以计算理论值为x轴,实际测试值为y轴,做线性回归分析。

1.4.4 携带污染率 取1份PLT高值(PLT>900×109 L-1)标本连续测定3次(H1,H2,H3),再取1份PLT低值(PLT<30×109 L-1)标本连续测定3次(L1,L2,L3),用公式(L1-L3)/(H1-L3)×100%计算携带污染率。

等效连续介质模型是由Snow[1]提出的,Long等[2]、Oda[3]、张有天[4]、田开铭等[5-6]都对等效连续介质模型进行过研究。该模型对于解决裂隙密度较大的大尺度研究域问题有较好的效果,简单实用,能满足大多数工程的需要。

1.4.6 低值PLT一致性验证 选取20例PLT低值(<55×109L-1)末梢血标本,涂片染色后镜下观察无大PLT、小RBC/RBC碎片干扰,无PLT聚集等干扰现象。分别用Sysmex XS-800i分析仪、ADVIA 2120i分析仪和显微镜检法计数PLT。以镜检法为参考方法,通过线性回归分析血液分析仪与镜检法的一致性。

1.5 影响因素评价

1.5.1 小RBC干扰评价 分为2组实验。

由于文中循环流化床锅炉的分离器中无再燃烧,所以烟气经分离器后其温度会略有降低,在此假定其分离器出口烟温即炉膛进口循环灰温度比炉膛出口烟温低了5℃。

第1组实验选取PLT直方图正常、无大PLT且平均红细胞体积(mean corpuscular volume,MCV)<80 fL的末梢血标本90例。为了提供更精确的复检规则依据,本组中以80,75和70为节点分成3小组,即75 fL t检验。

第2组实验选取PLT直方图异常(峰高降低、右侧不平滑且不与横坐标相切、峰底变宽、翘尾等现象,或仪器有报警提示)、无大PLT且MCV<80 fL末梢血标本120例,因本实验室目前建立的复检规则为“MCV<65 fL时需镜检”,为了验证和细化该规则,本组按75 fLt检验。

海洋公园是海洋特别保护区的一种类型,为保护海洋生态系统、自然文化景观,发挥其生态旅游功能,在特殊海洋生态景观、历史文化遗迹、独特地质地貌景观及其周边海域划定的区域[2]。在选择和确定海洋公园时,海洋公园评价标准判断其优劣、取舍以及保护价值、等级。国家级海洋公园研究报道常见,如评审标准[3]、制度建设研究[4]、生态保护目标[5]等,而针对省级海洋公园尚少。本文以浙江省为例,突出和体现省级海洋公园特色,确保新建和晋级省级海洋公园质量,参考国家级海洋公园[3]、自然保护区[6,7]、国家地质公园[8]等标准体系,进行省级海洋公园评价标准指标体系研究。

2.1 精密度分析 低、中、高值日内和批间精密度分别为4.27%,1.39%,1.15%和4.09%,1.38%,1.90%,均在可接受精密度范围内(≤5.0%)(表1)。

1.3.3 镜检估值法 取标本5 μL,制成血涂片,进行瑞氏-吉姆萨染色。正常情况下在血片厚薄适中区域(RBC散开,互相接触但不重叠,相邻RBC的距离不超过1个RBC),每个油镜视野约有8~15个PLT,或每10~30个RBC中见到1个PLT。油镜下计数11个视野的PLT总数各2次,取平均值。此法作为PLT过高或过低时,显微镜计数法的补充方法,同时作为PLT聚集和大PLT验证及筛查方法。

2 结 果

1.6 仪器报警有效性验证实验 影响PLT计数的报警类型主要为“小RBC”、“RBC大小不一”、“大PLT”“PLT分布异常”及“PLT聚集”。选取含上述报警和无报警的末梢血标本共189例进行人工涂片镜检。分别计算各仪器报警的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值。

表1 精密度实验结果

Tab 1 Results of precision experiment

分组日内精密度x(×109L-1)sCV(%)批间精密度x(×109L-1)sCV(%)低值41.91.794.2753.12.174.09中值269.53.751.39219.83.041.38高值475.55.461.15511.79.731.90

1.3.1 仪器计数法

图1 线性分析结果 Fig 1 Results of linearity experiment

2.3 携带污染率 PLT高值分别为H1:962×109 L-1,H2:971×109L-1,H3:971×109L-1。低值分别为L1:22×109L-1,L2:21×109L-1,L3:21×109L-1。携带污染率为0.11%,符合标准要求(≤4.0%)。

2.4 正确度验证 在测量范围内,Sysmex XS-800i与参加室间质评的西门子ADVIA 2120i的检测符合率达90%,符合标准要求(表2)。

1.4.5 正确度验证 取一定浓度范围内10份新鲜末梢血液标本,在Sysmex XS-800i和ADVIA 2120i上同时检测PLT,以参加室间质评的ADVIA 2120i为基准仪器,计算偏倚,偏倚应≤12.5%。若PLT<40×109 L-1,偏倚应≤15.0%。80%以上符合为正确度验证合格。

2.5 低值PLT一致性评价 对于低值范围内的PLT(11×109~55×109 L-1),两台仪器检测与镜检法的一致性均良好,Sysmex XS-800i分析仪回归方程:y=8.575×10-1x + 0.530 3,r=0.923 9。ADVIA 2120i分析仪回归方程y=8.746×10-1x+3.878,r=0.908 0。数据提示Sysmex XS-800i对11×109~55×109 L-1范围内的低值PLT的准确性良好,略优于ADVIA 2120i(图2,3)。

2.6 小RBC干扰评价 PLT直方图正常组与人工显微镜检计数相比,MCV<70 fL时仪器计数结果差别有统计学意义(P=0.004);PLT直方图异常组MCV<75 fL时,各实验组仪器检测结果差别有统计学意义(P=0.043,0.003,0.000)(表3)。

如何使代理人——经理保持诚实、讲信誉,努力为委托人——股东努力工作是上市公司治理中必须研究和考虑的问题。一般来说,经理人对股东具有忠实义务。忠实义务就是为了保护上市公司股东免受经理人机会主义行为的侵害。

表2 正确度验证实验结果

Tab 2 Results of accuracy experiment

SysmexXS-800iADVIA2120i偏倚(%)是否符合(Y/N)7785-9.4Y18216013.8N4844654.1Y5325133.7Y14140.0Y4614307.2Y4042-4.8Y1981961.0Y28525710.9Y2282184.6Y

图2 Sysmex XS-800i与镜检法的低值PLT检测一致性 Fig 2 Correlation of Sysmex XS-800i with manual microscopy for low-value PLT count

图3 ADVIA2120i与镜检法的低值PLT检测一致性 Fig 3 Correlation of ADVIA2120i with manual microscopy for low-value PLT count

表3 不同小红细胞组仪器与显微镜检血小板计数结果比较

Tab 3 Comparation of PLT count between Sysmex XS-800i and manual microscopy in different small RBC groups

组别n仪器计数人工镜检直方图正常75fL

MCV:平均红细胞体积. 与人工镜检比较,△:P<0.05.

2.7 大PLT干扰评价 100名健康儿童体检者组中的MPV均数与标准差(s)分别为10.0及组仪器检测结果与人工镜检计数比较,差别具有统计学意义(P=0.016,0.015)(表4)。

表4 不同大血小板组仪器与显微镜检血小板计数结果比较

Tab 4 Comparation of PLT count between Sysmex XS-800i and manual microscopy in different large PLT groups

组别n仪器计数人工镜检MPV>x+s20231±99238±103MPV>x+2s20262±144△275±149MPV>x+3s20207±121△224±131

MPV:平均血小板体积. 人工镜检比较,△:P<0.05.

2.8 仪器报警有效性验证 影响仪器计数PLT的报警有效性验证结果如表5所示。各报警的敏感性、阴性预测值均较好。特异性较高的报警为“RBC大小不一”和“小RBC”,较差的是“PLT聚集”。阳性预测值最高的报警为“RBC大小不一”,较低的是“PLT聚集”和“大PLT”。

表5 影响血小板计数的相关报警有效性验证结果

Tab 5 Validity check results of alarms influencing PLT count %

报警信息敏感性特异性阳性预测值阴性预测值小红细胞84.2183.8776.1989.66红细胞大小不一85.1889.4792.0080.95大血小板86.6778.5768.4291.67血小板分布异常90.0080.0081.8288.89血小板聚集100.0050.0066.67100.00

3 讨 论

多数医院使用全自动血液分析仪计数PLT。性能优越、稳定的仪器可以大大提高工作效率,缓解人力压力。但是,仪器计数只是“筛选”手段,各单位应全面了解仪器的检测性能,定期进行性能验证和评估[4],建立适用的人工镜检规则,以保证仪器计数的稳定性和准确性[7-9]

黄庭坚强调炼句,多有奇妙之语,朝鲜诗人就经常取黄庭坚的诗语入诗,如李穑《又赋》说朋友“诗语自变如涪翁”[2](4辑,P282),奇大升《围棋》表示“涪翁妙句心能会”[2](40辑,P25),金锡胄《纳清亭》也“徘徊为觅涪翁句”[2](145辑,P229),金镇圭《寿伯氏生朝》说哥哥“孤生已感涪翁语”[2](174辑,P56)。诗人们用黄庭坚诗语主要有三种形式:巧妙点化、稍作改动和直接引入。

本研究显示,PLT检测的精密度、携带污染率、线性、正确度均符合要求,提示Sysmex XS-800i仪检测PLT性能良好,结果可靠。低值PLT检测的准确性对于血液病诊断、输血意义重大。研究发现,对于低值PLT的检测,PLT-I和PLT-O检测的不精密度均较高[10]。本研究中,Sysmex XS-800i仪检测低值标本的不精密度高于中、高值标本。笔者还对低值标本仪器与人工的检测一致性进行了初步评估,研究发现在选取的PLT低值区间(11×109~55×109 L-1),Sysmex XS-800i仪与镜检计数法的一致性良好,r=0.923 9,略优于使用光学法(PLT-O)的ADVIA 2120i仪(r=0.908 0),与文献报道的结论相符[11]。也有报道认为,当PLT数在20×109~50×109 L-1及10×109~20×109 L-1时,PLT-I法的AUC为0.895和0.830[12],表明PLT计数减少导致PLT-I检测的准确性下降,但是结果的可靠性依然较高。因此,在日常工作中对于低值PLT可使用PLT-I法检测,必要时采用镜检法进行确认。当怀疑低值结果是由标本质量问题或存在特殊情况干扰所导致时,更应该采用镜检法以便直观、真实地反映 PLT状况[13]。本研究中选取的标本例数尤其是极低值(<20×109L-1)的标本较少,后续研究中,还需增加标本数,以便对极低值标本的检测一致性进行更客观的评估。

小RBC和大PLT是Sysmex XS-800i仪PLT计数的重要影响因素。本研究中发现, PLT直方图正常MCV<70 fL与PLT直方图异常MCV<75 fL均可使PLT计数结果假性增高,与人工计数法相比差别具有统计学意义(12 fL)可使PLT计数结果假性降低,与人工镜检法相比差别具有统计学意义(P<0.05)。本研究显示,在影响PLT计数的仪器报警中,“RBC大小不一”和“小RBC”的特异性较高,分别为89.47%和83.87%;“PLT聚集”的特异性较差,为50.00%。阳性预测值最高的报警为“RBC大小不一”(92.00%),较低的是“PLT聚集”(66.67%)和“大PLT”(68.42%)。笔者科室现用的PLT复检规则为“当MCV <65 fL时”、“当存在任何仪器报警时”需镜检,未对大PLT作出量化的复检标准。根据本研究结论,MCV节点设置偏低,可能导致漏检,造成假阴性率偏高;不同报警有效性不一样,所有报警都复检可能导致复检率高,增加人力负担。因此,考虑将上述复检规则细化为以下几点:(1) MCV <70 fL或MCV <75 fL并且PLT直方图异常时;(2)MPV> 12 fL时;(3)存在“RBC大小不一”和“小RBC”报警时;(4)存在“PLT聚集”和“大PLT”报警,且PLT结果低于正常参考值下限时。这些规则尚需实验人员在实际工作中进一步验证。

人们的大部分时间一般都是在室内进行的,墙面若是产生渗水会对人们的室内活动产生很大的影响,当前工业与民用建筑很多都是高层建筑,很容易使得屋面产生漏水的情况,因此就需要采用相应的屋面防水防渗对策。防水防渗技术当中所采用的相关材料和水泥的性质比较相似,都是水硬性材料,在实际的施工当中尽可能的避免在一些湿度比较大的环境中应用,避免对其性能产生影响。阴雨天也会对工业与民用建筑的防渗设备产生影响,因此,在施工中需要选取科学合理的天气来进行。相对于工业与民用建筑墙面所产生的渗水问题需要强化排水设施的建设,对排水位置和技术合理规划。

参考文献:

[1] Briggs C,Harrison P,Machin S J.Continuing developments with the automated platelet count[J].Int J Lab Hematlo,2007,29(2):77-91.

[2] 凌 励,周道银,惠小阳,等.激光染色法与电阻抗法检测PLT方法的比较[J].中华检验医学杂志,2004,27(10):717-718.

[3] 中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02(ISO15189:2012)医学实验室质量和能力认可准则[S].北京:中国计量出版社,2013.

[4] 尚 红,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].4版.北京:人民卫生出版社,2014.

[5] 中华人民共和国卫生部.WS/T 347-2011 血细胞分析校准指南[S]. 北京:人民卫生出版社,2011.

[6] 中华人民共和国卫生部.WS/T 406-2012临床血液学检验常规项目分析质量要求[S]. 北京:人民卫生出版社,2012.

[7] Rooh S. Implementation of international slide review criteria for improving the efficiency of the haematology laboratory[J].Apollo Medicine,2010,7(11):286-288.

[8] 王 悦,刘汝锋,任颖佳,等.肿瘤专科血液复检规则的初步建立和评价[J].临床检验杂志,2013,31(1):1-3.

[9] 王月芳, 江咏梅, 张 鸽,等.妇儿专科医院血液分析复检规则的建立及验证[J].检验医学,2013,28(4):296-300.

[10] 黄 媛,黄春梅,李建英,等.XN-2000血液分析仪低值PLT计数复检规则的制定[J].临床检验杂志,2014,32(1):48-51.

[11] 胡梅霞,李学梅.4种检测方法在低值血小板计数中的应用比较[J].检验医学与临床,2017,14(12):1828-1830.

[12] 张 蕾,李晶华,李 智,等.Sysmex XE-2100全自动血液分析仪对低值血小板检测应用探讨[J].中华检验医学杂志,2010,33(5):457-459.

[13] 华 江,潘 扬.不同检测方法计数血小板的准确性评价[J].临床检验杂志,2015,33(1):12-13.

马跃飞,欧启水,汤绍鹏,王炳龙,林锦骠,杨滨
《福建医科大学学报》2018年第01期文献

服务严谨可靠 7×14小时在线支持 支持宝特邀商家 不满意退款

本站非杂志社官网,上千家国家级期刊、省级期刊、北大核心、南大核心、专业的职称论文发表网站。
职称论文发表、杂志论文发表、期刊征稿、期刊投稿,论文发表指导正规机构。是您首选最可靠,最快速的期刊论文发表网站。
免责声明:本网站部分资源、信息来源于网络,完全免费共享,仅供学习和研究使用,版权和著作权归原作者所有
如有不愿意被转载的情况,请通知我们删除已转载的信息 粤ICP备2023046998号